武利宏

（臨江鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)畜牧服務(wù)中心，黑龍江同江 156400）

奶牛臨床型乳腺炎病原菌分離鑒定與藥敏試驗(yàn)建議

武利宏

（臨江鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)畜牧服務(wù)中心，黑龍江同江 156400）

探究奶牛臨床型乳房炎病原菌分離鑒定與藥敏試驗(yàn)建議。選擇某地患有臨床型乳房炎病牛的奶樣30份，分別進(jìn)行病原的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)。其中大腸桿菌和熱帶假絲酵母菌是最主要的兩種病原菌，菌株數(shù)達(dá)到34株，占79.06%，并且兩種及其以上菌所造成混合感染的奶樣共有11份。本次所分離的熱帶假絲酵母菌對(duì)抗真菌藥物高度敏感的主要是酮康唑和制霉菌素，敏感性比較低主要是氟康唑、兩性霉素B以及伊曲康唑。通過對(duì)奶牛臨床型乳房炎病原菌進(jìn)行必要的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)。有助于將其中最主要的病原菌類型和合理的抗生素藥物準(zhǔn)確的篩選出來，進(jìn)而可以為臨床用藥提供必要的指導(dǎo)，乳房炎的發(fā)病率也可以得到有效的降低，從而有助于奶牛業(yè)的長遠(yuǎn)發(fā)展。

奶牛；臨床型乳房炎；病原菌分離鑒定；藥敏試驗(yàn)

乳房炎在一定程度上是導(dǎo)致奶牛養(yǎng)殖業(yè)出現(xiàn)損失的疾病，該病的出現(xiàn)不僅導(dǎo)致牛奶的質(zhì)量與產(chǎn)量都大大的下降，并且奶牛的正常的使用年限也大大的縮短，由此造成奶牛淘汰率的不斷增加。目前，人們從奶牛的乳腺中所分離出來的微生物多達(dá)130種，具體包括支原體、病菌、真菌以及細(xì)菌等等。臨床上關(guān)于乳房炎的防治主要以抗生素為主，然而基于廣泛或者不合理的應(yīng)用，致使多種細(xì)菌對(duì)抗生素產(chǎn)生非常強(qiáng)烈的耐藥性，然后在乳中殘留的抗生素在一定程度上嚴(yán)重危害這人類的身體健康。本次研究的主要目的是探究奶牛臨床型乳房炎病原菌分離鑒定與藥敏試驗(yàn)建議，選取了某地患有臨床型乳房炎病牛的奶樣30份，以其作為分析對(duì)象，詳情如下：

1 材料與方法

1.1 培養(yǎng)基與試劑

培養(yǎng)基主要為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，沙堡氏、伊紅美藍(lán)以及三糖鐵瓊脂，取新生牛血清。利用抗菌藥物過敏紙片和細(xì)菌生化微量鑒定管。

1.2 奶羊

本次研究中所用到的奶樣主要是從患有臨床型乳房炎病牛身上取到的，奶羊采集之前需要用溫水對(duì)病牛的乳房進(jìn)行全面的清洗，然后對(duì)乳頭及其周圍利用75%的酒精進(jìn)行必要的消毒處理，待酒精完全揮發(fā)以后，開始進(jìn)行第3把后奶樣的收集。

1.3 細(xì)菌分離和鑒定

在培養(yǎng)基中接種奶樣，將溫箱的溫度控制在37℃，進(jìn)行為期18～72h的培養(yǎng)，對(duì)細(xì)菌生長的具體情況進(jìn)行全面的觀察并且最好詳細(xì)的記錄，完成革蘭氏染色后可以利用鏡檢對(duì)細(xì)菌的具體形態(tài)與染色的特性進(jìn)行仔細(xì)的觀察[1]，將單個(gè)可疑菌落挑選出來純培養(yǎng)。同時(shí)，采用常規(guī)方法鑒定細(xì)菌的生化特性。

1.4 藥敏試驗(yàn)

