戰(zhàn) 旗，畢建云，張震宇

(山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355)

薄荷油微囊制備所需市售明膠的篩選研究

戰(zhàn) 旗，畢建云，張震宇

(山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355)

目的：從不同廠(chǎng)家市售明膠中篩選薄荷油微囊制備過(guò)程中所需最佳品種。方法：實(shí)驗(yàn)首先對(duì)不同廠(chǎng)家明膠制備的薄荷油微囊進(jìn)行顯微觀(guān)察，對(duì)6個(gè)廠(chǎng)家明膠進(jìn)行首次篩選，后以薄荷油微囊的收率、包封率及載藥量為指標(biāo)對(duì)剩余廠(chǎng)家明膠進(jìn)行最終篩選。結(jié)果：通過(guò)對(duì)微囊的顯微觀(guān)察，篩選出2號(hào)、3號(hào)、6號(hào)廠(chǎng)家明膠制備微囊，通過(guò)后續(xù)的研究最終篩選出6號(hào)廠(chǎng)家明膠制備的薄荷油微囊數(shù)量多，形態(tài)完整，收率、包封率及載藥量均較理想。結(jié)論：表明篩選的明膠可用于薄荷油微囊的制備。

薄荷油；微囊；明膠

微囊以其可以掩蓋藥物的不良?xì)馕都翱谖?；還能夠提高藥物的穩(wěn)定性；并會(huì)減少藥物對(duì)胃的刺激；液體藥物固體化，以方便其使用；減少?gòu)?fù)方藥物的配伍變化等唄廣泛關(guān)注?，F(xiàn)如今，應(yīng)用最多的是通過(guò)微囊化方法形成緩控釋制劑和靶向制劑。

微囊的制備方法可分為物理化學(xué)法、化學(xué)法、物理機(jī)械法三類(lèi)。而物理化學(xué)法中的明膠-阿拉伯膠復(fù)凝聚法是經(jīng)典的微囊化方法，它的特點(diǎn)是用2種材料均有生物可降解、低毒等優(yōu)點(diǎn)，在適當(dāng)?shù)臈l件下由于電荷中和而從溶液中凝聚，從而將芯材包覆形成微膠囊，相對(duì)于單凝聚法產(chǎn)品粒徑較小且均勻，藥物相對(duì)包封率亦較高。薄荷油常溫下有較強(qiáng)的揮發(fā)性，遇光和熱不穩(wěn)定，為了便于其體外發(fā)揮療效，提高穩(wěn)定性，可將薄荷油制成微膠囊包裹物，通過(guò)緩釋達(dá)到所需效果。在本校的藥劑學(xué)與中藥藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)中均采用復(fù)凝聚法，以明膠-阿拉伯膠作為囊材制備薄荷油微囊。而明膠的選擇是微囊成型的關(guān)鍵，文章目的就是需要對(duì)市場(chǎng)上的明膠進(jìn)行考察，需固定明膠生產(chǎn)廠(chǎng)家。

1 材料

1.1 試藥

阿拉伯膠(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；甲醛(萊陽(yáng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠(chǎng))；氫氧化鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；36%乙酸(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；薄荷油(江西雪松天然藥用油有限公司)；明膠(1倉(cāng)庫(kù)袋裝明膠，2倉(cāng)庫(kù)盒裝明膠，3鄭州博研生物科技有限公司，4羅賽洛(中國(guó))明膠有限公司，5天津市博迪化工股份有限公司，6天津市大茂化學(xué)試劑廠(chǎng))

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

PL-S20超聲清洗機(jī)(東莞康士潔超聲波科技有限公司)；ZNCL-B磁力攪拌器(鄭州予華儀器有限責(zé)任公司)；HHS-11-2水浴鍋(常州諾基儀器有限公司)；JJ-2組織勻漿機(jī)(常州國(guó)華電器有限公司)；TDL80-2B離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng))；數(shù)碼顯微拍照(日本奧林巴斯)；UV9100紫外分光光度計(jì)(北京萊伯泰科儀器股份有限公司)；GFL-230鼓風(fēng)干燥箱(天津市萊玻特瑞儀器設(shè)備有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄荷油微囊的制備方法[1]

