趙啟祖/中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所OIE國家豬瘟參考實(shí)驗(yàn)室

豬瘟DIVA疫苗研究現(xiàn)狀

趙啟祖/中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所OIE國家豬瘟參考實(shí)驗(yàn)室

一、養(yǎng)豬業(yè)是中國畜牧業(yè)的脊柱產(chǎn)業(yè)

2012-2016年國家統(tǒng)計(jì)局公布，肉類總產(chǎn)量，豬肉占63.76%，是主要消費(fèi)肉類產(chǎn)品；全國年均生豬出欄量達(dá)到46020.6萬頭；年均生豬出欄量達(dá)到70804.4萬頭；年均生豬總產(chǎn)量達(dá)到11.6825億頭，按照數(shù)據(jù)來看，中國的養(yǎng)豬量占據(jù)了世界養(yǎng)豬總量的一半以上。養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展直接影響了國家經(jīng)濟(jì)和民眾生活水平的提高。

生豬養(yǎng)殖模式多樣、生物安全水平不高，養(yǎng)殖成本過高，導(dǎo)致疫病防治成本居高不下。如今集約化、現(xiàn)代化、規(guī)?；?、專業(yè)化養(yǎng)豬，已經(jīng)逐漸成為發(fā)展趨勢。1990年以前，我國90%豬場是散養(yǎng)豬場；到2002年，有500頭以上的豬場大約占到10%；到2015年達(dá)到了44%；預(yù)估到2020年能夠達(dá)到52%左右。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，我國因病死亡豬的數(shù)量占飼養(yǎng)總數(shù)的8%～10%，其中有一定比例的死亡是由于豬瘟引起的。

二、豬瘟兔化弱毒疫苗

C株-豬瘟兔化弱毒疫苗，簡稱“C株”（C-strain）。20世紀(jì)60年代C株從中國被引入東歐和亞洲友邦，被稱為“K”株或“LC”（lapinized Chinese strain）株。后傳到西歐和拉美各國，Riems株就是C株的一個(gè)變種。豬瘟兔化弱毒疫苗性能好、安全、免疫效果好，是國際公認(rèn)的安全有效的弱毒疫苗，對(duì)世界豬瘟的預(yù)防控制作出了重大貢獻(xiàn)。

三、中國豬瘟疫苗的生產(chǎn)與使用

1.豬瘟兔化弱毒疫苗自上世紀(jì)50年代末大規(guī)模使用以來，是我國免疫覆蓋率最高的疫苗，養(yǎng)豬人最認(rèn)可的疫苗。

2.疫苗從最初的兔脾臟組織苗，逐漸發(fā)展乳兔組織苗、原代細(xì)胞培養(yǎng)苗（包括豬、羊和牛細(xì)胞）。

3.大規(guī)?；a(chǎn)的牛睪丸原代細(xì)胞培養(yǎng)疫苗。

4.目前中國豬瘟疫苗的生產(chǎn)企業(yè)有44家，生產(chǎn)疫苗品種有10個(gè)，包括豬瘟活疫苗（兔源）、豬瘟活疫苗（乳兔源）、豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞）、豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗（活疫苗）、豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗（兔源）、豬瘟-豬丹毒-豬多殺性巴氏桿菌三聯(lián)活疫苗（細(xì)胞源或兔源+G4T10株+EO630株）、高致病性繁殖與呼吸綜合征-豬瘟二聯(lián)活疫苗（TJM-F92株）、政府采購專用豬瘟活疫苗（脾淋源）、政府采購專用豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）。

