趙文惠，曾誠(chéng)，秦冬梅（.新疆醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊830004；2.石河子大學(xué)藥學(xué)院，新疆石河子832002）

·民族醫(yī)藥·

維藥昆侖雪菊多糖對(duì)四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的預(yù)防作用及機(jī)制研究Δ

趙文惠1＊，曾誠(chéng)1，秦冬梅2#（1.新疆醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊830004；2.石河子大學(xué)藥學(xué)院，新疆石河子832002）

目的：研究維藥昆侖雪菊多糖（KSCP）對(duì)四氯化碳（CCl4）所致小鼠急性肝損傷的預(yù)防作用及機(jī)制。方法：將96只小鼠隨機(jī)分為正常組（生理鹽水）、模型組（生理鹽水）、聯(lián)苯雙酯滴丸組（陽性對(duì)照，1.5 mg/10 g）和KSCP低、中、高劑量組（0.3、0.6、1.2 mg/10 g），每組16只，ig給藥，每天1次，連續(xù)10 d。除正常組外，其余各組小鼠均ip 1%CCl4菜籽油溶液誘導(dǎo)肝損傷。造模24 h后，檢測(cè)各組小鼠血清中谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素1（IL-1）的水平和肝組織中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化物（SOD）的水平，計(jì)算小鼠肝、脾指數(shù)，觀察肝組織病理變化并進(jìn)行病理評(píng)分，檢測(cè)肝組織中凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)。結(jié)果：與正常組比較，模型組小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1水平和肝組織中MDA水平以及肝、腎指數(shù)均明顯升高（P＜0.01），肝組織中SOD水平明顯降低（P＜0.01）；肝組織發(fā)生肝細(xì)胞壞死、變性和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等病理變化，病理評(píng)分明顯增加（P＜0.01）；肝組織中Caspase-3蛋白表達(dá)水平以及Bcl-2/Bax比值均明顯降低（P＜0.01）。與模型組比較，各給藥組小鼠上述指標(biāo)均明顯改善（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論：KSCP對(duì)CCl4所致小鼠急性肝損傷有一定預(yù)防作用，其機(jī)制可能與抗氧化、抗炎及調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)有關(guān)。

維藥；昆侖雪菊多糖；急性肝損傷；預(yù)防作用；抗炎；細(xì)胞凋亡；小鼠

昆侖雪菊（Kunlun snow chrysanthemum，KSC）又名“血菊”，維吾爾語“古麗恰爾”，是目前新疆唯一與雪蓮齊名的稀有高寒野生植物，具有清熱解毒、活血化疲、化濕的功效[1]。KSC在新疆資源豐富，在新疆達(dá)坂城、皮山縣、策勒縣等地區(qū)均有廣泛種植[2]。根據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道，昆侖雪菊多糖（Kunlun snow chrysanthemum polysaccharides，KSCP）具有提高機(jī)體免疫力、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、抗氧化、抗炎等多種生物活性[3-4]，而且新疆KSC中多糖含量約為13.86%，遠(yuǎn)高于其他品種菊花[5]。本課題組前期預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明，KSCP對(duì)過氧化氫（H2O2）致大鼠肝細(xì)胞IAR20損傷具有明顯的保護(hù)作用，但有關(guān)KSCP對(duì)急性肝損傷的保護(hù)作用機(jī)制尚不明確。因此，本課題組擬采用四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷，通過觀察小鼠血清和肝組織中相關(guān)生化指標(biāo)的變化、肝組織病理變化以及肝細(xì)胞凋亡情況等，考察KSCP對(duì)肝損傷的預(yù)防作用，并初步考察其作用機(jī)制，為今后KSCP防治急性肝炎的臨床應(yīng)用提供一定的藥理依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

H1酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio Tek公司）；5417R冷凍離心機(jī)[艾本德（上海）國(guó)際貿(mào)易有限公司]；BDS-FL熒光倒置顯微鏡（重慶奧特光學(xué)儀器有限責(zé)任公司）；DS-U3數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)（日本尼康株式會(huì)社）。

1.2 藥品與試劑

KSCP（新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)中心自制，批號(hào)：20150822，純度：＞97%）；聯(lián)苯雙酯滴丸（北京協(xié)和藥廠，批號(hào)：20140908，規(guī)格：1.5 mg×500丸）；谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）比色法試劑盒和腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素1（IL-1）酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：20150513、20150407、20150321、20150411、20150302、20150310）；兔抗Caspase-3、Bcl-2、Bax（凋亡相關(guān)蛋白）、β-肌動(dòng)蛋白（β-actin）一抗和山羊抗兔二抗（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；其余試劑均為分析純。

