程金生 ，李 龍 ，鐘 鳴

（1.韶關(guān)學(xué)院英東食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東韶關(guān)512005；2.嘉應(yīng)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，廣東梅州512015）

防城港金花茶果肉及果核活性成分GC-MS分析

程金生1，李 龍1，鐘 鳴2

（1.韶關(guān)學(xué)院英東食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東韶關(guān)512005；2.嘉應(yīng)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，廣東梅州512015）

防城港金花茶為國(guó)內(nèi)分布較廣的一類(lèi)金花茶，國(guó)內(nèi)現(xiàn)有研究較少涉及金花茶果肉或果核有效成分分析.本文采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）分別對(duì)防城港金花茶果肉及果核活性成分進(jìn)行檢測(cè)分析.在優(yōu)化條件下，防城港金花茶果肉中共檢出22種活性成分，其中代表性活性物質(zhì)有羥乙醛、羥基丙酮、糠醛、5-羥甲基糠醛、十五烷酸和肌醇等；而防城港金花茶去表皮果核中共檢出23種活性成分，其中代表性活性物質(zhì)包括：十五烷酸、亞油酸甲酯、油酸甲酯、順式-十八碳烯酸、反式角鯊烯和維生素E等，這些活性成分包含一些重要營(yíng)養(yǎng)性成分.

防城港金花茶；果肉；果核；活性成分；分析

金花茶(Camellia nitidissima Chi)（原變種）在《中國(guó)植物志》中被系統(tǒng)地定位為山茶科、山茶族、山茶屬［1］,也是我國(guó)八種一級(jí)重點(diǎn)珍稀保護(hù)植物之一，也是《瀕危野生植物種國(guó)際貿(mào)易公約》附錄Ⅱ中的植物，與銀杉、桫欏、珙桐等“植物活化石”齊名.金花茶富含豐富的氨基酸、維生素、多糖類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分及齊墩果酸、α-香樹(shù)素、β-谷甾醇等藥用活性成分，且必需氨基酸占比優(yōu)于聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織及世界衛(wèi)生組織相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，具有較好的食品研究?jī)r(jià)值［2］.2010年中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部批準(zhǔn)金花茶等5種資源為新資源食品（2010年衛(wèi)生部第9號(hào)公告），深入開(kāi)展金花茶營(yíng)養(yǎng)性及藥用活性成分研究對(duì)于開(kāi)發(fā)新型金花茶功能保健食品、延長(zhǎng)金花茶產(chǎn)業(yè)鏈及提交產(chǎn)品附加值具有重要意義［3-4］.

防城港金花茶是金花茶分布較廣的品種之一，主要分布于廣西防城港市及周邊地區(qū)，尤其是海拔50～700 m酸性土山谷雜木林中，該品種目前已在廣東、廣西各地區(qū)廣泛引種［5-6］.近年來(lái)，人們對(duì)金花茶進(jìn)行了廣泛的研究［7-11］.

除防城港金花茶外，目前國(guó)內(nèi)外分布較廣或已人工引種的金花茶包括顯脈金花茶及隴瑞金花茶等12個(gè)產(chǎn)品.除此之外，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，目前國(guó)內(nèi)外另有珍稀瀕危金花茶品種約有42種，包括：東興金花茶、小果金花茶（變種）、中東金茶花、毛瓣金花茶、凹脈金花茶、薄瓣金花茶、小瓣金花茶、四季金花茶（毛籽金花茶）、直脈多脈金花茶、多瓣金花茶、檸檬（黃）金花茶、薄葉金花茶、夏石金花茶、長(zhǎng)柱金花茶、龍州金花茶、武鳴金花茶、平果金花茶、頂生金花茶、小花金花茶、弄崗金花茶、細(xì)葉金花茶、扶綏金花茶、天峨金花茶、多瓣淡黃金花茶、淡黃金花茶、簇蕊金花茶、直脈多瓣金花茶、博白金花茶、五室金花茶、大金花茶、四川金花茶、貴州金花茶、云南金花茶、離蕊金花茶、越南東京金花茶、越南抱莖（金花）茶、庫(kù)克芳金花茶、厚葉金花茶、塔姆島金花茶、胡龍金花茶等（圖1）.

圖1 國(guó)內(nèi)外部分代表性珍稀瀕危金花茶（Camellia bugiamapensis Orel,Curry,Luu&Q.D.圖片來(lái)源于文獻(xiàn)9，其它拍攝于南寧金花茶公園）

防城港金花茶果實(shí)蒴果扁三角球形，長(zhǎng)3.5cm，寬 4.5 cm，3爿裂開(kāi)，果壁厚4～7 mm，中軸3～4角形，先端3～4裂；果柄長(zhǎng)1 cm，有宿存苞片及萼片；種子6～8粒，長(zhǎng)約2cm，花期11～12月［6］（見(jiàn)圖2）.

本文采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對(duì)各防城港金花茶果肉及果核活性進(jìn)行分析.在優(yōu)化條件下，檢測(cè)防城港金花茶果肉及果核等各部位主要活性成分.

