葉謀泰

（南安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建南安 362300）

南安市H5病毒疫苗接種現(xiàn)狀分析

葉謀泰

（南安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建南安 362300）

近幾年，高致病性禽流感H5病毒頻發(fā)，對(duì)我國(guó)的養(yǎng)禽業(yè)造成了很大損失，并且有一部分人已被傳染禽流感病毒，嚴(yán)重威脅人類的生命安全。國(guó)內(nèi)針對(duì)禽流感的流行傳染特點(diǎn)，實(shí)施了一系列的防控措施，并對(duì)禽流感H5施行強(qiáng)制性免疫。本文主要針對(duì)南安市近兩年的禽流感防控狀況進(jìn)行分析調(diào)查，檢測(cè)H5抗體合格率，監(jiān)測(cè)南安市禽流感免疫抗體水平，對(duì)不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)進(jìn)行抽樣檢測(cè)并進(jìn)行評(píng)價(jià)，以便有效掌握禽流感免疫效果和疫病發(fā)展趨勢(shì)。

高致病性禽流感；檢測(cè)；防控；實(shí)驗(yàn)

2015年，我國(guó)已經(jīng)公開(kāi)對(duì)H5高致病性禽流感的防控措施和監(jiān)測(cè)狀況，對(duì)相隔較近的養(yǎng)雞場(chǎng)使用疫苗進(jìn)行免疫，并檢測(cè)抗體進(jìn)行對(duì)比分析，有效監(jiān)控疫情。為了切實(shí)掌握近兩年南安市禽流感的免疫抗體水平，南安市動(dòng)物疫病防預(yù)與控制中心對(duì)26個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)開(kāi)展了抗體檢測(cè)工作，總體來(lái)看抗體合格率基本達(dá)標(biāo)，由此說(shuō)明南安市的疫苗接種效果取得了良好的成效。

1 概述

H5禽流感病毒具有高危致病性，不僅可以感染家禽，而且還可以感染人和哺乳動(dòng)物，對(duì)社會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重威脅人們的健康。它的傳播途徑主有要：一是與病雞直接接觸或與污染物進(jìn)行直接接觸，二是通過(guò)呼吸、消化道、或者傷口感染，禽流感病毒具有一定的潛伏時(shí)間，最短幾小時(shí)最長(zhǎng)幾天時(shí)間，具體與感染途徑和病毒的致病性有關(guān)。

抗體檢測(cè)是在接種疫苗之后，通過(guò)采用血清學(xué)的試驗(yàn)方法來(lái)檢測(cè)被抽個(gè)體血清中是否產(chǎn)生了相應(yīng)的抗體，進(jìn)而判斷免疫效果，起到診斷疫病的作用。對(duì)雞場(chǎng)中的雞群進(jìn)行抗體檢測(cè)是最直接有效的檢測(cè)手段，根據(jù)抗體檢測(cè)的合格率來(lái)判斷雞群抗體是否達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)而為以后的免疫計(jì)劃實(shí)施提供依據(jù)。

2 檢測(cè)過(guò)程

南安市動(dòng)物疫病防預(yù)與控制中心在2016年以及2017年春季對(duì)所屬的26個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)分別抽取雞血樣本1000多份進(jìn)行H5抗體的檢測(cè)，對(duì)南安市疫苗接種效果進(jìn)行分析。

2.1 材料的選擇

血清樣本一般用小孩頭皮針在雞翅靜脈處采集血樣，同時(shí)詳細(xì)記錄雞場(chǎng)的養(yǎng)殖數(shù)量、種類、采集時(shí)間地點(diǎn)、免疫次數(shù)和時(shí)間以及使用的疫苗種類。在免疫后20d分別對(duì)26個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)進(jìn)行樣本采集，每個(gè)地方抽取30～40個(gè)樣本，將采集的血樣本常溫保持1h，然后置于3000 r/min 的離心機(jī)中對(duì)血清進(jìn)行分離，最后在大約4℃的環(huán)境中進(jìn)行冷藏以備檢測(cè)。

2.2 選擇試劑

（1）用來(lái)檢測(cè)的試劑為H5（Re-5 株）病毒的抗原，由哈爾濱的維科生物技術(shù)公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)為：2015010；新城疫血凝抑制抗原，由哈爾濱的維科生物技術(shù)公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)為：20160406。需要保證H5禽流感（Re-5株）的陽(yáng)性血清和新城疫血凝抑制陽(yáng)性血清在有效期之內(nèi)。