1.3 動(dòng)物

SPF級(jí)健康KM小鼠96只，♀，7～9周齡，體質(zhì)量18～22 g，購(gòu)自新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SYXK（新）2003-0001。將小鼠置于（20±2）℃、自然光照條件下適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，飼養(yǎng)期間小鼠自由進(jìn)食、飲水。

2 方法

2.1 分組、造模與給藥

取KM小鼠96只，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組、模型組、聯(lián)苯雙酯滴丸組（1.5 mg/10 g，按體表面積法根據(jù)人臨床等效劑量換算而得）和KSCP低、中、高劑量組（0.3、0.6、1.2 mg/10 g），每組16只。各給藥組大鼠每天ig給藥1次，連續(xù)10 d，正常組和模型組小鼠ig等體積生理鹽水。于實(shí)驗(yàn)第10天，將所有小鼠隔夜禁食12 h后稱質(zhì)量，除正常組外的其余各組小鼠ip 1%CCl4菜籽油溶液誘導(dǎo)急性肝損傷，正常組小鼠ip不含CCl4的菜籽油溶液。

2.2 生化指標(biāo)及肝、腎指數(shù)檢測(cè)

末次給藥24 h后，稱定小鼠體質(zhì)量。隨機(jī)選8只小鼠麻醉后取血，離心制備血清；剩余8只小鼠麻醉后取肝、脾組織，用生理鹽水清洗后用濾紙拭干，稱肝、脾質(zhì)量，計(jì)算肝、脾指數(shù)[肝、脾質(zhì)量（g）/小鼠體質(zhì)量（10 g）]。將肝組織和生理鹽水以1∶7的比例制備組織勻漿液。檢測(cè)血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1水平和肝組織中MDA、SOD水平，具體操作按照相應(yīng)試劑盒說明書進(jìn)行。

2.3 肝組織病理學(xué)觀察

摘取小鼠相同部位的肝組織，生理鹽水沖洗，濾紙拭干后，用10%中性甲醛溶液固定、梯度乙醇（50%～100%）脫水、二甲苯透明、石蠟包埋后，制成5 μm厚切片。將切片在二甲苯中脫蠟后，采用蘇木精-伊紅（HE）染色，脫水，中性樹脂封片。于400倍顯微鏡下觀察肝組織病理學(xué)變化，并進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[6]如下：未見肝細(xì)胞變性、壞死、腫脹或炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，且肝小葉結(jié)構(gòu)完整，計(jì)1分；肝細(xì)胞局限性變性或壞死、腫脹及偶見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，且肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)有所改變，計(jì)2分；肝細(xì)胞彌散性變性、腫脹及局限性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肝小葉結(jié)構(gòu)改變，計(jì)3分；肝細(xì)胞發(fā)生水樣變性腫大、胞質(zhì)變稀，個(gè)別細(xì)胞發(fā)生酸性壞死，肝小葉結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，計(jì)4分。

2.4 肝組織中Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)

采用Western blot法檢測(cè)小鼠肝組織中Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)。取小鼠肝組織，用組織裂解液裂解后提取總蛋白，采用二喹啉甲酸（BCA）法進(jìn)行蛋白定量后，制膠，灌10%分離膠（電壓為110 V）和5%濃縮膠（電壓為80 V），上樣，進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）。然后在150 mA條件下用聚偏二氟乙烯膜（PVDF）轉(zhuǎn)膜2 h，用封閉液將膜進(jìn)行封閉處理，用TBST洗膜3次，每次10 min。分別加入相應(yīng)一抗（1∶1 000），4℃孵育過夜，然后在室溫下加入山羊抗兔二抗（1∶2 000），孵育2 h，用TBST洗膜3次，每次10 min。暗室曝光、顯影，采用AlphaView SA 3.4.0.0凝膠圖像分析軟件，以β-actin為內(nèi)參，以目標(biāo)蛋白條帶灰度值與βactin條帶灰度值的比值表示目標(biāo)蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以±s表示，組間比較采用單因素方差分析和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 各組小鼠生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

3.1.1 血清中肝細(xì)胞損傷指標(biāo)與正常組比較，模型組小鼠血清中AST、ALT水平明顯升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠血清中AST、ALT水平均明顯降低（P＜0.01），結(jié)果見表1。

表1 各組小鼠血清中ALT、AST、TNF-α和IL-1水平檢測(cè)結(jié)果（±s，n＝8）Tab1 Results of ALT，AST，TNF-α，IL-1 levels in serum of mice in each group（±s，n＝8）

