徐正軍 王相子 徐小艷 周 偉 陳昌海

（江蘇省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036）

3個(gè)種豬場(chǎng)豬偽狂犬病凈化監(jiān)測(cè)與分析

徐正軍 王相子 徐小艷 周 偉 陳昌海

（江蘇省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036）

為摸清豬偽狂犬病狀況，對(duì)3個(gè)已使用gE基因缺失疫苗的種豬場(chǎng)2758份豬血清樣品，應(yīng)用ELISA方法分別檢測(cè)豬偽狂犬病gE、gB抗體。結(jié)果gE抗體陽(yáng)性率為13.92%，gB免疫抗體合格率為98.74%，結(jié)果表明，該病在不同種豬場(chǎng)感染情況存在差異，gE基因缺失疫苗的效果確實(shí)，適合豬偽狂犬病凈化。

豬偽狂犬病；gE基因缺失；凈化

豬偽狂犬?。≒orcine Pseudorabies，PR）是由是由皰疹病毒科豬皰疹病毒I型偽狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的豬和其它動(dòng)物共患的急性傳染病，臨床上以發(fā)熱、奇癢和腦脊髓炎為主要特征。豬感染后無(wú)奇癢癥狀，可引起妊娠母豬流產(chǎn)，產(chǎn)死胎和木乃伊肽；仔豬大量死亡，15日齡死亡率100%，斷奶豬死亡率10～20%。種豬不育，母豬返情、空懷，公豬睪丸炎，腫脹、萎縮，失去種用能力，育肥豬增重緩慢，飼料報(bào)酬降低，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害巨大。該病在我國(guó)1948年首次從上海家貓病例中被發(fā)現(xiàn)[1]，1956年在國(guó)營(yíng)寶泉嶺農(nóng)場(chǎng)[2]、1957年在四川華陽(yáng)[3]等地豬場(chǎng)發(fā)生，目前已在我國(guó)廣泛存在。豬是該病的自然宿主和貯存宿主，豬在耐過(guò)PRV感染后能形成潛伏感染，可終身帶毒，并在應(yīng)激條件下易被激活而引起復(fù)發(fā)性感染和散毒，因此對(duì)野毒感染豬的剔除在該病防治上具有重要意義[4]。歐美等國(guó)通過(guò)接種偽狂犬gE基因缺失疫苗結(jié)合具有鑒別診斷意義的gE抗體檢測(cè)方法，實(shí)施了該病根除計(jì)劃。我國(guó)陳煥春等2003年提出了偽狂犬病根除計(jì)劃方案[5]，《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）》也將該病列入優(yōu)先防治疫病名錄，要求到2020年所有種豬場(chǎng)都要達(dá)到豬偽狂犬病凈化標(biāo)準(zhǔn)[6]，因此選擇了3個(gè)已使用gE基因缺失疫苗的種豬場(chǎng)，對(duì)其包括種公豬、種母豬和后備豬進(jìn)行了PRV的gE、gB抗體監(jiān)測(cè)，摸清了PRV在不同豬場(chǎng)感染狀況和PRV gE基因缺失疫苗的使用效果，為開(kāi)展該病凈化提供了重要數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣品

共采集了來(lái)自A、B、C三個(gè)已使用gE基因缺失疫苗的種豬場(chǎng)，包括種公豬、種母豬和后備豬等種豬血清樣品2758份（表1）

表1 三個(gè)種豬場(chǎng)血清樣品分布情況

1.2 主要試劑

所需的豬PRV gE抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：BE20160903）和PRV gB抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：BE20160914），均由荷蘭BioChek公司提供。

1.3 試驗(yàn)方法

PRV感染用gE抗體ELISA方法檢測(cè)；gE基因缺失疫苗免疫效果用gB抗體ELISA方法檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 PRV gE抗體ELISA監(jiān)測(cè)

共檢測(cè)豬血清樣品2758份，檢出PRV gE抗體ELISA陽(yáng)性384份，陽(yáng)性率13.92%（表2），PRV在不同種豬場(chǎng)間的gE抗體陽(yáng)性比例差異較大，A場(chǎng)陽(yáng)性率為3.43%；B場(chǎng)陽(yáng)性率為0；C場(chǎng)陽(yáng)性率為67.23%。（圖1）

表2 三個(gè)種豬場(chǎng)PRV gE抗體陽(yáng)性情況

圖1 不同種豬場(chǎng)PRV gE抗體陽(yáng)性率比較圖

進(jìn)一步根據(jù)用途和年齡不同，對(duì)PRV gE抗體陽(yáng)性率較高的C場(chǎng)進(jìn)行分類(lèi)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，該場(chǎng)種公豬將、后備母豬、初產(chǎn)母豬、2胎母豬、多胎母豬（3胎及以上）的PRV gE抗體陽(yáng)性率分別為66.67%、12.36%、63.35%、86.67%、95.17%（表3），母豬隨著胎次的增長(zhǎng)，陽(yáng)性率呈升高趨勢(shì)。（圖2）

