馮怡錕(鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科,河南 鄭州 450014)
食管鱗癌組織中P53、Caspase-3蛋白的表達(dá)及其臨床意義
馮怡錕
(鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科,河南 鄭州 450014)
目的探討P53、Caspase-3在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。方法采用免疫組化S-P法檢測(cè)80例食管鱗癌組織及其癌旁正常食管黏膜組織中P53、Caspase-3蛋白表達(dá)。結(jié)果食管鱗癌組織中P53蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為75.00%(60/80),明顯高于癌旁正常食管黏膜組織的12.50%(10/80),比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。食管鱗癌組織中Caspase-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為40.00%(32/80),明顯低于癌旁正常食管黏膜組織的91.25%(73/80),比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。P53蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P均<0.05),Caspase-3蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P均<0.05)。結(jié)論P(yáng)53的高表達(dá)及Caspase-3蛋白的低表達(dá)與食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展有關(guān),兩者異常表達(dá)可能與食管癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切,兩者的聯(lián)合檢測(cè)可能在食管鱗癌的診斷中具有重要價(jià)值。
食管鱗癌;P53;Caspase-3;免疫組化;原位雜交
食管癌是我國(guó)高發(fā)的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一,其在河南地區(qū)的發(fā)病率居全國(guó)前列,且有逐年增加的趨勢(shì),食管癌治療的關(guān)鍵是早診早治,因此,探討臨床可以推廣應(yīng)用的創(chuàng)傷輕、方法簡(jiǎn)單且費(fèi)用較低的確診食管癌的檢測(cè)手段一直是目前關(guān)于食管癌臨床診斷的熱點(diǎn)問(wèn)題。P53是在多種腫瘤組織中均可發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,現(xiàn)已被證實(shí)在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用,也已經(jīng)被用于多種腫瘤的定期檢查[1]。Caspase-3是Caspase家族中被研究較多,且功能較為廣泛的一種成員[2]。本研究采用免疫組化S-P法檢測(cè)80例食管鱗癌組織及其癌旁正常食管黏膜組織中P53、Caspase-3蛋白的表達(dá),探討兩者的具體表達(dá)情況及其與食管癌臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系,并分析兩者在食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展中的具體作用。
1.1材料入組鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科2017年1月至2016年6月收集的手術(shù)切除的食管鱗癌組織及其癌旁正常食管黏膜組織(手術(shù)切緣/距癌組織邊緣4 cm以外的組織)標(biāo)本80對(duì),所有80例入組食管鱗癌患者術(shù)前均未接受過(guò)放療、化療、靶向治療、免疫治療等治療,臨床數(shù)據(jù)完整,并由2名高年資病理科醫(yī)生復(fù)審病理切片證實(shí)為食管鱗癌。手術(shù)切除標(biāo)本取出后均經(jīng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%多聚甲醛固定,經(jīng)常規(guī)脫水、石蠟包埋等制成石蠟塊,并進(jìn)行5 μm的連續(xù)切片。80例食管鱗癌患者中,男53例,女27例;年齡29~73歲,中位年齡56歲,其中≥60歲者30例,<60歲者50例;腫瘤浸潤(rùn)程度:浸潤(rùn)到黏膜下層或淺肌層者23例,浸潤(rùn)到深肌層者26例,浸潤(rùn)至全層或外膜者31例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者47例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者33例。
1.2主要藥品與試劑P53、Caspase-3蛋白鼠抗人多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司,S-P免疫組化試劑盒及顯色試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。
1.3免疫組化步驟按照S-P免疫組化試劑盒說(shuō)明進(jìn)行各組織的免疫組化染色,并經(jīng)高壓抗原修復(fù),DAB顯色,蘇木素復(fù)染等程序后,進(jìn)行結(jié)果判定,其中采用已知陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照;用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。
1.4免疫組化結(jié)果判斷P53陽(yáng)性產(chǎn)物定位于細(xì)胞核,而Caspase-3陽(yáng)性產(chǎn)物定位于細(xì)胞質(zhì),陽(yáng)性染色均為黃色或棕黃色,根據(jù)組織標(biāo)本中陽(yáng)性細(xì)胞百分比以及其染色程度來(lái)進(jìn)行綜合判定。每張切片隨機(jī)選取10個(gè)高倍鏡視野,分別計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù):≤10%為0分,>10%~25%為1分,>25%~50%為2分,>50%~100%為3分。陽(yáng)性細(xì)胞染色程度:無(wú)色為0分,淺黃色為1分,棕黃色為2分,黃褐色為3分。兩者乘積作為該切片的積分,≤2分為陰性,>2分為陽(yáng)性。
1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),P53、Caspase-3蛋白等陽(yáng)性表達(dá)率的比較采用χ2檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