表1 各組小鼠血清中ALT、AST、TNF-α和IL-1水平檢測(cè)結(jié)果（±s，n＝8）Tab1 Results of ALT，AST，TNF-α，IL-1 levels in serum of mice in each group（±s，n＝8）

注：與正常組比較，＊＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01Note：vs.normal group，＊＊P＜0.01；vs.model group，#P＜0.05，##P＜0.01

IL-1，pg/mL 162.36±23.44 436.51±51.88＊＊205.40±22.59##355.26±33.14##266.38±27.58##213.19±25.61##組別正常組模型組聯(lián)苯雙酯滴丸組KSCP低劑量組KSCP中劑量組KSCP高劑量組劑量，mg/10 g 1.5 0.3 0.6 1.2 ALT，U/L 28.62±3.77 52.42±7.16＊＊31.82±2.29##48.39±4.41#36.78±5.02##31.17±1.94##AST，U/L 52.52±7.33 181.26±35.19＊＊61.33±8.29##146.52±32.33##96.82±14.52##56.36±7.55##TNF-α，pg/mL 133.45±16.31 258.53±37.83＊＊161.33±17.92##225.59±25.88#187.95±14.67##153.28±13.38##

3.1.2 血清中炎癥相關(guān)指標(biāo)與正常組比較，模型組小鼠血清中TNF-α、IL-1水平明顯升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠血清中TNF-α、IL-1水平均明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），且KSCP的作用具有量效關(guān)系，結(jié)果見表1。

3.1.3 肝組織中氧化應(yīng)激指標(biāo)與正常組比較，模型組小鼠肝組織中MDA水平明顯升高、SOD水平明顯降低（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠肝組織中MDA水平均明顯降低、SOD水平均明顯升高（P＜0.05或P＜0.01），且KSCP的作用具有量效關(guān)系，結(jié)果見表2。

表2 各組小鼠肝組織中MDA、SOD水平測(cè)定結(jié)果（±s，n＝8）Tab2 Results of MDA and SOD levels in liver tissue of mice in each group（±s，n＝8）

表2 各組小鼠肝組織中MDA、SOD水平測(cè)定結(jié)果（±s，n＝8）Tab2 Results of MDA and SOD levels in liver tissue of mice in each group（±s，n＝8）

注：與正常組比較，＊＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01Note：vs.normal group，＊＊P＜0.01；vs.model group，#P＜0.05，##P＜0.01

SOD，U/mL 75.72±14.51 22.53±6.59＊＊91.47±7.66##31.57±8.72##49.32±11.32##86.94±9.47##組別正常組模型組聯(lián)苯雙酯滴丸組KSCP低劑量組KSCP中劑量組KSCP高劑量組劑量，mg/10 g 1.5 0.3 0.6 1.2 MDA，nmol/mL 3.45±1.49 8.54±2.62＊＊3.48±1.19##7.94±1.22#5.62±1.74##3.77±1.35##

3.2 各組小鼠肝、脾指數(shù)測(cè)定結(jié)果

與正常組比較，模型組小鼠的肝、脾指數(shù)明顯升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠的肝、脾指數(shù)均明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），且KSCP的作用具有量效關(guān)系，結(jié)果見表3。

3.3 各組小鼠肝組織病理學(xué)觀察結(jié)果

與正常組比較，模型組小鼠肝組織發(fā)生肝細(xì)胞壞死、變性和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，在肝小葉間及肝竇處見到腫脹血管，病理評(píng)分明顯升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠肝組織的肝細(xì)胞變性、壞死、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)以及血管腫脹程度均得到減輕，肝小葉結(jié)構(gòu)得以恢復(fù)，病理評(píng)分明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），病理觀察結(jié)果見圖1。正常組、模型組、聯(lián)苯雙酯滴丸組和KSCP低、中、高劑量組小鼠肝組織病理評(píng)分依次為（1.03±0.35）、（3.52±0.69）、（2.18±0.24）、（3.27±0.51）、（2.65±0.35）、（2.21±0.21）分（n＝8）。

表3 各組小鼠肝、脾指數(shù)測(cè)定結(jié)果（±s，n＝8）Tab3 Determination results of liver，spleen indexes of mice in each group（±s，n＝8）

表3 各組小鼠肝、脾指數(shù)測(cè)定結(jié)果（±s，n＝8）Tab3 Determination results of liver，spleen indexes of mice in each group（±s，n＝8）

注：與正常組比較，＊＊P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01Note：vs.normal group，＊＊P＜0.01；vs.model group，#P＜0.05，##P＜0.01