表3 C場(chǎng)不同類(lèi)型的種豬PRV gE抗體陽(yáng)性分布情況

圖2 C場(chǎng)不同類(lèi)型種豬的PRV感染狀況分布圖

2.2 PRV gB抗體ELISA監(jiān)測(cè)

共檢測(cè)PRV gE抗體陰性血清2379份，其中2349份gB抗體合格，合格率98.74%。（表4）

表4 三個(gè)種豬場(chǎng)PRV gB免疫抗體合格情況

3 討論與分析

我國(guó)豬場(chǎng)PRV隱性感染普遍存在。毛愛(ài)民等[7]對(duì)無(wú)錫種豬場(chǎng)和部分規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果PRV gE抗體陽(yáng)性率21.52%；楊濤等在廈門(mén)開(kāi)展調(diào)查，PRV gE抗體陽(yáng)性率59%；周緒斌等[8]2007年對(duì)11個(gè)省131個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)調(diào)查，PRV野毒陽(yáng)性率18.2%；鄭輝等[9]2015年開(kāi)展調(diào)查，PRV野毒陽(yáng)性率16.48%。本次所監(jiān)測(cè)的3個(gè)種豬場(chǎng)，均為gE基因缺失疫苗免疫，所檢樣品PRV gE抗體陽(yáng)性即為野毒感染陽(yáng)性，樣品總體陽(yáng)性率為13.92%，主要原因是有一個(gè)PRV潔凈場(chǎng)和一個(gè)PRV感染率較低的場(chǎng)，但還有一個(gè)場(chǎng)野毒陽(yáng)性率達(dá)到67.23%，應(yīng)引起足夠重視。

本次所監(jiān)測(cè)的3個(gè)種豬場(chǎng)，有的陽(yáng)性率為0，沒(méi)有感染，有的陽(yáng)性率為3.43%，存在少量感染，有的陽(yáng)性率為67.23%，存在大量感染，說(shuō)明豬場(chǎng)間PRV感染狀況存在很大差異，王金濤等[10]在PR調(diào)查也曾發(fā)現(xiàn)類(lèi)似情況，建議各場(chǎng)在實(shí)施PRV防控時(shí)，預(yù)先進(jìn)行監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查，摸清感染狀況，以便采取針對(duì)性的防控措施。

對(duì)C場(chǎng)gE抗體陽(yáng)性數(shù)據(jù)分類(lèi)統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，該場(chǎng)種公豬陽(yáng)性率66.67%，后備母豬、初產(chǎn)母豬、2胎母豬、多胎母豬等的陽(yáng)性率分別為12.36%、63.35%、86.67%、95.17%，母豬陽(yáng)性率隨著年齡、胎次的增長(zhǎng)呈升高趨勢(shì)，解偉濤等[11]在河南監(jiān)測(cè)，成年種豬的gE抗體陽(yáng)性率53.1%，高于后備種豬27.6%，焦顯芹等[12]也監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)“種母豬的偽狂犬病病毒感染率與公豬的病毒感染率呈明顯的正相關(guān)關(guān)系，母豬偽狂犬病病毒感染率隨著胎次的增加感染比例也逐漸增加”，說(shuō)明當(dāng)前PRV在豬群中的傳播以后天的水平傳播為主，建議豬場(chǎng)應(yīng)重點(diǎn)做好生物安全防控和種公豬的凈化工作。

gE抗體陰性且gB抗體合格，說(shuō)明gE基因缺失疫苗免疫合格。本次監(jiān)測(cè)，所檢2379份gE抗體陰性血清樣品gB抗體合格率為98.74%，免疫合格率最低的場(chǎng)也達(dá)到了96.89%，謝海波等[13]研究指出可以有效預(yù)防豬偽狂犬病流行的免疫評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為免疫合格率80%以上，顯然3個(gè)場(chǎng)的PRV gE基因缺失免疫均以達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，疫苗效果很好，適于豬偽狂犬病防控。

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[11] 解偉濤，梁躍，喬松林，等.2014-2016年河南省豬偽狂犬野毒感染和免疫情況血清學(xué)調(diào)查[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，（12）：153-156.

[12] 焦顯芹，杜紅喜，賀紀(jì)云.我國(guó)規(guī)?；i場(chǎng)偽狂犬病野毒感染規(guī)律的調(diào)查[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2014，46（11）：92-95.

[13] 謝海波，何小華.豬偽狂犬病的流行情況和預(yù)防措施[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2001，37（6）：21-22.

江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程項(xiàng)目資助，編號(hào)：SXGC[2016]276