劉健,章平衡,萬(wàn)磊,黃旦,黃傳兵,張曉軍,孫玥,劉磊

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕科，合肥 230031)

·論著·

干燥綜合征患者肺功能與血小板活化之間的關(guān)系

劉健,章平衡,萬(wàn)磊,黃旦,黃傳兵,張曉軍,孫玥,劉磊

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕科，合肥 230031)

目的探討干燥綜合征患者肺功能與血小板活化之間的關(guān)系。方法選取干燥綜合征患者66例設(shè)為觀察組，同時(shí)選取健康體檢者30例設(shè)為對(duì)照組。采用肺功能儀檢測(cè)患者肺功能，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血血小板分化抗原CD40 配體(CD40L)表達(dá)，魏氏法檢測(cè)血小板(PLT)，ELISA試劑盒檢測(cè)血小板活化因子(PAF)、血小板α顆粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)的水平。結(jié)果與對(duì)照組相比較，觀察組肺功能參數(shù)明顯降低，PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平明顯升高(Plt;0.05)；在觀察組患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能異常率最高為75%肺活量位的最大呼氣流量(FEF75)，其次是FEV1/ FVC、50%肺活量位的最大呼氣流量(FEF50)、25%肺活量位的最大呼氣流量(FEF25)、呼氣峰流速值(PEF)。與不伴肺功能降低的SS組比較，伴肺功能降低的觀察組的PLT、PAF、PDGF水平明顯升高(Plt;0.05)。相關(guān)性分析顯示：SS患者FEV1/ FVC與PDGF呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)EF25與CD40L呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.01)，F(xiàn)EF50與PAF、GMP-140呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.05，Plt;0.01)，F(xiàn)EF75、PEF與PLT呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.05，Plt;0.01)。結(jié)論干燥綜合征患者存在肺功能降低，且肺功能降低與血小板活化及其活化產(chǎn)物的水平密切相關(guān)。

干燥綜合征;呼吸功能試驗(yàn)；血小板活化

干燥綜合征(SS)是一種慢性炎癥性自身免疫性疾病，主要為外分泌腺體的分泌功能損害，故又名自身免疫性外分泌病[1]。其臨床表現(xiàn)主要為口眼干燥、猖獗性齲齒、間歇性交替性腮腺腫痛等。并且常出現(xiàn)其他外分泌腺及腺體外其他臟器受累導(dǎo)致多系統(tǒng)損害的癥狀。其中以肺間質(zhì)病變最為常見(jiàn)，肺間質(zhì)病變是SS臨床分期、疾病評(píng)估、治療預(yù)后的重要指標(biāo)[2-3]。SS繼發(fā)肺間質(zhì)病變臨床表現(xiàn)之一是肺功能水平的降低，因此，應(yīng)及早進(jìn)行肺功能水平的檢測(cè)，及時(shí)診斷，并予以早期治療。研究發(fā)現(xiàn)，在干燥綜合征患者體內(nèi)存在著血小板(PLT)參數(shù)的異常，并且還出現(xiàn)血小板活化因子(PAF)的水平升高[4]。本研究通過(guò)觀察SS患者肺功能水平與血小板活化產(chǎn)物PAF、血小板α顆粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)、血小板分化抗原CD40配體(CD40L)表達(dá)的水平的變化，以期探討SS肺功能降低與血小板活化之間存在的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2014年3月至2015年4月在安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕科門診及住院治療的66例SS患者作為觀察組(SS組)。其中男4例，女62例;年齡31～74歲，平均(53.5±11.6)歲；病程1～24年，平均病程(11.3±7.8)年。另從安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院體檢中心選取30例經(jīng)體檢和免疫學(xué)檢查排除自身免疫性疾病、身體健康、無(wú)明顯器質(zhì)性疾病者作為健康對(duì)照組(NC組)。男3例，女27例；年齡20～70歲，平均(34.6±7.4)歲。兩組在年齡、性別等方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)，具有可比性。

1.2 觀察組納入標(biāo)準(zhǔn) (1)符合原發(fā)干燥綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)年齡在30～75歲之間；(3)自愿參加本項(xiàng)研究，同意藥物治療方案并簽署知情同意書，按醫(yī)囑服用藥物，依從性好。

