鄭樣貞

【摘要】 目的：分析探討臨床病理技術(shù)在胸腔積液細(xì)胞塊中的應(yīng)用效果。方法：隨機(jī)抽取2015年10月-2016年10月在筆者所在醫(yī)院治療胸腔積液的患者92例進(jìn)行研究，隨機(jī)平均分為觀察組與對(duì)照組各46例，對(duì)照組的患者使用常規(guī)細(xì)胞涂片方法進(jìn)行檢測(cè)，觀察組的患者使用細(xì)胞塊免疫組化法進(jìn)行檢測(cè)，比較兩種檢測(cè)方法的臨床診斷效果。結(jié)果：觀察組胸腔積液陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。腺癌細(xì)胞與間皮性腫瘤細(xì)胞中CK7、CEA、TTF-1抗體、CK5/6、WT-1、Calretinin抗體的表達(dá)情況比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：臨床病理技術(shù)能為胸腔積液診斷提供有力的依據(jù)，檢測(cè)指標(biāo)中CK7、CEA和TTF-1抗體在腺癌中具有顯著的特異性，CK5/6、WT-1以及Calretinin抗體在間皮性腫瘤細(xì)胞中具有顯著的特異性，使用細(xì)胞塊免疫組化法檢測(cè)可以有效鑒別區(qū)分肺腺癌與和間皮癌，值得推廣。

【關(guān)鍵詞】 臨床病理技術(shù)； 胸腔積液細(xì)胞塊； 細(xì)胞塊免疫組化法

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.24.027 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2017）24-0052-02

胸腔積液又叫胸水，主要是指胸膜腔內(nèi)的漿液不正常地積聚到一起的一種臨床綜合征[1]。胸腔積液的誘因主要是感染性疾病、循環(huán)系統(tǒng)疾病以及腫瘤等，腫瘤類型主要是非小細(xì)胞肺癌、肺腺癌和惡性間皮癌，必須盡早進(jìn)行診斷和治療。臨床上常用臨床病理技術(shù)對(duì)胸腔積液進(jìn)行診斷，常用的診斷方式是細(xì)胞涂片，其診斷敏感度可達(dá)到78%，但對(duì)轉(zhuǎn)移性癌和原發(fā)性間皮腫瘤的靈敏度較低，容易出現(xiàn)漏診和誤診的情況，影響治療和預(yù)后[2]。隨著我國(guó)醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，細(xì)胞塊切片與免疫組化染色法被廣泛應(yīng)用于各種疾病的病理診斷中，讓診斷準(zhǔn)確率大大提升，為疾病的治療提供更科學(xué)的依據(jù)。本研究主要選擇在筆者所在醫(yī)院治療胸腔積液的患者92例進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取2015年10月-2016年10月在筆者所在醫(yī)院治療胸腔積液的患者92例，抽取的患者均自愿參與研究，病情癥狀均符合相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)于胸腔積液的診斷標(biāo)準(zhǔn)，癌細(xì)胞均確診為陽(yáng)性，隨機(jī)平均分為觀察組與對(duì)照組，各46例，觀察組中男25例，女21例，年齡14～75歲，平均（41.3±5.7）歲。對(duì)照組中男24例，女22例，年齡13～76歲，平均（40.4±5.3）歲。兩組患者的年齡、性別、病情等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），有可比性。

1.2 檢測(cè)方法

對(duì)照組的患者使用常規(guī)細(xì)胞涂片方法進(jìn)行檢測(cè)，于早晨采集所有患者新鮮胸腔積液約50 ml，置于4～5個(gè)試管實(shí)施離心操作，轉(zhuǎn)速設(shè)置3000 r/min，離心時(shí)間設(shè)置為10～15 min。離心完畢后使用移液槍吸出上清液，取沉淀物涂片。取其中的沉渣部分用顯微鏡試鏡紙包裹分離，隨后固定在10%的中性福爾馬林中。固定時(shí)間不少于30 min，放入脫水機(jī)中脫水，采用石蠟包埋法包埋，至形成細(xì)胞塊后連續(xù)切片，厚度在3～4 ?m，最后以HE染色[3]。觀察組的患者使用細(xì)胞塊免疫組化法進(jìn)行檢測(cè)，DAB顯色試劑盒等均購(gòu)于武漢博士德生物工程有限公司，CK7、CEA以及WT-1等抗體均購(gòu)于武漢博歐特生物科技有限公司，染色方法按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)兩種檢測(cè)方法的陽(yáng)性率檢出結(jié)果對(duì)其診斷價(jià)值進(jìn)行分析，陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：（1）CK7、CEA和CK5/6在胞漿或是胞漿胞膜中同時(shí)有棕黃色出現(xiàn)。（2）TTF-1、WT-1的細(xì)胞核中有棕黃色出現(xiàn)。（3）Calretinin在細(xì)胞漿、胞漿胞膜以及細(xì)胞核中出現(xiàn)黃色顆粒。（4）間皮細(xì)胞或腺癌細(xì)胞的數(shù)量占據(jù)總量的10%以上[4]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本文選用軟件版本SPSS 13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較用字2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者胸腔積液檢測(cè)結(jié)果比較