圖2 防城港金花茶果實(shí)（a-b），果肉層（c，中央位置為切開(kāi)的一粒果核）及果核(d)

1 試劑與方法

1.1 試劑與儀器

金花茶果實(shí)（圖2）購(gòu)于廣西中港高科有限公司，無(wú)水甲醇等試劑均為分析純，購(gòu)于廣州試劑有限公司.實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水.GC-MS采用Agilent 6890-5973型氣相色譜聯(lián)用儀，超聲波萃取采用上海之信JP-100S型超聲波清洗機(jī).

1.2 金花茶果實(shí)活性成分萃取

小心將金花茶果實(shí)果肉與果核分離.金花茶果肉置于粉碎機(jī)中粉碎，分別加入3倍體積的甲醇，于超聲波功率為80 W的超聲波儀中處理2 h，過(guò)濾得到其甲醇提取液，將提取液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮，得到粘稠狀金花茶果肉活性成分萃取物，隨后將該萃取物在40°C下真空干燥12 h得最終果肉萃取物.同樣采用此方法，將金花茶果核置于粉碎機(jī)中粉碎，分別加入3倍體積的甲醇，于超聲波功率為80 W的超聲波儀中處理2 h，過(guò)濾得到其甲醇提取液，將提取液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮，得到粘稠狀金花茶果核活性物質(zhì)萃取物，隨后將該萃取物在40°C下真空干燥12 h得最終果核萃取物［15］.

1.3 氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)條件

氣相色譜條件：色譜柱為HP-5MS石英毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）;升溫程序：初始溫度70℃，保持2 min,以13℃/min升溫至230℃，保持3 min,再以8℃/min升溫至280℃，保持12 min；載氣為氦氣;進(jìn)樣量 1μl，分流比為 50:1［16］.

質(zhì)譜條件：電離方式為電子轟擊離子源（EI）；電離能量70 eV；進(jìn)樣口溫度250℃；離子源溫度250℃；掃描質(zhì)量范圍為：35～500 amu；柱流量1.0 ml/min.質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)庫(kù)：Nist譜圖庫(kù).

2 結(jié)果與討論

2.1 金花茶果肉活性成分分析

目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)金花茶果肉活性成分的相關(guān)研究.少數(shù)相關(guān)研究?jī)H針對(duì)不同金花茶果實(shí)、果核形態(tài)、質(zhì)量進(jìn)行對(duì)比分析［17］.本文針對(duì)金花茶果肉活性成分相關(guān)研究對(duì)未來(lái)金花茶果肉深加工具有參考意義.本研究在優(yōu)化條件下，防城港金花茶果肉中共檢出22種活性成分（圖3）.如表1所示，其中可與Nist譜庫(kù)匹配識(shí)別的活性物質(zhì)包括：羥乙醛，羥基丙酮，糠醛，2、3-二氫-3、5二羥基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮，鄰苯二酚，5-羥甲基糠醛，1、4-苯二酚，鄰苯二甲酸二乙酯，十五烷酸，肌醇等.其中含量較高的物質(zhì)有：5-羥甲基糠醛（6.93%）、羥基丙酮（5.78%）、羥乙醛（5.07%）、肌醇（4.54%）等（見(jiàn)表1）.值得注意的是，防城港金花茶果肉中含有大量的醛、酮或酚類(lèi)物質(zhì)（羥乙醛，羥基丙酮，糠醛，2、3-二氫-3、5二羥基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮，鄰苯二酚，5-羥甲基糠醛，1、4-苯二酚等），有一定毒性，不可直接食用.

但有一點(diǎn)比較特殊的是，防城港金花茶果肉中含有一定的肌醇（也稱(chēng)環(huán)己六醇），其檢出含量為4.54%.而肌醇是鳥(niǎo)類(lèi)、哺乳類(lèi)動(dòng)物的必需營(yíng)養(yǎng)源，是重要生命物質(zhì)之一［18］.缺乏肌肉肌醇，小鼠可引起脫毛、大鼠可引起眼周?chē)惓５劝Y狀.肌醇屬于維生素B族中的一種，和膽堿一樣，在供給腦細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)上扮演重要的角色.有代謝脂肪、降低膽固醇、促進(jìn)健康毛發(fā)的生長(zhǎng)等作用［19］.研究表明肌醇是人類(lèi)細(xì)胞生長(zhǎng)和存活所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可促進(jìn)表皮細(xì)胞幾種組成成分的成熟，在胎兒和早期新生兒的生長(zhǎng)中發(fā)揮重要的作用［20］.進(jìn)一步研究顯示，肌醇補(bǔ)充劑可顯著降低有臨床意義的短期不良新生兒結(jié)局［21］.

基于肌醇重要營(yíng)養(yǎng)學(xué)及藥理學(xué)價(jià)值，未來(lái)可將不可食用、較容易被忽視和廢棄的防城港金花茶果肉作為肌醇提取分離的資源之一，由此可穩(wěn)定獲得質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的肌醇產(chǎn)品，為食品及制藥工業(yè)貢獻(xiàn)力量.