脾指數(shù)，mg/10 g 25.68±4.24 32.52±5.28＊＊26.75±4.11##30.81±4.95#28.49±3.15##27.25±3.96##組別正常組模型組聯(lián)苯雙酯滴丸組KSCP低劑量組KSCP中劑量組KSCP高劑量組劑量，mg/10 g 1.5 0.3 0.6 1.2肝指數(shù)，mg/10 g 344.11±37.35 436.82±45.26＊＊333.24±35.26##392.08±25.08##362.65±34.79##327.55±42.74##

圖1 各組小鼠肝組織病理學(xué)觀察結(jié)果（HE染色，×400）Fig1 Pathological observation results of liver tissues of mice in each group（HE staining，×400）

3.4 各組小鼠肝組織中Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)測(cè)定結(jié)果

與正常組比較，模型組小鼠肝組織中Caspase-3蛋白表達(dá)水平明顯升高（P＜0.01），Bcl-2/Bax比值明顯降低（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠肝組織中Caspase-3蛋白表達(dá)水平明顯降低（P＜0.01），Bcl-2/Bax比值明顯升高（P＜0.01），且KSCP的作用具有量效關(guān)系，結(jié)果見圖2、圖3。

4 討論

肝損傷疾病是世界范圍內(nèi)的常見病和多發(fā)病，發(fā)病率高、治療難度大、易惡化，是近年來臨床治療的重點(diǎn)和難點(diǎn)[7]。肝損傷主要是指肝細(xì)胞損傷，是多種肝疾病共有的病變結(jié)果，藥物、毒物、病毒等多種因素都可以誘導(dǎo)肝損傷。長(zhǎng)期的肝損傷會(huì)導(dǎo)致脂肪肝、肝硬化、肝纖維化甚至肝癌。由于肝損傷的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，尚缺乏特效的治療藥物。因此，尋找和開發(fā)療效確切的保肝、護(hù)肝藥物已成為全世界肝病研究者所關(guān)注的焦點(diǎn)。聯(lián)苯雙酯滴丸為我國(guó)創(chuàng)制的一種治療肝炎的降酶藥物，臨床應(yīng)用多年，療效確切，故本研究以其為陽性藥物。

圖2 各組小鼠肝組織中Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的電泳圖Fig2 Electrophoresis charts of protein expressions of Caspase-3，Bcl-2，Bax in liver tissue of mice in each group

圖3 各組小鼠肝組中凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的測(cè)定結(jié)果Fig3 Results of apoptosis-related proteins expression in liver tissue of mice in each group

目前，采用CCl4外源性化合物誘導(dǎo)動(dòng)物化學(xué)性肝損傷為建立動(dòng)物急性肝損傷模型的經(jīng)典方法，具有操作簡(jiǎn)便、病理模擬性、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)[8-9]。CCl4在引起肝細(xì)胞損傷時(shí)，破壞了細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致肝細(xì)胞內(nèi)的多種酶可透過肝細(xì)胞膜到肝竇狀隙而進(jìn)入血液，使血中的多種酶活性增高[10-11]。其中ALT、AST是肝組織中的主要功能酶，可從損傷和壞死的肝細(xì)胞質(zhì)或線粒體中釋放到血液，其水平的高低在一定程度上反映了肝細(xì)胞損害的程度[12]。氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA為自由基引起的脂質(zhì)過氧化過程中生成的一種醛類物質(zhì)，其含量可以反映脂質(zhì)過氧化的程度；而SOD的主要作用在于清除體內(nèi)自由基，從而保護(hù)細(xì)胞不受毒性氧自由基的損傷，其含量可反映體內(nèi)氧化應(yīng)激損傷程度[13]。TNF-α主要由單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞分泌，其水平與機(jī)體的炎癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，是炎癥細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵[14]。IL-1是人類最早發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，也是炎癥介質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的主要成分，在炎癥反應(yīng)中起重要作用[15]。肝細(xì)胞凋亡是一個(gè)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，發(fā)生在枯否細(xì)胞、星狀細(xì)胞、肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等各種類型細(xì)胞中。Caspase-3是內(nèi)源性和外源性凋亡信號(hào)通路共同活化的關(guān)鍵酶。Bcl-2和Bax是主要的細(xì)胞凋亡調(diào)控基因，Bcl-2可抑制細(xì)胞凋亡，Bax可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，Bcl-2與Bax的比例決定了細(xì)胞凋亡發(fā)生的可能性。

