何傳波，魏好程，熊何健,*，吳國宏，吳建勇

（1.集美大學食品與生物工程學院，福建 廈門 361021；2.香港理工大學應用生物與化學科技學系，香港 999077）

海參內臟酶解產(chǎn)物抗氧化和抗疲勞活性

何傳波1，魏好程1，熊何健1,*，吳國宏1，吳建勇2

（1.集美大學食品與生物工程學院，福建 廈門 361021；2.香港理工大學應用生物與化學科技學系，香港 999077）

以海參內臟為原料，通過中性蛋白酶水解，結合超濾和冷凍干燥工藝制備海參內臟酶解產(chǎn)物，利用高效液相色譜法測定酶解產(chǎn)物的分子質量。結果表明，海參內臟酶解產(chǎn)物中蛋白質含量為73.02%，以分子質量分布在187～998 D的小分子肽為主，該部分峰面積占總面積的77.9%。酶解產(chǎn)物具有一定的抗氧化活性，不同劑量（200、400、800 mg/（kg·d））的酶解產(chǎn)物均能降低小鼠肝臟的丙二醛含量，增加超氧化物歧化酶活力和還原型谷胱甘肽含量，且與模型對照組相比，差異均達到極顯著水平（P＜0.01），說明海參內臟酶解產(chǎn)物能有效恢復氧化損傷機體抗氧化指標。海參內臟酶解產(chǎn)物具有一定的抗疲勞功效，3 個劑量組均能極顯著延長小鼠的力竭游泳時間和提高運動小鼠的肝糖原含量，降低其血清乳酸和血清尿素氮含量（P＜0.01）。

海參內臟；酶解；抗氧化；抗疲勞

海參（sea cucumber，Holothuians）屬無脊椎動物棘皮動物門（Echinodermata），是其中海參綱（Holothuroidea）的總稱。由于其獨特的食療和藥用價值，海參在我國一向被視為珍貴食材和營養(yǎng)補品，位列“海八珍”之一。近年來，國內外學者在海參的生物活性物質及其藥理作用等方面取得了豐碩的研究成果，相繼從10多種海參中分離提取了多種功能性活性物質，包括海參多糖[1]、海參皂苷[2-3]、海參蛋白質及多肽[4]、脂類（包括脂肪酸[5]、神經(jīng)節(jié)苷脂[6-8]和腦苷脂[9]等）、凝集素、神經(jīng)肽和糖肽以及多種微量元素等，它們具有抗疲勞、抗氧化、降血脂、調節(jié)免疫、抗病毒、促細胞生長和抗血栓等諸多生理活性[10]。

由于需求的不斷增加，我國海參養(yǎng)殖和加工產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，而作為海參加工過程中的主要下腳料——海參內臟則很少得到利用。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，海參內臟含有與海參體壁相似的活性成分，有些成分的含量甚至高于體壁，如必需氨基酸中的賴氨酸。在國外，特別是日本、韓國，將海參腸卵譽為“海參花”，可生吃，可沏茶泡酒，也可將其鹽漬發(fā)酵成參花醬[11-12]，而在我國，海參內臟基本被丟棄，造成了很大的資源浪費和環(huán)境污染。

隨著生活節(jié)奏的加快和工作壓力的增大，人們在工作生活中的疲勞感日益加劇，各種抗疲勞功能的保健食品應運而生。由于海洋生物生存的環(huán)境與陸地生物完全不同，生長在這一特殊環(huán)境中的海洋生物，在其生長和代謝過程中，產(chǎn)生并積累了大量特殊化學結構并具有獨特生理活性和功能的物質，是開發(fā)新型海洋藥物和功能食品的重要資源。本實驗采用蛋白酶酶解海參內臟，通過動物實驗探討酶解產(chǎn)物的抗氧化、抗疲勞活性，為海參內臟的高值化綜合利用提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料、動物與試劑

新鮮海參內臟采自福建霞浦，清理后凍干備用；SPF級雄性昆明小鼠，體質量（18±2） g，合格證號：SCXK（滬）2012-0002，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司；小鼠維持飼料，A級，合格證號：SCXK（京）2014-0010，購自北京科澳協(xié)力飼料有限公司。