2.2 金花茶果核活性成分分析

如前所述，除果核形態(tài)學(xué)等相關(guān)研究外，目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)金花茶果核活性成分的相關(guān)研究.本工作在條件優(yōu)化情況下，共在防城港金花茶去表皮果核中檢出23種活性成分（圖4），其中可與Nist譜庫(kù)匹配識(shí)別的部分活性物質(zhì)包括：十五烷酸，硬脂酸烯丙酯，亞油酸甲酯，油酸甲酯，順式-十八碳烯酸，硬脂酸，棕櫚酸乙烯酯，油酰氯，反式角鯊烯，維生素E等活性成分.其中含量較高的物質(zhì)如：順式-十八碳烯酸（6.54%）、硬脂酸（3.59%）、十五烷酸（3.26%）等（見(jiàn)表2）.相比金花茶果肉，金花茶果核中營(yíng)養(yǎng)成分豐富，含有豐富的順式-十八碳烯酸，亞油酸甲酯，油酸甲酯，反式角鯊烯，天然維生素E等等.其中順式-十八碳烯酸為重要的不飽和脂肪酸，反式角鯊烯則具有提高體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等多種生理功能.除可用于食品工業(yè)外，也廣泛應(yīng)用于化妝品工業(yè).脂溶性的天然維生素E水解產(chǎn)物為生育酚，是最主要的抗氧化劑之一，也可用于肌萎縮、肌營(yíng)養(yǎng)不良、肝炎、肝硬化、冠心病的輔助治療.

圖3 防城港金花茶果肉GC-MS分析總離子圖

表1 采用GC-MS技術(shù)檢出的金花茶果肉部分活性成分

顯而易見(jiàn)，金花茶果核具有較為豐富的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)活性成分，食品加工價(jià)值高，未來(lái)可開(kāi)展相關(guān)深加工研究或產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用.

表2 采用GC-MS技術(shù)檢出的金花茶果核部分活性成分

3 結(jié)論

針對(duì)國(guó)內(nèi)外研究較少的金花茶果肉及果核，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)防城港金花茶果肉及果核活性進(jìn)行了分析.在優(yōu)化條件下，防城港金花茶果肉中共檢出22種活性成分，其可匹配識(shí)別的活性物質(zhì)包括：羥乙醛，羥基丙酮，糠醛，5-羥甲基糠醛，十五烷酸，肌醇等，其中營(yíng)養(yǎng)及藥用價(jià)值較高的活性物質(zhì)包括

肌醇等.防城港金花茶去表皮果核中共檢出23種活性成分，其中可匹配識(shí)別的活性物質(zhì)包括十五烷酸，亞油酸甲酯，油酸甲酯，順式-十八碳烯酸，反式角鯊烯，維生素E等，營(yíng)養(yǎng)類(lèi)活性成分較為豐富，食品加工價(jià)值高.本文相關(guān)數(shù)據(jù)可望為金花茶果肉及果核綜合利用提供一定參考.

但研究過(guò)程中，由于單一GC-MS檢測(cè)技術(shù)的局限性，仍有相當(dāng)比例的金花茶果肉或果核活性成分無(wú)法與Nist標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)匹配并給出確切的物質(zhì)信息，未來(lái)將聯(lián)合串聯(lián)質(zhì)譜，核磁共振碳、氫譜，紅外光譜、元素分析等更多檢測(cè)手段，確定其它金花茶果肉或果核中暫無(wú)法鑒別的其它活性成分信息.

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GC-MS Analysis for the Ingredients of the Flesh and Seeds of Camellia Nitidissima Chi

CHENG Jin-sheng1，LI Long1，ZHONG Ming2
（1.School of Ying-Dong Food Sciences and Engineering,Shaoguan University,Shaoguan 512005;2.School of Medicine,Jiaying University,Meizhou 514031,Guangdong,China）

As a common variety,Camellia nitidissima Chi is distributed widely in Fangcheng Port and neighboring regions.But until now,few reports focus on its fruit flesh and seeds analysis.This paper analyzes the active components of fruit flesh and seeds of Camellia nitidissima Chi by modified GC-MS technology.Investigations reveals that the fruit flesh contained about 22 kinds of active components,including glycollic aldehyde,hydroxyacetone，furaldehyde,5-hydroxymethyl-furfural，pentadecanoic acid，inositol etc.Meanwhile,the fruit seeds of Camellia nitidissima Chi contained about 23 kinds of active components,including pentadecanoic acid，methyl linoleate，cis-octadecenoic acid,squalene and vitamin E etc.,some of which were important nutritional components.These findings were helpful for potential utility of Camellia nitidissima Chi fruit flesh and seeds application.

Camellia nitidissima Chi；fruit flesh；seeds；active components；analysis

R917

A

1007-5348（2017）09-0001-05

2017-06-20

廣東省自然科學(xué)基金（2016A030307013）；廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)基金（A2015518）；2017韶關(guān)市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2017CX/001）.

程金生（1976-），男，江西鄱陽(yáng)人，韶關(guān)學(xué)院英東食品科學(xué)與工程學(xué)院副教授，博士；研究方向：食品及藥物分析、農(nóng)產(chǎn)品綜合開(kāi)發(fā)等.

（責(zé)任編輯：閆文龍）