梁朵獻(xiàn)(惠州市中心人民醫(yī)院，廣東 惠州 516000)

雌激素受體、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1在增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中的表達(dá)

梁朵獻(xiàn)
(惠州市中心人民醫(yī)院，廣東 惠州 516000)

目的探討增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中雌激素受體(ER)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)的表達(dá)及其相關(guān)性。方法采用RT-PCR方法對(duì)48例增生期子宮內(nèi)膜息肉組織和30例健康體檢者(健康對(duì)照組)子宮內(nèi)膜組織中ER、VEGF、TGF-β1的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中ER、VEGF、TGF-β1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量高于對(duì)照組(P<0.05)；ER、VEGF、TGF-β1在增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中的表達(dá)與其復(fù)發(fā)有關(guān)(P<0.05)。結(jié)論增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中ER、VEGF、TGF-β1的表達(dá)明顯升高，且ER、VEGF、TGF-β1相對(duì)表達(dá)量可用于增生期子宮內(nèi)膜息肉的預(yù)后評(píng)估。

雌激素受體；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1；增生期子宮內(nèi)膜息肉

Expressions of Estrogen Receptor,Vascular Endothelial Growth Factor,Transformation Growth Factor-β1 and Their Relationship in the Proliferative Phase Endometrial Polyps

近年來(lái)，我國(guó)婦女子宮內(nèi)膜息肉發(fā)病率不斷增高，可發(fā)生惡變，且復(fù)發(fā)率高，影響著女性的生殖健康。我們用基因芯片分析了增生期子宮內(nèi)膜息肉基因表達(dá)譜，最新研究提示雌激素受體(estrogen receptor，ER)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transformation growth factor-β1，TGF-β1)參與了多種病理生理過(guò)程，包括炎癥反應(yīng)、細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)、細(xì)胞間黏附以及免疫調(diào)節(jié)，是上調(diào)表達(dá)最為顯著的內(nèi)分泌分子[1]。在子宮內(nèi)膜息肉的形成和發(fā)展中其異常表達(dá)可能起重要作用[2-3]。本課題采用分子生物學(xué)和免疫組織學(xué)技術(shù)，探討ER、VEGF、TGF-β1在增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中的表達(dá)情況，揭示ER、VEGF、TGF-β1與增生期子宮內(nèi)膜息肉的預(yù)后關(guān)聯(lián)性，總結(jié)其是否可作為增生期子宮內(nèi)膜息肉早期診斷、病情監(jiān)測(cè)標(biāo)志物和術(shù)前輔助診斷的依據(jù)，為增生期子宮內(nèi)膜息肉的早期診治提供基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1病例選擇納入2012年1月至2016年1月我院婦科收治的增生期子宮內(nèi)膜息肉組織樣本48例，患者年齡為40～65(52.36±6.53)歲。對(duì)所有手術(shù)治療的患者進(jìn)行隨訪觀察，中位隨訪時(shí)間為12個(gè)月。同時(shí)納入健康對(duì)照組女性30例，其一般資料與增生期子宮內(nèi)膜息肉組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。該研究所有患者均簽訂知情同意書(shū)，試驗(yàn)研究通過(guò)了醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.2RNA提取及RT-PCR采用TaqMan RNA試劑盒對(duì)48例增生期子宮內(nèi)膜息肉組織和30例健康對(duì)照組患者進(jìn)行RNA提取與檢測(cè)，對(duì)ER、VEGF、TGF-β1的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)ER、VEGF、TGF-β1的表達(dá)水平采用二步法進(jìn)行檢測(cè)，合成互補(bǔ)DNA，對(duì)10 ng RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)了反應(yīng)體系進(jìn)行反應(yīng)，總的RNA濃度為2 ng·μL-1，加入逆轉(zhuǎn)錄引物5 μL，梯度變性反應(yīng)，溫度時(shí)間遞減，qPCR的反應(yīng)體系，逆轉(zhuǎn)錄體系反應(yīng)，5 μL cDNA共體積擴(kuò)增至20 μL，通過(guò)循環(huán)反應(yīng)擴(kuò)張40個(gè)循環(huán)，采用RNU6作為內(nèi)參進(jìn)行校正，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，按照PCR操作說(shuō)明進(jìn)行熒光實(shí)時(shí)定量反應(yīng)，應(yīng)用計(jì)算公式(△Ct=CtGalectin-9/CA125-CtRNU6)計(jì)算ER、VEGF、TGF-β1相對(duì)表達(dá)量。

2 結(jié)果

2.1不同組織中ER、VEGF、TGF-β1mRNA的相對(duì)表達(dá)量增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中ER、VEGF、TGF-β1 mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 不同組織中ER、VEGF、TGF-β1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量

2.2ER、VEGF、TGF-β1的表達(dá)與增生期子宮內(nèi)膜息肉臨床病理參數(shù)的關(guān)系ER、VEGF、TGF-β1在增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中的表達(dá)與其復(fù)發(fā)有關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 ER、VEGF、TGF-β1的表達(dá)與增生期子宮內(nèi)膜息肉臨床病理參數(shù)的關(guān)系 %