中性蛋白酶（134 000 U/g） 諾維信（中國）生物技術有限公司；丙二醛（malonaldehyde，MDA）試劑盒、總超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase，T-SOD）試劑盒、還原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）試劑盒、乳酸（lactic acid，LA）試劑盒、血清尿素氮（serum urea nitrogen，BUN）試劑盒、肝糖原試劑盒 南京建成生物工程研究所；細胞色素c、抑肽酶、生長抑制素（均為色譜純） 美國Sigma公司；氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione，GSSG）、GSH（均為色譜純） 美國Amresco公司。其余化學試劑均為國產(chǎn)分析純，購自國藥集團化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

UV-8000紫外-可見分光光度計 上海元析儀器有限公司；BS-124S電子天平、M35電子水分測定儀 德國賽多利斯股份有限公司；RE-52AA旋轉蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠；JDG-0.2T真空凍干機 蘭州科近真空凍干技術有限公司；TDL-5離心機 上海安亭科學儀器廠；3K3D高速冷凍離心機 德國Sigma公司；pH211臺式酸度測定儀 北京哈納科技有限公司；RNF0460-011多功能卷式膜小試設備 廈門福美科技有限公司；Ultimate3000高效液相色譜儀 美國Dionex公司；MSI微型漩渦振蕩器 廣州科技實驗室技術有限公司；SX2-10-13馬弗爐 上海石研電爐有限公司；SHA-B水浴恒溫振蕩器 金壇市國旺儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 酶解產(chǎn)物制備

取海參內臟粉300 g，按照12∶1（V/m）的液料比加入去離子水，中性蛋白酶用量2 000 U/g，pH 7，50 ℃酶解5 h后，95 ℃加熱15 min鈍化滅酶，酶解液過10 kD的超濾膜，收集濾液凍干，得到50.46 g海參內臟酶解產(chǎn)物。

1.3.2 酶解產(chǎn)物理化指標測定

多糖含量測定：苯酚硫酸法[13]；粗蛋白含量測定：參照GB 5009.5—2010《食品中蛋白質的測定》；水分含量測定：參照GB 5009.3—2010《食品中水分的測定》；脂肪含量測定：參照GB/T 5009.6—2003《食品中脂肪的測定》；灰分含量測定：參照GB 5009.4—2010《食品中灰分的測定》。

1.3.3 酶解產(chǎn)物分子質量測定

采用高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）法進行測定。色譜條件：凝膠柱為TSKgel G2000SWXL（7.8 mm×300 mm）；流動相為乙腈/超純水/三氟乙酸（體積比為45∶55∶0.1），流速為0.5 mL/min；檢測波長為220 nm；柱溫30 ℃。校正曲線所用的標準品為GSH（MW＝307 D）、GSSG（MW＝613 D）、生長抑制素（MW＝1636.7 D）、抑肽酶（MW＝6 512 D）、細胞色素c（MW＝12 384 D）。

1.3.4 體內抗氧化實驗

1.3.4.1 動物分組及給藥

SPF級雄性昆明小鼠50 只，每天光照12 h，動物房環(huán)境溫度20～25 ℃，相對濕度50%～60%，自由進食進水，每天更換飼料、飲用水和墊料，進行7 d適應性喂養(yǎng)。小鼠適應環(huán)境后，隨機分為5 組，每組10 只，分別為空白對照組、模型對照組、海參內臟酶解產(chǎn)物低、中、高劑量組（酶解產(chǎn)物200、400、800 mg/（kg·d））[14]，以體質量計，下同），空白對照組和模型對照組每天灌胃等體積的生理鹽水。

1.3.4.2 氧化損傷模型建立

連續(xù)灌胃30 d后，除空白對照組外，其他各組小鼠禁食16 h，然后1 次性灌胃給予50%乙醇12 mL/kg，6 h后脫頸椎處死取材。

1.3.4.3 肝臟生化指標測定

準確稱取各組小鼠肝臟0.5 g，加4.5 mL生理鹽水，冰水浴用組織碾磨器碾磨5～8 min，肝勻漿在4 ℃條件下3 000 r/min離心10 min，移取上清液，分別用MDA試劑盒、GSH試劑盒和T-SOD試劑盒測定肝勻漿上清液中的MDA和GSH含量及SOD活力，具體操作參照試劑盒說明書進行。