觀察組癌細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有46例，陽(yáng)性率達(dá)到100%；對(duì)照組檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有30例，陽(yáng)性率為65.22%，觀察組檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2 不同抗體在腺癌細(xì)胞和間皮細(xì)胞中的表達(dá)情況比較

觀察組46例患者中，共26例患者確診為腺癌，20例患者確診為間皮癌，兩種癌細(xì)胞中CK7、CEA、TTF-1抗體、CK5/6、WT-1、Calretinin抗體的表達(dá)情況比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

3 討論

胸腔積液是肺部多種疾病的常見(jiàn)并發(fā)癥，其中以惡性胸膜間皮瘤、非小細(xì)胞肺癌以及轉(zhuǎn)移性腺癌等為主，肺腺癌最為多見(jiàn)。胸腔積液是驗(yàn)證疾病病因，判斷其良惡性的重要媒介[5-6]。臨床研究指出，大約有20%左右的胸腔積液是由惡性腫瘤引起的，而這其中大約有50%又為原發(fā)癌；而大約有30%左右的肺癌患者其最初的臨床表現(xiàn)就是胸腔積液，因此對(duì)胸腔積液進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測(cè)具有重要的臨床意義。胸腔積液一般采用臨床病理診斷技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，病理診斷主要是指取腫瘤標(biāo)本進(jìn)行固定染色，然后在顯微鏡觀察標(biāo)本，以此診斷疾病。雖然目前影像學(xué)診斷技術(shù)飛速發(fā)展，但病理診斷技術(shù)仍然廣泛應(yīng)用于各種疾病診斷中[7-8]。本研究采用兩種病理診斷法對(duì)胸腔積液進(jìn)行診斷，常規(guī)細(xì)胞涂片法操作簡(jiǎn)單，能夠維持細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)，但由于原發(fā)性間皮性腫瘤與轉(zhuǎn)移性癌細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)差別不明顯，因此，當(dāng)胸腔積液內(nèi)的癌細(xì)胞異型性不明顯或者是癌細(xì)胞數(shù)量較少的情況下，采取該方式進(jìn)行檢測(cè)就會(huì)出現(xiàn)與反應(yīng)性間皮細(xì)胞相混淆的現(xiàn)象，導(dǎo)致臨床上常常會(huì)出現(xiàn)對(duì)于一些高度懷疑為肺癌性胸腔積水的患者，經(jīng)過(guò)反復(fù)的細(xì)胞學(xué)檢測(cè)之后，且結(jié)果卻仍然呈陰性，導(dǎo)致細(xì)胞涂片診斷的靈敏性較差。細(xì)胞塊免疫組化法則可以利用具有特異性的抗體來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)部的未知抗原，還可以根據(jù)酶的著色反應(yīng)來(lái)判斷細(xì)胞的活性和分布情況[9-11]。細(xì)胞塊免疫組化法還可以將細(xì)胞塊保存起來(lái)，方便連續(xù)切片以進(jìn)行多項(xiàng)檢查。細(xì)胞塊免疫組化法操作簡(jiǎn)單易于掌握，敏感度比常規(guī)涂片法更強(qiáng)，陽(yáng)性檢出率可達(dá)到理想標(biāo)準(zhǔn)。這主要是由于細(xì)胞塊切片質(zhì)量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)胞涂片，細(xì)胞塊的分布十分均勻，并且能夠很好地保持脫落細(xì)胞的原有形態(tài)結(jié)構(gòu)；而細(xì)胞涂片則在實(shí)際操作中存在分布不均勻，重疊存在的情況較多，導(dǎo)致細(xì)胞的原有形態(tài)和結(jié)構(gòu)比較模糊[12]。endprint

本研究結(jié)果顯示，經(jīng)過(guò)檢測(cè)后，觀察組患者胸腔積液陽(yáng)性率為100%，對(duì)照組患者陽(yáng)性率為65.22%，觀察組顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。檢測(cè)指標(biāo)中CK7、CEA和TTF-1抗體在腺癌中具有顯著的特異性，CK5/6、WT-1以及Calretinin抗體在間皮性腫瘤細(xì)胞中具有顯著的特異性。

筆者在多年的臨床實(shí)際操作中，通過(guò)對(duì)實(shí)踐的總結(jié)分析，認(rèn)為在應(yīng)用細(xì)胞塊免疫組化法對(duì)胸腔積液實(shí)施檢測(cè)的過(guò)程中，需注意以下兩點(diǎn)，方可有效提高，其一是采取3000 r/min的速度進(jìn)行離心，大量的實(shí)踐表明，這一離心速度能夠收集制備數(shù)量豐富的細(xì)胞，且分布均勻，可使細(xì)胞保持最佳的結(jié)構(gòu)形態(tài)；其二是細(xì)胞切片的厚度宜保持在4～5 ?m最佳，這個(gè)厚度的細(xì)胞不僅分布均勻，且能夠很好地避免假陽(yáng)性的出現(xiàn)。

臨床病理技術(shù)能為胸腔積液診斷提供有力的依據(jù)，使用細(xì)胞塊免疫組化法檢測(cè)可以有效鑒別區(qū)分肺腺癌與間皮癌，值得推廣。

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