2.1P53、Caspase-3蛋白在不同食管組織中的表達(dá)食管鱗癌組織中P53蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為75.00%(60/80),明顯高于癌旁正常食管黏膜組織的12.5%(10/80),比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。食管鱗癌組織中Caspase-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為40.00%(32/80),明顯低于癌旁正常食管黏膜組織的91.25%(73/80),比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.2P53、Caspase-3蛋白的表達(dá)與食管鱗癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系P53蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P均<0.05),Caspase-3蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P均<0.05)。見(jiàn)表1、2。
表1 P53蛋白的表達(dá)與食管鱗癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系
目前,食管癌的治療,早期以手術(shù)切除為主,而晚期患者大多因周圍嚴(yán)重浸潤(rùn)或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移而喪失了手術(shù)機(jī)會(huì),使得預(yù)后較差,生存期也明顯縮短。因此,食管癌的早期診斷是非常重要的,而食管癌的活檢確診主要依靠病理切片,免疫組化的確診意義非常重要。P53在多種腫瘤組織中均存在高表達(dá),且已被證實(shí)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切,而且P53的檢測(cè)也可用于多種腫瘤的預(yù)后和生存狀況評(píng)估[3-4]。Caspase-3是Caspase家族中外界刺激因素啟動(dòng)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵因子,是細(xì)胞凋亡程序的主要執(zhí)行者,是細(xì)胞凋亡蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵步驟[5-6]。食管鱗癌組織中P53蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為75.00%(60/80),明顯高于癌旁正常食管黏膜組織的12.50%(10/80),比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。食管鱗癌組織中Caspase-3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為40.00%(32/80),明顯低于癌旁正常食管黏膜組織的91.25%(73/80),比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。P53蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P均<0.05),Caspase-3蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P均<0.05)。綜上所述,P53的高表達(dá)及Caspase-3蛋白的低表達(dá)與食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展有關(guān),兩者異常表達(dá)可能與食管癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切,兩者的聯(lián)合檢測(cè)可能在食管鱗癌的診斷中具有重要價(jià)值。
表2 Caspase-3蛋白的表達(dá)與食管鱗癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系
[1] 宋慧琴,李道明,金家?guī)r.乳腺癌組織中HPA 蛋白的表達(dá)及其與ER、PR、HER-2、P53表達(dá)的相關(guān)性[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2016,29(1):15-17.
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ExpressionsandSignficanceofP53andCaspase-3intheEsophagealSquamousCarcinomaTissues
FENG Yikun
(DepartmentofPathology,theSecondAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450014,China)
ObjectiveTo investigate the expressions and clinical significances of P53 and Caspase-3 protein and mRNA in the esophageal squamous cell carcinoma tissues.MethodsThe expressions of P53 and Caspase-3 protein in the 80 cases of esophageal squamous cell carcinoma tissues and 80 cases of adjacent normal tissues were detected by immunohistochemistry.ResultsThe positive expression rate of P53 protein in the esophageal squamous carcinoma tissues was significantly higher than that of the adjacent normal tissues [(75.00%(60/80)vs12.50%(10/80),P<0.05].The positive expression rate of Caspase-3 protein in the esophageal squamous carcinoma tissues was significantly higher than that of the adjacent normal tissues [40.00%(32/80)vs91.25%(73/80),P<0.05].The P53 protein expression was associated with tumor differentiated degree, infiltration depth and lymph node metastasis (P<0.05); the Caspase-3 protein expression was associated with tumor differentiated degree and lymph node metastasis (P<0.05).ConclusionThe P53 high expression and Caspase-3 low expression may be related to the occurrence and development of esophageal squamous carcinoma.
esophageal squamous cell carcinoma; P53; Caspase-3; immunohistochemistry
馮怡錕(1983-),女,碩士,主要從事腫瘤病理學(xué)相關(guān)研究。E-mail:13783566437@163.com
10.3969/j.issn.1673-5412.2017.05.005
R735.1;R730.23
A
1673-5412(2017)05-0382-03
2016-10-13)