3 討論

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)及生活習(xí)慣的改變，女性生育率明顯降低，增生期子宮內(nèi)膜息肉的發(fā)病率卻呈現(xiàn)出增加的趨勢(shì)，由于該病具有惡變的可能，因此治療方法上應(yīng)當(dāng)給予徹底手術(shù)治療[4]。增生期子宮內(nèi)膜息肉具有2個(gè)顯著特點(diǎn):早期癥狀不明顯，給診斷較為困難；具有獨(dú)特的生長(zhǎng)及惡化可能性，因此，給患者及家庭帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)負(fù)擔(dān)[5-6]。

血管因子可能在增生期子宮內(nèi)膜息肉發(fā)病過(guò)程中起重要作用，近年來(lái)血管因子在細(xì)胞增生、遷移發(fā)生過(guò)程中的作用受到學(xué)術(shù)界的廣泛重視[7-8]，但目前關(guān)于該病血管因子方面的研究較少。增生期子宮內(nèi)膜息肉的子宮內(nèi)膜間質(zhì)中血管數(shù)比分泌期子宮內(nèi)膜增多，形態(tài)學(xué)分析子宮內(nèi)膜基底層血管顯示血管面積于增殖期和分泌期增加，腺肌病患者血管數(shù)量也較對(duì)照組顯著增加，提示血管生成的改變可能是子宮腺肌病發(fā)病原因之一[9-11]。已有研究[12]證實(shí)VEGF及其家族成員在血管生成中發(fā)揮著重要作用，成為必不可少的誘導(dǎo)因子。ER在組織中的表達(dá)反映了該組織的血管生成活性，是參與調(diào)控女性機(jī)體激素水平的重要激素[13]，在增生期子宮內(nèi)膜息肉的發(fā)病過(guò)程中起重要作用。增生期子宮內(nèi)膜息肉的血管生成是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，涉及到一系列細(xì)胞刺激因子和抑制因子，研究[14]表明TGF-β1可活化血管因子，是一種以抑制免疫為主的負(fù)性因子，具有多種生物學(xué)功能，使增生期子宮內(nèi)膜息肉得以逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。以上3種因子對(duì)促進(jìn)新生血管的形成可能起共同作用，其異常表達(dá)可能提示該病的形成和發(fā)展，可作為診斷標(biāo)志物的潛力。

細(xì)胞發(fā)生病變轉(zhuǎn)化時(shí)相關(guān)基因的表型及其相關(guān)分子也會(huì)隨之發(fā)生變化，這些變化與正常細(xì)胞的生長(zhǎng)特征不同，可能成為細(xì)胞惡變的主要誘因，這也為我們尋找新的增生期子宮內(nèi)膜息肉作用標(biāo)志物及靶點(diǎn)提供線索[15]。本研究通過(guò)探討ER、VEGF、TGF-β1共表達(dá)的狀況和消長(zhǎng)關(guān)系，深入研究三者作為病情監(jiān)測(cè)、診斷的生物標(biāo)志物可能性；觀察3個(gè)指標(biāo)的互補(bǔ)應(yīng)用的可能性。結(jié)果顯示，增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中ER、VEGF、TGF-β1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量與增生期子宮內(nèi)膜息肉存在相關(guān)性；ER、VEGF、TGF-β1在增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中的表達(dá)與其復(fù)發(fā)有關(guān)?？傊?，增生期子宮內(nèi)膜息肉組織中ER、VEGF、TGF-β1的表達(dá)明顯升高，且ER、VEGF、TGF-β1相對(duì)表達(dá)量可用于增生期子宮內(nèi)膜息肉的預(yù)后評(píng)估。

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LIANG Duoxian

(HuizhouCentralPeople’sHospital,Huizhou516000,China)

ObjectiveTo investigate the expressions and correlation of estrogen receptor (ER),vascular endothelial growth factor (VEGF),transformation growth factor-β1 (TGF-β1) in the proliferative phase endometrial polyps.MethodsRT-PCR was used to detect the relative expression levels of ER,VEGF,TGF-β1 in the 48 cases of proliferative phase endometrial polyps and the 30 cases of healthy controls.ResultsThe mRNA relative expression levels of ER,VEGF,TGF-β1 in the proliferative phase endometrial polyps were higher than those in the healthy controls (P<0.05); ER,VEGF,TGF-β1 in the proliferative phase endometrial polyps were related with the relapse (P<0.05).ConclusionHigh ER,VEGF,TGF-β1 expression levels are observed in the proliferative phase endometrial polyps,ER,VEGF,TGF-β1 detection can be used for prognostic evaluation of endometrium polyps.

estrogen receptor; vascular endothelial growth factor; transformation growth factor-β1; proliferative phase endometrial polyps

惠州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：2015Y028)

梁朵獻(xiàn)(1981-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤及微創(chuàng)治療相關(guān)研究。E-mail：liangduoxian26@163.com

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.05.002

R737.33；730.23

A

1673-5412(2017)05-0000-03

2016-05-30)