1.3 觀察組排除標(biāo)準(zhǔn) (1)不符合上述納入標(biāo)準(zhǔn)者；(2)年齡小于30歲或大于75歲者；(3)長(zhǎng)期服用慢作用抗風(fēng)濕藥或激素，且在本研究前至少1個(gè)月內(nèi)未停用，或使用非甾體抗炎藥，且在本研究前至少1周內(nèi)未停用；(4)合并心血管、肺、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病；(5)精神病患者；(6)妊娠及哺乳期婦女；(7)研究者認(rèn)為不宜進(jìn)行此項(xiàng)臨床試驗(yàn)者。

1.4 方法 檢測(cè)用力呼氣量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、25%肺活量位的最大呼氣流量(FEF25)、50%肺活量位的最大呼氣流量(FEF50)、75%肺活量位的最大呼氣流量(FEF75)和最大呼氣流量(PEF)。按照ELISA試劑盒說(shuō)明書操作測(cè)定PAF、GMP-140、PDGF的含量。并用SysmexXT-2000i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)PLT。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD40L表達(dá)。采集SS患者外周靜脈血5 mL，肝素抗凝；取肝素抗凝的全血100 μL，加入小鼠抗人CD40L-FITC 10μL，室溫閉光反應(yīng)30 min；加2 mL溶血?jiǎng)┰谑覝叵氯芙饧t細(xì)胞，室溫閉光約10 min；PBS洗滌2次，離心5 min(1500 r/min)，棄上清；每份標(biāo)本加入0.1%多聚甲醛500 μL后用Epics XL流式細(xì)胞儀檢測(cè)，用CeQuest軟件分析,計(jì)算CD40L的陽(yáng)性表達(dá)率。

2 結(jié)果

2.1 SS的肺功能變化 與NC組相比較，SS組肺功能參數(shù)FEV1/ FVC、FEF25、FEF50、FEF75、PEF明顯降低；在SS患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能異常率最高為FEF75，其次是FEV1/FVC、FEF50、FEF25、PEF。見(jiàn)表1。

2.2 SS患者外周血血小板及血小板活化產(chǎn)物的變化 與NC組比較，SS組PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平明顯升高(Plt;0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 伴或不伴肺功能降低的SS患者外周血血小板及血小板活化產(chǎn)物的變化 與不伴肺功能降低的SS組比較，伴肺功能降低的SS組的PLT、PAF、PDGF水平明顯升高(Plt;0.05)。見(jiàn)表3。

表1 RA患者肺功能的變化

表2 SS患者外周血血小板及血小板活化產(chǎn)物的變化

表3 伴或不伴肺功能降低的SS患者外周血血小板及血小板活化產(chǎn)物的變化

2.4 SS患者肺功能參數(shù)與血小板及血小板活化產(chǎn)物的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示：SS患者FEV1/ FVC與PDGF呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.05)，F(xiàn)EF25與CD40L呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.01)，F(xiàn)EF50與PAF、GMP-140呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.05，Plt;0.01)，F(xiàn)EF75、PEF與PLT呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.05，Plt;0.01)。見(jiàn)表4。

表4 SS患者肺功能參數(shù)與血小板及血小板活化產(chǎn)物的相關(guān)性分析

注：表格內(nèi)為r值；aPlt;0.05，bPlt;0.01

3 討論

SS肺間質(zhì)病變導(dǎo)致感染以及呼吸功能的衰竭，是其死亡的主要原因之一[5-6]。因此，早期對(duì)SS患者肺功能及其影像學(xué)的監(jiān)測(cè)尤為重要。通過(guò)本研究可以發(fā)現(xiàn)，SS組肺功能參數(shù)FEV1/ FVC、FEF25、FEF50、FEF75、PEF明顯降低；在SS患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能異常率最高為FEF75，其次是FEV1/FVC、FEF50、FEF25、PEF。FEV1/ FVC反映其限制性通氣功能障礙的改變；PEF反映其阻塞性通氣障礙的改變；FEF25、FEF50、FEF75反映其小氣道阻塞及通氣功能的減退。有報(bào)道[7]提示，結(jié)締組織病肺間質(zhì)病變可引起小氣道阻塞，表現(xiàn)為FEF25、FEF75下降，且發(fā)生率高，本研究結(jié)果提示SS患者肺功能改變主要表現(xiàn)為小氣道功能障礙。SS屬結(jié)締組織病范疇，病理基礎(chǔ)是血管炎，常表現(xiàn)為血液黏稠度增加，血液流行緩慢，微循環(huán)障礙，皮膚血管病變[8]、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷[9]等。在臨床上還發(fā)現(xiàn)SS患者存在血小板的水平異常[10]。而血小板活化后可產(chǎn)生多種活性物質(zhì)PAF、GMP-140、PDGF、CD40L。在我們的研究中發(fā)現(xiàn)，SS患者體內(nèi)存在PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平的升高。