選擇15種常用抗菌藥物和5種抗真菌藥物（酮康唑、氟康唑、兩性霉素B、制霉菌素、伊曲康唑）的過敏紙片，以美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)所制定的Kirby-Bauer瓊脂擴(kuò)散法，對(duì)分離菌株對(duì)抗菌藥物的敏感性進(jìn)行科學(xué)測定，在37℃的環(huán)境中進(jìn)行24h的培養(yǎng)以后對(duì)抑菌環(huán)的直徑進(jìn)行精確的測量[2]。

判定標(biāo)準(zhǔn)：不敏感：抑菌環(huán)的直徑小于10mm；中度敏感：抑菌環(huán)的直徑在10～20mm之間；高度敏感：抑菌環(huán)的直徑超過20mm。

2 結(jié)果

2.1 分離培養(yǎng)鑒定

本次進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定的乳樣共有30份，一共將6種43個(gè)菌株檢測出來，具體分布如下表1。其中大腸桿菌和熱帶假絲酵母菌是最主要的兩種病原菌，菌株數(shù)達(dá)到34株，占79.06%，并且兩種及其以上菌所造成混合感染的奶樣共有11份。

表1 奶牛乳房炎病原菌的檢出結(jié)果

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

本次所分離的熱帶假絲酵母菌對(duì)抗真菌藥物高度敏感的主要是酮康唑和制霉菌素，敏感性比較低主要是氟康唑、兩性霉素B以及伊曲康唑，如下表2。

表2 奶牛乳房炎致病真菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果（mm）

3 討論

導(dǎo)致奶牛乳房炎的病原體錯(cuò)綜復(fù)雜，種類非常多，與各種條件的關(guān)系都十分密切，如地域、飼養(yǎng)管理以及季節(jié)等，同一奶牛場中病原體的種類和所占比例在不同時(shí)期均有所不同[3]。經(jīng)過本次研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致乳房炎出現(xiàn)的病原體主要有兩種，即大腸桿菌和熱帶假絲酵母菌，菌株數(shù)多達(dá)34株，占79.06%，并且兩種及其以上菌所造成混合感染的奶樣共有11份。通過對(duì)真菌分離鑒定結(jié)果的分析，不難發(fā)現(xiàn)真菌是造成本次奶牛乳房炎的主要因素，而這與國內(nèi)外的報(bào)道不大相同。

隨著臨床上大量的對(duì)抗生素、免疫制劑以及激素的使用，致使奶?；加姓婢匀榉垦椎臄?shù)量較之前有了顯著的增加，盡管少數(shù)抗生素有助于致病真菌在動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行快速的生長與繁殖，進(jìn)而導(dǎo)致酵母菌在存在抗生素的條件下長勢旺盛的現(xiàn)象，相應(yīng)的這為什么頑固性乳房炎在臨床經(jīng)過多種藥物的治療以后，雖癥狀有所減輕但是又不斷反復(fù)出現(xiàn)的情況[4]。

同時(shí)，乳房炎與病原真菌也有很大的關(guān)系，在本次研究中所分離的熱帶假絲酵母菌對(duì)抗真菌藥物高度敏感的主要是酮康唑和制霉菌素，敏感性比較低主要是氟康唑、兩性霉素B以及伊曲康唑。

綜上所述，通過對(duì)奶牛臨床型乳房炎病原菌進(jìn)行必要的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)，有助于將其中最主要的病原菌類型和合理的抗生素藥物準(zhǔn)確的篩選出來，進(jìn)而可以為臨床用藥提供必要的指導(dǎo)，即在使用抗生素治療的過程中需要充分考慮病原菌的耐藥性和防止真菌出現(xiàn)繼發(fā)性感染的危險(xiǎn)。實(shí)際使用時(shí)需要將藥敏試驗(yàn)的結(jié)果結(jié)合起來，進(jìn)而有助于降低乳房炎的發(fā)病率，從而有助于實(shí)現(xiàn)奶牛業(yè)的長遠(yuǎn)發(fā)展。

[1]康曉冬，劉溪源，楊慧君，等.寧夏地區(qū)奶牛臨床型乳房炎病原菌分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014，11（24）：65-67.