□ 李雪 王琳 普菲特益斯生物科技（北京）有限公司

鹽酸副玫瑰苯胺法測(cè)定亞硫酸鹽殘留量的改進(jìn)研究

□ 李雪 王琳 普菲特益斯生物科技（北京）有限公司

通過(guò)對(duì)二氧化硫吸收劑乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-2Na）、三乙醇胺和甲醛的對(duì)比及鹽酸副玫瑰苯胺法的影響因素研究，得到了一種無(wú)汞吸收鹽酸副玫瑰苯胺法的最優(yōu)檢測(cè)條件，為食品中亞硫酸鹽監(jiān)督管理和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)提供參考和借鑒。

亞硫酸鹽 鹽酸副玫瑰苯胺法 吸光度

引言

濫用食品添加劑已成為食品安全的突出問(wèn)題[1、2]，因亞硫酸鹽具有良好的漂白、防腐、抗氧化、抑制細(xì)菌生長(zhǎng)、控制酶促褐變等作用[3、4]，被允許作為食品添加劑廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)中。通常情況下該物質(zhì)以焦亞硫酸鉀、焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉等形式添加于食品中，或采用硫磺熏蒸的方式用于食品處理。但亞硫酸鹽具有一定的毒性，過(guò)量攝入會(huì)造成紅細(xì)胞、血紅蛋白減少，損害胃腸和肝臟健康[5]。最新的研究發(fā)現(xiàn)，哮喘病患者食用含有亞硫酸鹽的食品或飲料時(shí)，可能會(huì)像吸入了二氧化硫氣體一樣會(huì)誘發(fā)過(guò)敏性疾病[6]，這就迫切需要研究食品中亞硫酸鹽殘留量的快速檢測(cè)技術(shù)。

目前，食品檢測(cè)中亞硫酸鹽的快速檢測(cè)多依據(jù)現(xiàn)有的GB/T 5009.34-2003《食品中亞硫酸鹽的測(cè)定》中鹽酸副玫瑰苯胺法。該方法操作簡(jiǎn)單、靈敏度高，但因使用了劇毒的四氯汞鈉作為二氧化硫吸收液，易對(duì)環(huán)境造成汞污染且檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，不太符合食品快速檢測(cè)的要求。本文通過(guò)對(duì)二氧化硫具有吸收作用的EDTA-2Na、三乙醇胺、甲醛的對(duì)比研究[7-9]及其應(yīng)用于鹽酸副玫瑰苯胺法中影響因素的研究，得到一種無(wú)汞吸收鹽酸副玫瑰苯胺法的最優(yōu)檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L；去離子水；甲醛：質(zhì)量分?jǐn)?shù)37%~40%；濃鹽酸：質(zhì)量分?jǐn)?shù)36%~38%；氫氧化鈉、鹽酸副玫瑰苯胺、EDTA-2Na、三乙醇胺等，均為分析純；分光光度計(jì)：U-5100 HITACHI。

1.2 試劑配制

100g/L甲醛溶液：取10mL甲醛溶液（37%~40%）用去離子水定容到100mL，臨用時(shí)用水將甲醛吸收液稀釋成所需濃度；配制50g/L的EDTA-2Na和三乙醇胺溶液；氫氧化鈉配制成濃度分別為0.5mol/L、1mol/L、1.5mol/L、2mol/L、3mol/L、4mol/L、5mol/L的溶液備用；按照GB/T 5009.34-2003中的方法配制鹽酸副玫瑰苯胺溶液備用。

2 實(shí)驗(yàn)方法

取待測(cè)溶液2mL于離心管中，加入80μ二氧化硫吸收溶液搖勻，后加入0.1mL氫氧化鈉溶液搖勻，最后加入0.1mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液搖勻，反應(yīng)后用分光光度計(jì)測(cè)量溶液吸光度。

3 二氧化硫吸收液的選擇

將100g/L甲醛溶液用去離子水稀釋到50g/L，二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L用去離子水稀釋成5mg/L的二氧化硫使用液。分別取5mg/L的二氧化硫使用液2mL于3個(gè)離心管中，分別加入80μ二氧化硫吸收液50g/L甲醛溶液、50g/L的EDTA-2Na和三乙醇胺溶液搖勻，然后加入0.1mL氫氧化鈉溶液搖勻，最后加入0.1mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液搖勻，反應(yīng)一定時(shí)間后用分光光度計(jì)測(cè)量溶液的吸光度。