本課題組前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)KSCP給藥劑量在0.3～1.2 mg/10 g范圍時(shí)，對(duì)CCl4所致肝損傷小鼠的肝細(xì)胞凋亡具有較明顯的抑制作用；當(dāng)KSCP低于0.3 mg/10 g時(shí)，對(duì)肝細(xì)胞凋亡無抑制作用；而當(dāng)KSCP高于1.2 mg/10 g時(shí)凋亡抑制作用反而下降，故在本研究中設(shè)置給藥劑量為0.3～1.2 mg/10 g。本研究結(jié)果顯示，KSCP能降低CCl4所致肝損傷小鼠血清中ALT、AST水平，提示KSCP對(duì)小鼠肝損傷具有一定的改善作用，而肝組織病理學(xué)觀察結(jié)果也證實(shí)了其能夠減輕小鼠肝組織中肝細(xì)胞腫大、炎癥浸潤(rùn)以及壞死嚴(yán)重程度；同時(shí)，KSCP可降低小鼠肝組織中MDA的水平，升高SOD水平，提示其可提高機(jī)體的氧化應(yīng)激水平；并且KSCP還可降低細(xì)胞中炎癥因子TNF-α、IL-1水平，間接發(fā)揮其保肝作用；此外，KSCP可上調(diào)肝細(xì)胞中抑凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)，下調(diào)促凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表達(dá)，增加Bcl-2/Bax的比值，提示KSCP可能通過抑制肝細(xì)胞凋亡從而發(fā)揮其保肝作用。

綜上所述，KSCP對(duì)CCl4所致急性肝損傷小鼠有較好的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抗氧化、抗炎及抑制細(xì)胞凋亡相關(guān)，但更多的藥理作用機(jī)制有待進(jìn)一步證實(shí)。

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Study on the Preventive Effect and Mechanism of Wei Medicine Kunlun Snow Chrysanthemum Polysaccharides on Carbon Tetrachloride-induced Acute Liver Injury in Mice

ZHAO Wenhui1，ZENG Cheng1，QIN Dongmei2（1.Central Laboratory of Xinjiang Medical University，Urumqi 830004，China；2.College of Pharmacy，Shihezi University，Xinjiang Shihezi 832002，China）

OBJECTIVE：To study the preventive effect and mechanism of Wei medicine Kunlun snow chrysanthemum polysaccharides（KSCP）on carbon tetrachloride（CCl4）-induced acute liver injury in mice.METHODS：96 mice were randomly divided into normal group（normal saline），model group（normal saline），Biphenyl diester dropping pill（positive control，1.5 mg/10 g）and KSCP low-dose，medium-dose，high-dose groups（0.3，0.6，1.2 mg/10 g），16 in each group，with intragastric administration，once a day，for 10 d.Except for normal group，mice in other groups were intraperitoneally injected 1%CCl4rapeseed oil solution to induce liver injury.After 24 h of modeling，the levels of alanine aminotransferase（ALT），aspartate aminotransferase（AST），tumor necrosis factor α（TNF-α），interleukin 1（IL-1）in serum，levels of malondialdehyde（MDA），superoxide dismutase（SOD）in liver tissue were detected；the liver，spleen indexes were calculated.Pathological changes of liver tissue were observed，pathological scoring was conducted.The protein expressions of apoptosis-related genes Caspase-3，Bcl-2，Bax in liver tissue were detected.RESULTS：Compared with normal group，levels of ALT，AST，TNF-α，IL-1 in serum，MDA level in liver tissue and liver，spleen indexes in model group were obviously increased（P＜0.01）；SOD level in liver tissue was decreased（P＜0.01）；pathological changes in hepatocellular necrosis，degeneration and inflammatory cell infiltration，and pathological score in model group was obviously increased（P＜0.01）；caspase-3 protein expression and Bcl-2/Bax ratio in liver tissue in model group were obviously decreased（P＜0.01）.Compared with model group，abovementioned indexes in each administration group were obviously improved（P＜0.05 orP＜0.01）.CONCLUSIONS：KSCP has certain preventive effect on CCl4-induced acute liver injury in mice，and its mechanism may be associated with anti-oxidation，anti-inflammation and regulation of apoptosis-related protein expressions.

Wei medicine；Kunlun snow chrysanthemum polysaccharides；Acute liver injury；Preventive effect；Anti-inflammation；Cell apoptosis；Mice

R285.5

A

1001-0408（2017）31-4407-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2017.31.23

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.81560680）

＊碩士研究生。研究方向：藥物分析與新藥開發(fā)。E-mail：whzhao2006@163.com

#通信作者：副教授，博士。研究方向：天然藥物及制劑研究。E-mail：dongmeiqinli@163.com

2017-06-10

2017-09-21）

（編輯：林靜）