稱(chēng)取阿拉伯膠15g，以300mL水溶解，分別稱(chēng)取1號(hào)、2號(hào)廠(chǎng)家的明膠各三份，每份7.5g加150mL水溶解；60℃水浴，向阿拉伯膠中加入6 g薄荷油，乳化，均分為六份，每份50mL；明膠液各分為3份，每份50.00mL，乳液50℃保溫，置磁力攪拌器上 50℃ 400r/min緩緩注入明膠液，10%乙酸調(diào)節(jié)pH值4.1，攪拌5min，加入200mL水，攪拌冷卻至30℃，移至冰水浴中繼續(xù)攪拌，降溫至10℃以下，分別加入甲醛2.5mL，15min后加入20%NaOH調(diào)pH值8～9，繼續(xù)攪拌30min，鏡檢。其他剩余四個(gè)廠(chǎng)家明膠采用以上相同的方法制備微囊，各個(gè)廠(chǎng)家分別制備三份。

2.2 空白微囊的制備

空白微囊只是在反應(yīng)體系中的乳化時(shí)不加入芯材薄荷油，但其他步驟的實(shí)驗(yàn)條件和處理方法保持不變。

2.3 微囊的性能表征[2-3]

外觀(guān)形態(tài)：采用光學(xué)顯微鏡觀(guān)察微囊的外觀(guān)形態(tài)，微囊以圓球形，形態(tài)飽滿(mǎn)、粒徑均勻、大小適宜為佳。

收率 指微囊的質(zhì)量與投入的囊材質(zhì)量和薄荷油質(zhì)量之和的比值。收率越高，表明工藝損耗越少。

包封率 指微囊中實(shí)際含藥量占投藥量的百分比。包封率越高，表明藥物包封程度越好，質(zhì)量越好。包封率%= M微囊中藥物量/M投藥量×100%。

載藥量%=(M微囊中藥物量/M微囊總量)×100%。

2.4 薄荷油標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備[4]

精密稱(chēng)取薄荷油10.0008g，用95%乙醇定容至100mL，分別精密移取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL、7.00mL至100mL容量瓶中定容。以95%乙醇為空白參比，分別掃描含油囊、空白囊、1mg/mL薄荷油試樣進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，選取200～600nm區(qū)間，最終發(fā)現(xiàn)薄荷油及含油囊在241nm處有最大吸收，空白囊在216nm處有最大吸收，且在241nm處吸收較小。可選取 241nm 波長(zhǎng)處吸收最大值作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，紫外-可見(jiàn)光譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 薄荷油、試樣及空白溶液的紫外-可見(jiàn)光譜(216～241nm)

不同濃度薄荷油及其在241nm處的紫外最大吸收值見(jiàn)表1，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)見(jiàn)圖2。

表1 薄荷油在241nm處最大吸收值

圖2 241nm處薄荷油的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

得到的該標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性回歸方程為：Y=0.053X+1.902，相關(guān)系數(shù)R=0.993，可見(jiàn)薄荷油在241nm處的吸收值與濃度呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

2.5 樣品芯材含量的測(cè)定[5]

按2.1項(xiàng)下流程制備空白囊及含油囊試樣，分離微囊，洗滌后加入95%乙醇超聲提取3min，3000rpm，4min離心分離取上清液，沉淀用95%乙醇洗滌3次與上清液合并，用95%乙醇定容至100mL。以95%乙醇為空白參比，用分光光度計(jì)測(cè)定其241nm處吸光值(按上述步驟)，據(jù)已測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算6個(gè)廠(chǎng)家明膠制備的微囊中的含油量。

2.6 制備微囊所需明膠的篩選

按2.1項(xiàng)下流程采用6個(gè)廠(chǎng)家明膠制備微囊，將18個(gè)試樣用水定容至10mL，精密吸取2.00mL，稀釋后制作涂片進(jìn)行顯微拍照，每個(gè)樣品選取3個(gè)視野，觀(guān)察微囊形態(tài)，計(jì)算微囊收率，包封率及載藥量，篩選最佳明膠廠(chǎng)家。微囊顯微形態(tài)見(jiàn)表2，圖3。

表2 不同明膠廠(chǎng)家制備的微囊形態(tài)

表2(續(xù))

1.散裝盒裝；2.鄭州博研；3.天津大茂

圖3 不同廠(chǎng)家明膠制備的微囊的顯微照片

在對(duì)6家廠(chǎng)家的明膠篩選過(guò)程中，1號(hào)、4號(hào)、5號(hào)廠(chǎng)家的明膠成囊的顯微效果很差，所以篩選出2號(hào)、3號(hào)、6號(hào)廠(chǎng)家的明膠制備薄荷油微囊。后續(xù)根據(jù)微囊收率、包封率、載藥量對(duì)3個(gè)廠(chǎng)家的明膠進(jìn)行最終的篩選。按照2.1項(xiàng)下的方法制備微囊，采用2.5項(xiàng)下的方法測(cè)定微囊中芯材的含量。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每個(gè)廠(chǎng)家的明膠分別進(jìn)行三次平行試驗(yàn)，求算其平均值。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 三個(gè)廠(chǎng)家明膠制備微囊的收率、包封率和載藥量