表1 EDTA-2Na、三乙醇胺、甲醛吸收二氧化硫后吸光度隨時(shí)間的變化

從表1可以看出，用甲醛作為二氧化硫吸收液時(shí)，加入氫氧化鈉和顯色劑后溶液吸光度變化迅速，且5分鐘后吸光度比較穩(wěn)定、變化很小。因此，實(shí)驗(yàn)應(yīng)選取甲醛溶液作為二氧化硫吸收劑，反應(yīng)時(shí)間為5分鐘。

4 用甲醛做二氧化硫吸收液，鹽酸副玫瑰苯胺法測(cè)定二氧化硫濃度的實(shí)驗(yàn)中溶液吸光度影響因素研究。

4.1 氫氧化鈉濃度對(duì)溶液吸光度的影響

分別取5mg/L的二氧化硫使用液2mL于7個(gè)離心管中，每管加入80μ 50g/L的甲醛溶液，搖勻后分別加入0.5mol/L、1mol/L、1.5mol/L、2mol/L、3mol/L、4mol/L、5mol/L 的 氫氧化鈉溶液0.1mL，搖勻，最后加入0.1mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液搖勻，反應(yīng)5分鐘后用分光光度計(jì)測(cè)量溶液吸光度。

從圖1可以看出，溶液吸光度在開(kāi)始階段隨著氫氧化鈉濃度的增加而增加，當(dāng)氫氧化鈉濃度增加到2mol/L后繼續(xù)增加氫氧化鈉溶液吸光度變化很小，當(dāng)氫氧化鈉溶液濃度增加到3mol/L后溶液吸光度隨著氫氧化鈉濃度的增加急劇下降。因此，實(shí)驗(yàn)選擇氫氧化鈉濃度為2mol/L。

4.2 吸收液甲醛濃度對(duì)溶液吸光度的影響

將100g/L甲醛溶液用去離子水分別稀釋成5g/L、10g/L、25g/L、50g/L、80g/L、100g/L的甲醛使用液備用。分別取5mg/L的二氧化硫使用液2mL于6個(gè)離心管中，分別加入80μ上述甲醛使用液，搖勻后加入2mol/L的氫氧化鈉溶液0.1mL搖勻，最后加入0.1mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液搖勻，反應(yīng)5分鐘后用分光光度計(jì)測(cè)量溶液吸光度。

從圖2可以看出，溶液吸光度于開(kāi)始階段隨著甲醛溶液濃度的增加而增加，甲醛溶液濃度增加到25g/L后溶液吸光度隨著甲醛濃度的增加而緩慢下降。因此，實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇濃度為25g/L左右的甲醛溶液較好。

4.3 溶液吸光度與二氧化硫濃度的關(guān)系

將100mg/L的二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液用去離子水分別稀釋成1mg/L、2.5mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L 的二氧化硫使用液備用。分別取上述二氧化硫使用液2mL于6個(gè)離心管中，均加入25g/L的甲醛使用液80μ，搖勻后加入2mol/L的氫氧化鈉溶液0.1mL搖勻，最后加入0.1mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液搖勻，反應(yīng)5分鐘后用分光光度計(jì)測(cè)量溶液吸光度。

圖1 溶液吸光度隨氫氧化鈉濃度的變化

圖2 溶液吸光度隨甲醛溶液濃度的變化

圖3 吸光度隨溶液中二氧化硫濃度的變化

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從圖3可以看出，溶液吸光度隨溶液中二氧化硫濃度的增加而增加，且線性擬合度很好。

5 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)表明，甲醛溶液作為二氧化硫吸收劑時(shí)加入氫氧化鈉和顯色劑后溶液吸光度升高較快，且反應(yīng)5分鐘后吸光度變化很小，比較穩(wěn)定。

甲醛吸收液濃度為25g/L、氫氧化鈉溶液濃度為2mol/L時(shí)，加入鹽酸副玫瑰苯胺溶液后溶液吸光度升高較快，反應(yīng)5分鐘后吸光度較穩(wěn)定，且溶液吸光度隨著二氧化硫濃度的增加線性擬合度很好。

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