史云燕++陳敏++許曉國

DOI：10.16658/j.cnki.1672-4062.2017.12.042

[摘要] 目的 研究并分析在臨床診治妊娠期糖尿病患者的過程中，檢測TGF-β2、TGFβRⅡ的表達(dá)水平，評價其診斷價值。方法 選擇2016年4月—2017年4月于該中心同級別的人民醫(yī)院收治的妊娠期糖尿病患者為研究對象，隨機(jī)抽取128例作為該研究對象，分別檢測TGF-β2、TGFβRⅡ兩種指標(biāo)的表達(dá)水平并評價診斷意義。結(jié)果 通過Real-time PCR和WB檢測兩組孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA和蛋白表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，其在試驗組中的表達(dá)水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 臨床診治妊娠期糖尿病患者的過程中，TGF-β2和TGFβR II細(xì)胞因子的表達(dá)水平與病情的進(jìn)展密切相關(guān)，可作為其早期診斷的重要輔助指標(biāo)之一，應(yīng)廣泛推廣。

[關(guān)鍵詞] 妊娠期糖尿病；TGF-β2；TGFβR II；表達(dá)；意義

[中圖分類號] R714 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1672-4062（2017）06（b）-0042-02

Expression and Significance of TGF-β2 and TGFβR Ⅱ in Patients with Diabetes during Pregnancy

SHI Yun-yan， CHEN Min， XU Xiao-guo

Changzhou Disease Prevention and Control Center， Changzhou， Jiangsu Province， 213000 China

[Abstract] Objective To research and analyze the expression levels of TGF-β2 and TGFβR Ⅱ in the clinical diagnosis and treatment of patients with diabetes during pregnancy and evaluate its diagnosis value. Methods 128 cases of patients with diabetes during pregnancy admitted and treated in our hospital from April 2016 to April 2017 were selected as the research objects and the expression levels of TGF-β2 and TGFβRⅡ were respectively tested and the diagnosis significance was evaluated. Results The mRNA and protein expression levels of TGF-β2 and TGFβR Ⅱ were tested by the Real-time PCR and WB， and the expression levels in the test group were obviously higher than those in the control group， and the differences were obvious（P<0.05）. Conclusion The expression levels of TGF-β2 and TGFβR II cell factors are related to the disease progress in the clinical diagnosis and treatment of TGF-β2 and TGFβR II， which can be used as an important adjunctive index and can be widely promoted.

[Key words] Diabetes during pregnancy； TGF-β2； TGFβR II； Expression； Significance

作為臨床代謝病之一的妊娠期糖尿病，簡稱GDM，是一種發(fā)生在妊娠期間的疾病，患者以糖代謝異常為主要發(fā)病機(jī)制，近些年，GDM的發(fā)病率呈顯著增高趨勢。有研究顯示，GDM可對母嬰的近期和遠(yuǎn)期均產(chǎn)生一定的影響，如可誘發(fā)母體發(fā)生子癇或是提升剖宮產(chǎn)的機(jī)率，可對增加巨大兒或是低血糖胎兒的分娩機(jī)率，嚴(yán)重影響母嬰結(jié)局[1]。為此，該研究選取2016年4月—2017年4月收治的128例患者作為研究對象，旨在在臨床診治妊娠期糖尿病患者的過程中，檢測TGF-β2、TGFβRⅡ的表達(dá)水平，評價其診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該次研究選擇2016年6月—2017年6月于該中心同級別的人民醫(yī)院收治的妊娠期糖尿病患者為研究對象，僅對患者的病案進(jìn)行回顧性調(diào)查研究，通過對病案中數(shù)據(jù)的分析進(jìn)行實證研究。隨機(jī)抽取128例作為該研究試驗組對象的試驗組。年齡：介于22～39歲之間，以（29.12±2.76）歲為平均年齡；孕周：介于27～39周，并以（38.05±2.34）周為平均孕周；平均體重指數(shù)（簡稱BMI）：（24.52±2.8）kg/m2。隨機(jī)抽取健康孕婦60名作為該研究的對照組，年齡：介于22～38歲之間，以（29.38±2.52）歲為平均年齡；孕周：介于27～39周，并以（38.89±2.52）周為平均孕周；平均體重指數(shù)（簡稱BMI）：（23.45±2.7）kg/m2。對比兩組孕婦的一般資料，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 實驗試劑 TGF-β2、TGFβRⅡ引物 生工生物工程公司。mRNA檢測試劑盒：大連寶生物公司；免疫組化抗體：美國Abcam。endprint