1.3.5 抗疲勞活性實驗

1.3.5.1 動物分組及給藥

SPF級雄性昆明小鼠40 只，7 d適應性喂養(yǎng)后，隨機分為4 組，每組10 只，分別為空白對照組、海參內臟酶解產(chǎn)物低、中、高劑量組（酶解產(chǎn)物200、400、800 mg/（kg·d））。24 d開始，每次灌胃30 min后，讓小鼠在游泳箱（水溫（25±1） ℃，水深不低于30 cm）中游泳訓練30 min。

1.3.5.2 小鼠力竭游泳時間測定

在實驗28 d給藥30 min后，將小鼠尾根部負重5%體質量的鉛絲或者回形針，用膠布粘繞，置于游泳箱中游泳，觀察小鼠游泳狀況，記錄小鼠游泳力竭時間，即小鼠自游泳開始至小鼠全身沉沒于水中8 s沒有抬頭的累積時間，每5 只小鼠一組，秒表計時。游泳結束后，將小鼠快速撈起，用吹風機吹干后放回原來籠中正常飼養(yǎng)。

1.3.5.3 血清中LA和BUN含量測定

小鼠末次灌胃30 min后，不負重游泳60 min，摘眼球取血，肝素抗凝，制備血清，分別用利用LA試劑盒和BUN試劑盒測定血清LA和BUN含量，具體操作參照試劑盒說明書進行。

1.3.5.4 肝糖原含量測定

小鼠末次灌胃后休息30 min，頸椎脫臼將其處死，準確稱取肝臟100 mg，加入5 g/100 mL的三氯乙酸2 mL，勻漿1 min后，3 000 r/min離心15 min將上清液轉移到另一個試管中，在沉淀內再加入5 g/100 mL的三氯乙酸2 mL，再次勻漿1 min后離心15 min，合并兩次的上清液，混勻，參照肝糖原試劑盒說明書測定肝糖原的含量。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 17.0軟件對各組數(shù)據(jù)進行單因素方差分析（One-way ANOVA），各項數(shù)據(jù)結果用 ±s表示。

2 結果與分析

2.1 酶解產(chǎn)物的理化指標

酶解產(chǎn)物中粗蛋白質含量最高，為73.02%，其次是灰分（13.09%），灰分主要來源于原料自身，水分和多糖含量分別為7.20%和5.96%。因此，酶解產(chǎn)物中主要成分為蛋白及多肽，其總得率為12.28%（m終產(chǎn)物/m原料）。

2.2 酶解產(chǎn)物的分子質量分布

為了研究酶解產(chǎn)物的分子質量分布，本實驗選用了5 種標準品，分別為GSH、GSSG、生長抑制素、抑肽酶和細胞色素c。標準品對應的洗脫時間分別為細胞色素c 11.63 min、抑肽酶13.57 min、生長抑制素15.69 min、GSSG 18.39 min、GSH 19.59 min。在相同的色譜條件下測定海參內臟酶解產(chǎn)物的分子質量，其分布從圖1可以看出，海參內臟酶解產(chǎn)物的分子質量主要分布在187～998 D，這部分的峰面積占總面積的77.9%。

圖1 海參內臟酶解產(chǎn)物的分子質量分布Fig. 1 Molecular mass distribution of sea cucumber visceral protein hydrolysate

2.3 體內抗氧化活性分析

2.3.1 內臟酶解產(chǎn)物對小鼠體質量的影響

表1 海參內臟酶解產(chǎn)物對小鼠體質量的影響Table 1 Effect of sea cucumber visceral protein hydrolysate on body weight of mice