PAF能激活血小板、單核-巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，還可直接作用于肺血管內(nèi)皮細(xì)胞膜受體，致使血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷[11]。肺組織可存在PDGF活性增加，從而促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖、肥大和遷移。GMP-140是一種顆粒膜蛋白。CD40L還可刺激炎癥部位的單核巨噬細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子,增加血管通透性,提高炎性滲透,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移和新生血管形成[12]。當(dāng)SS患者出現(xiàn)血管受累表現(xiàn)為血管炎時(shí)，肺部的血管很容易發(fā)生病變，從而出現(xiàn)血管內(nèi)皮的損傷，導(dǎo)致肺功能的降低，通過(guò)我們的研究分析發(fā)現(xiàn)與不伴肺功能降低的SS組比較，伴肺功能降低的SS組的PLT、PAF、PDGF水平明顯升高，并且通過(guò)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)SS患者FEV1/ FVC與PDGF呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)EF25與CD40L呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)EF50與PAF、GMP-140呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)EF75、PEF與PLT呈負(fù)相關(guān)。說(shuō)明血小板活化及血小板活化產(chǎn)物的水平升高能夠?qū)е耂S患者肺功能的降低。

綜上所述，SS患者不僅存在肺功能的降低，還存在血小板的活化及血小板活化產(chǎn)物的大量分泌，且血小板的活化及其活化產(chǎn)物的大量分泌與SS肺功能降低密切相關(guān)。

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Relationshipbetweenplateletactivationandlungfunctioninpatientswithsjogren′ssyndrome

LiuJian,ZhangPingheng,WanLei,HuangDan,HuangChuanbing,ZhangXiaojun,SunYue,LiuLei

(DepartmentofRheumatology，theFirstAffiliatedHospitalofAnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Hefei230031，China)

ObjectiveTo explore the relationship between platelet activation and lung function in patients with sjogren′s syndrome.MethodsSixty-six cases of SS and 30 cases of healthy control were selected.The German Jager MasterScreen automatic lung function tester was used to detect the pulmonary function parameters.Flow cytometrydetection was used to detect the CD40L.PLT was analyzed by automatic blood cell analyzer.And the levels of PAF,GMP-140 and PDGF were detected by ELISA.ResultsCompared to the NC group,pulmonary function parameters of RA were significantly decreased,but PLT,PAF,GMP-140,PDGF and CD40L were significantly increased (Plt;0.05).Forty patients with abnormal lung function,accounted for 60.61%,was observed,in which the highest abnormal lung function was FEF75,followed by FEV1/FVC,FEF50,FEF25and PEF.Compared with SS patients without lung function reduced,PLT,PAF,and PDGF were significantly increased in SS patients with lung function reduced(Plt;0.05).Spearman analysis showed that FEV1/ FVC was negatively correlated with PDGF,and FEV25was negatively correlated with CD40L(Plt;0.01),FEF75and PEF were negatively correlated with PLT(Plt;0.05).ConclusionThere is decreased lung function in patients with SS,which is closely related to platelet activation and products .

Sjogren′s syndrome；Respiratory function tests；Platelet activation

國(guó)家自然基金青年項(xiàng)目(81403388);安徽省自然基金項(xiàng)目(1508085QH159);安徽省高校自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(KJ2017A281)；安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室資助項(xiàng)目(1606c08238)

劉健，主任醫(yī)師，教授，博士生導(dǎo)師，Email:liujianahzy@126.com

R442.8

A

10.3969/J.issn.1672-6790.2017.06.008

2017-06-16)