1.2.2 Real-time PCR檢測 提取RNA，質(zhì)檢合格后應(yīng)用于實驗研究，內(nèi)參為GAPDH，以2-△△CT為計算方法，計算TGF-β2、TGFβRⅡ及GAPDH的mRNA的相對表達(dá)情況。

1.2.3 免疫蛋白印跡（簡稱WB）檢測 提取蛋白，經(jīng)G250考馬斯亮藍(lán)定量計算蛋白濃度、變性。再經(jīng)電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、一抗、二抗染色后顯影曝光，分析條帶表表達(dá)含量。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察并記錄所有孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA和蛋白表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析，計量資料用（x±s）表示，行t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較2組孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA表達(dá)水平

通過Real-time PCR檢測2組孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，其在試驗組中的表達(dá)水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 比較2組孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ的蛋白表達(dá)水平

通過WB檢測2組孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ的蛋白表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，其在試驗組中的表達(dá)水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

作為妊娠期間常見的代謝類疾病的GDM，具有2%～13%的發(fā)病率，可對胎兒產(chǎn)生胚胎畸形等短期畸形，也可誘發(fā)遠(yuǎn)期影響，如胎源性疾病等[2]。因此，為了更好地診治GDM，臨床應(yīng)深入研究GDM影響胎兒發(fā)育的分子機(jī)制。有研究顯示，GDM的發(fā)生與炎癥密切相關(guān)，且在GDM的產(chǎn)婦血液中，白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的含量顯著增多，均提示GDM處于一種亞臨床炎癥狀態(tài)[3]。

在正常妊娠的過程中，母親體內(nèi)的細(xì)胞因子是否處于平衡狀態(tài)可直接影響整個妊娠狀態(tài)。其中，較為常見的細(xì)胞因子是TGF-β，具有調(diào)節(jié)自身炎性和免疫作用，在孕婦的妊娠期間，可由胎盤和子宮內(nèi)膜分泌產(chǎn)生[4]。在GDM患者中，打破了機(jī)體內(nèi)細(xì)胞因子的原有平衡狀態(tài)，增加氧化應(yīng)激，影響線粒體功能，進(jìn)而增加超氧自由基[5]；此外，GDM可通過減少紅細(xì)胞超氧化歧化酶（簡稱SOD）等抗氧化物的表達(dá)，進(jìn)而降低對TGF-β2、TGFβRⅡ表達(dá)的抑制作用[6]。

在該研究中，通過Real-time PCR和WB檢測2組孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA和蛋白表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，其在試驗組中的表達(dá)水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。上述結(jié)果驗證了TGF-β2、TGFβRⅡ與GDM之間緊密聯(lián)系，且TGF-β2、TGFβRⅡ參與著GDM的進(jìn)展過程，這與楊秀花[7]的研究結(jié)果相符合。

綜上所述，臨床診治妊娠期糖尿病患者的過程中，TGF-β2和TGFβR II細(xì)胞因子的表達(dá)水平與病情的進(jìn)展密切相關(guān)，可作為其早期診斷的重要輔助指標(biāo)之一，但其具體分子機(jī)制有待深入研究。

[參考文獻(xiàn)]

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[2] 趙敏，孔麗娜.TGF-β1及其基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病的相關(guān)性的最新研究進(jìn)展[J].醫(yī)藥衛(wèi)生：引文版，2016（12）：26.

[3] 楊亞濱，關(guān)美芹，王穎麗.脂聯(lián)素與轉(zhuǎn)化生長因子-β1早期預(yù)測妊娠期糖尿病的臨床價值[J].中國傷殘醫(yī)學(xué)，2014（3）：37.

[4] 羅大衛(wèi)，鄭志，劉堃，等.糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清轉(zhuǎn)化生長因子β水平研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2013， 33（7）：990-992.

[5] 王勁松.TGF-β1、CTGF 在增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清中的表達(dá)及意義[J].臨床眼科雜志，2014，22（5）：464-466.

[6] 龔寶蘭，黃光榮，王任曉，等.妊娠期高血壓患者胎盤 TGF-β1及Smad的表達(dá)及意義[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2013，7（22）：10070-10073.

[7] 楊秀華，郭峰.TGF-β2、TGFβRⅡ在妊娠期糖尿病的表達(dá)[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2017，26（1）：23-25.

（收稿日期：2017-05-27）endprint