5.C株疫苗的優(yōu)點(diǎn)。

（1）免疫最早4天即可產(chǎn)生可靠的保護(hù)。

（2）口服免疫也可以獲得部分保護(hù)，攻毒也不形成持續(xù)感染。

（3）免疫持續(xù)期至少6～11月甚至終生。

（4）所有基因型均可交叉保護(hù)。

（5）肌肉注射沒有胎盤傳播的直接證據(jù)，但懷孕母豬所生仔豬是經(jīng)口服免疫的。

（6）對(duì)豬和其他動(dòng)物效力好，甚至對(duì)免疫動(dòng)物，安全性也很好。

（7）對(duì)懷孕動(dòng)物沒有副作用，即使穿過胎盤，也對(duì)懷孕豬和仔豬沒有影響。

（8）生產(chǎn)簡單、價(jià)格低廉。不需要佐劑，還可以口服。

（9）可以采用核酸診斷鑒別。

綜上，可以看到C株疫苗可以說是理想疫苗中的典范，但是其唯一的不足，就是不能用血清學(xué)方法進(jìn)行免疫感染鑒別診斷。

四、豬瘟DIVA疫苗

標(biāo)記疫苗必須與其相應(yīng)的血清型診斷方法共同發(fā)揮作用。設(shè)計(jì)候選標(biāo)記疫苗時(shí)，必須考慮如何開發(fā)有效的鑒別診斷技術(shù)。

“標(biāo)記疫苗”并不是一個(gè)十分準(zhǔn)確的概念，標(biāo)記疫苗和傳統(tǒng)疫苗的主要區(qū)別是免疫動(dòng)物產(chǎn)生的抗體能夠被區(qū)分，必須是疫苗和鑒別診斷方法配合使用，缺一不可。豬瘟DIVA安全、高效、產(chǎn)生免疫快、免疫力強(qiáng)。

豬瘟病毒感染后，可以測定到抗體有Erns、E2和NS3，其中E2是主要免疫原，是豬瘟標(biāo)記疫苗研究的目標(biāo)蛋白。

五、E2亞單位疫苗/E2 Subunit Vaccine

E2，囊膜糖蛋白，是E2亞單位疫苗的主要免疫原性蛋白，也是亞單位疫苗研究的靶蛋白?，F(xiàn)在市面所出售的的E2亞單位疫苗主要有：Bayer公司的 BayovacR CSF marker（32μg/dose）、MSD Animal Health（Intervet公司）的PorcilisR Pesti（Alfort）、豬瘟病毒E2重組桿狀病毒滅活疫苗（新疆天康）、豬瘟病毒E2重組桿狀病毒滅活疫苗（WH-09株）、豬瘟基因工程亞單位疫苗（293T-E2）CHO細(xì)胞等。

E2亞單位疫苗具有臨床保護(hù)、安全和預(yù)防病毒擴(kuò)散等明顯優(yōu)勢，但與此同時(shí)也有明顯的缺點(diǎn)，例如只能在早期免疫使用、需要免疫2次，而且配套的監(jiān)測Erns抗體的ELISA方法，其敏感性和特異性還有待提高。

六、活載體疫苗

活載體疫苗是20世紀(jì)90年代的研究重點(diǎn)，近年來我國學(xué)者開始進(jìn)行此類疫苗的研究，但仍處于實(shí)驗(yàn)室研究和聯(lián)苗的階段。

七、BVDV為基礎(chǔ)的標(biāo)記疫苗

1.對(duì)家豬、野豬、牛、山羊、綿羊和家兔安全；病毒可以在扁桃體復(fù)制，數(shù)周內(nèi)用PCR可以檢測核酸。

2.尿液、糞便和精液無疫苗病毒排除，不具有傳播性。

3.一次肌注一周內(nèi)免疫保護(hù)，保護(hù)期六個(gè)月，可以口服免疫。

4.口服免疫可免疫母源抗體陽性或較小仔豬，免疫效果略差。

鑒于BVDV和BDV有一定的交叉，多次免疫后特異性問題，還有待進(jìn)一步改進(jìn)完善。

八、C株為基礎(chǔ)的標(biāo)記疫苗

以C株為基礎(chǔ)研發(fā)DIVA疫苗及其配套ELISA的分子基礎(chǔ)是豬瘟病毒特異的TAVSPTTLR表位。

九、理想的豬瘟疫苗

1.無短期或長期副反應(yīng)。

2.對(duì)靶動(dòng)物和非靶動(dòng)物遺傳穩(wěn)定。

3.常規(guī)條件下生產(chǎn)工藝穩(wěn)定簡單。

4.成本低。

5.能快速產(chǎn)生免疫，且能做到終身免疫。

6.抵御不同毒株。

7.不形成帶毒者。

8.預(yù)防水平和垂直傳播。

9.具有敏感特異的鑒別診斷方法。