（2）阿氏液（Alsevers）的配制。將2.04g的葡萄糖、0.8g的檸檬酸鈉、0.05g的檸檬酸以及0.42g的氯化鈉放于100ml的蒸餾水中，溶解散熱后，調(diào)節(jié)pH值到6.1，控制壓強(qiáng)為1.69kPa，然后高壓滅菌15min，在4℃的環(huán)境下冷藏以備后用。

（3）配制1%的雞紅細(xì)胞懸液，并用含有抗凝劑的注射器從公雞靜脈處取5ml的血液，慢慢倒入離心管然后加10ml的生理鹽水進(jìn)行混合，將其放入3 000 r/min的離心機(jī)中5min，去除紅細(xì)胞的灰白色層，反復(fù)進(jìn)行洗滌直到清除干凈為止，然后再離心10min，使分離效果更好。紅細(xì)胞洗好后去除上邊的清液用單道移液器抽取紅細(xì)胞1ml放入99ml的生理鹽水中進(jìn)行均勻混合，配成1%雞細(xì)胞懸液。

2.3 儀器的選擇

儀器設(shè)備主要有：儀器低速離心機(jī)、單道可調(diào)移液器（20～200μl）、單道可調(diào)移液器（1～5 ml）以及八道可調(diào)移液器（5～50μl）和震蕩器。

2.4 實(shí)驗(yàn)方法與標(biāo)準(zhǔn)

（1）根據(jù)《高致病性禽流感診斷技術(shù)》和新城疫診斷技術(shù)的規(guī)定進(jìn)行嚴(yán)格操作，進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)，將血清在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行統(tǒng)一檢測(cè)，并對(duì)免疫效果進(jìn)行科學(xué)分析與評(píng)價(jià)。

（2）高致病性禽流感 H5的抗體水平必須≥4log2；新城疫的抗體水平必須≥5log 2；進(jìn)行免疫抗體的群體合格率標(biāo)準(zhǔn)等于免疫合格的個(gè)體數(shù)量與總檢測(cè)群體數(shù)量之比，比率在80%以上為合格。

3 結(jié)果分析

2016～2017年，南安市對(duì)所屬的26個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)進(jìn)行禽流感抗體檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：

表1 南安市近兩年禽流感H5抗體檢測(cè)情況

由表1可以看出，南安市近兩年的免疫防控措施已經(jīng)取得了初步的成效，對(duì)H5抗體檢測(cè)的合格率全部達(dá)標(biāo)，對(duì)以后的禽流感防控免疫鑒定了基礎(chǔ)。從2016年開(kāi)始對(duì)鄉(xiāng)鎮(zhèn)雞群進(jìn)行禽流感抗體檢測(cè)和新城疫抗體檢測(cè)，科學(xué)安排免疫程序和補(bǔ)免程序，保證雞群體內(nèi)的抗體水平達(dá)標(biāo)，從每年的檢測(cè)結(jié)果也可以看出進(jìn)行抗體水平檢測(cè)具有重要作用。

4 總結(jié)

面對(duì)高致病性禽流感病毒H5，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行接種疫苗是最有效的防控措施，能夠有效地預(yù)防動(dòng)物之間進(jìn)行相互傳染，但免疫的效果可能受到多種因素的影響，比如疫苗的質(zhì)量、免疫程序是否得當(dāng)、其他藥物的影響以及工作人員的業(yè)務(wù)素養(yǎng)。疫苗的選擇要保證質(zhì)量問(wèn)題，免疫程序要科學(xué)合理，家畜的飼養(yǎng)和管理方面要消除一定的安全隱患，對(duì)接種疫苗的雞群進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)，及時(shí)補(bǔ)免，保持整體抗體水平在合格標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，切實(shí)做好疫病的防控措施。免疫工作要根據(jù)《動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》進(jìn)行布置分配，提高工作人員的專業(yè)素養(yǎng)和工作能力，尤其是實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員，為防止疫病傳播提供保證。

[1] 王娟娟.柳城縣某雞場(chǎng)禽流感和新城疫抗體水平監(jiān)測(cè)[J].畜禽業(yè)，2017，（4）：55-57.