綜合6個(gè)廠(chǎng)家明膠制備的微囊的顯微形態(tài)及收率、包封率、載樣量等指標(biāo)，最終選擇6號(hào)廠(chǎng)家的明膠制備明膠，即選用天津大茂的明膠制備微囊，并運(yùn)用于本校本科藥劑學(xué)和中藥藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中。

3 討論

薄荷油微囊的制備是藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)和中藥藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)均涉及到的項(xiàng)目，其主要的囊材明膠市場(chǎng)上種類(lèi)繁多，明膠根據(jù)生產(chǎn)工藝的不同，對(duì)制膠的原料預(yù)處理(水解)工藝也不同，明膠種類(lèi)分為明膠A型和明膠B型，在國(guó)內(nèi)，通常把酸法明膠，稱(chēng)為A型明膠。堿性明膠，稱(chēng)為B型明膠。A型(酸法)明膠的等電點(diǎn)介于6～9.5之間。然而一些原材料的前處理(例如皮料的脫毛工序)能將等電點(diǎn)降至6以下。B型(堿法)明膠的等電點(diǎn)一般介于4.5～5.6之間。明膠種類(lèi)的不同在很大程度上決定著微囊成型實(shí)驗(yàn)的成敗，但是市場(chǎng)上很容易將兩者混淆，這就需要進(jìn)行對(duì)不同廠(chǎng)家市售明膠進(jìn)行考察篩選，以固定具體的采購(gòu)廠(chǎng)家。

在本實(shí)驗(yàn)中搜集到的6個(gè)廠(chǎng)家的明膠均未標(biāo)注明膠的種類(lèi)，一般微囊的制備需用A型明膠，在本次試驗(yàn)中1號(hào)、4號(hào)、5號(hào)廠(chǎng)家的明膠成囊性能差，應(yīng)該是B型明膠，而2號(hào)、3號(hào)、6號(hào)廠(chǎng)家明膠為A型明膠，通過(guò)實(shí)驗(yàn)篩選出最佳廠(chǎng)家的明膠應(yīng)用于本專(zhuān)科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中。

[1] 范光龍,張 華.復(fù)凝聚薄荷油微膠囊的制備[J].天津工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2009,28 (5):14-18.

[2] 云花爾,高 娃.蒙藥沙棘果油微囊的制備及其質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2015 , 21 (6) :63-65.

[3] 岳春華,張志偉,符大天,等. 水楊酸殼聚糖-明膠微囊制備工藝的優(yōu)化[J].華西藥學(xué)雜志, 2014,29(5) :494-496.

[4] 吳素香,蘇 璇,李智慧,等.復(fù)凝聚法制備留蘭香油微囊的處方工藝研究[J].中成藥,2013,35(6)：1193-1199.

[5] 袁小紅,駱梅娟. 正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選蓮子心微囊的制備工藝[J].中國(guó)藥房,2006,17(21)：1673-1674.

(本文文獻(xiàn)格式：戰(zhàn)旗，畢建云，張震宇.薄荷油微囊制備所需市售明膠的篩選研究[J].山東化工，2017，46(20)：10-11，13.)

TheScreeningStudyofCommerciallyAvailableGelatinforPreparationofPeppermintOilMicrocapsules

ZhanQi,BiJianyun,ZhangZhenyu

(Pharmaceutical College, Shandong University of TCM,Jinan 250355, China)

Objective :To optimize the commercially available gelatin for preparation of peppermint oil microcapsules. Methods: In the experiment, the peppermint microcapsules prepared from different manufacturers of gelatin were observed microscopically. The first screening of six kinds of gelatin was carried out. The yield, entrapment efficiency and drug loading of peppermint oil microcapsules were used as indicators to monitor the remaining gelatin. Results: Microcapsules were prepared by microscopic observation of microcapsules. The microcapsules were prepared by gelatin preparation on the second, third and sixth manufacturers. Finally, the sixth manufacturers.of peppermint oil microcapsules prepared by gelatin was selected by the follow-up study ,with which peppermint microcapsules is large, the morphology is complete, the yield, entrapment efficiency and drug loading are ideal. Conclusion: The gelatin can be used for the preparation of peppermint oil microcapsules.

peppermint oil; microcapsules; gelatin

2017-08-21

山東中醫(yī)藥大學(xué)教育科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)教學(xué)專(zhuān)項(xiàng)[No.sy2016(036)]

戰(zhàn) 旗，女，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，研究方向：中藥藥劑學(xué)，E-mail: zhanqi_3549@163.com。

TQ461

A

1008-021X(2017)20-0010-02