小鼠體質量的變化反映了海參內臟酶解產(chǎn)物對小鼠健康狀況的影響，小鼠體質量增加或者減少過快，都不利于其健康。由表1可知，隨著灌胃時間的延長，小鼠體質量逐漸增加，且各組小鼠體質量每周增加幅度差異不顯著（P＞0.05），其中酶解產(chǎn)物各劑量組與空白照組相比均沒有達到顯著性差異（P＞0.05）。觀察小鼠行為特征，未發(fā)現(xiàn)異?；蛩劳霈F(xiàn)象，表明灌胃海參內臟酶解產(chǎn)物并不會影響小鼠正常生長，對小鼠無毒副作用。

2.3.2 酶解產(chǎn)物對小鼠肝臟MDA含量的影響

肝臟中的MDA是機體自由基攻擊肝細胞生物膜中的不飽和脂肪酸而產(chǎn)生的脂質過氧化物，MDA及其分解產(chǎn)物均能導致細胞損傷，其含量與細胞氧化損傷的程度呈正相關[15]。因此，測定MDA含量可以反映機體受自由基攻擊的嚴重程度。由表2可知，模型對照組的肝臟MDA含量為5.03 nmol/mg pro，比空白對照組增加了17.80%，差異極顯著（P＜0.01），說明造模過程對小鼠造成了顯著的氧化損傷，造模良好。酶解產(chǎn)物低、中、高劑量組的肝臟MDA含量分別比模型對照組降低了15.71%、35.79%和20.28%，且都與模型對照組具有極顯著性差異（P＜0.01）。說明海參內臟酶解產(chǎn)物具有良好的清除MDA的能力，能較好地保護肝臟細胞免受自由基攻擊，具有一定的抗氧化活性。

表2 海參內臟酶解產(chǎn)物對肝臟MDA含量的影響Table 2 Effect of sea cucumber visceral protein hydrolysate on MDA contents in mouse liver

2.3.3 酶解產(chǎn)物小鼠對肝臟SOD活力的影響

表3 海參內臟酶解產(chǎn)物對肝臟SOD活力的影響Table 3 Effect of sea cucumber visceral protein hydrolysate on SOD activity in mouse liver

SOD是體內重要的抗氧化酶，可以有效清除機體產(chǎn)生的氧自由基，保護細胞免受自由基攻擊[16-17]。因此，其在體內活力的高低可以反映機體抗氧化能力的強弱。從表3可以看出，與空白對照組相比，模型對照組小鼠肝臟內SOD活力極顯著降低（P＜0.01），說明利用乙醇氧化損傷造模成功。酶解產(chǎn)物的3 個劑量組SOD活力較模型對照組極顯著升高（P＜0.01），分別比模型對照組上升了18.46%、54.12%和38.36%。酶解產(chǎn)物中劑量組SOD活力最高，且與低、高劑量組存在顯著差異（P＜0.05），過量的海參內臟酶解產(chǎn)物會影響到SOD的活力，這可能是因為過量的海參內臟酶解產(chǎn)物表現(xiàn)出一定的副作用所致。

2.3.4 酶解產(chǎn)物對小鼠肝臟GSH含量的影響

GSH在生物體內作為一種還原劑，具有清除體內氧自由基、抗氧化、解毒等重要生理活性[18-20]。因此，測定體內GSH的含量，可以作為評價機體抗氧化能力大小的一個標準。由表4可知，與空白對照組相比，模型對照組肝臟GSH含量極顯著降低（P＜0.01），說明造模成功。酶解產(chǎn)物低、中劑量組小鼠肝臟中GSH含量與空白對照組相近，而高劑量組則比空白對照組提高了約50%。3 個劑量組的GSH含量均極顯著高于模型對照組（P＜0.01），分別提高了122.42%、128.48%和223.74%。說明海參內臟酶解產(chǎn)物具有提高肝臟中GSH含量的作用，并且能夠幫助氧化損傷機體GSH含量恢復正常水平。

表4 海參內臟酶解產(chǎn)物對小鼠肝臟GSH含量的影響Table 4 Effect of sea cucumber viscera protein hydrolysate on GSH contents in mouse liver

2.4 抗疲勞活性分析

2.4.1 酶解產(chǎn)物對小鼠力竭游泳時間的影響

表5 海參內臟酶解產(chǎn)物對小鼠力竭游泳時間的影響Table 5 Effect of sea cucumber visceral protein hydrolysate on exhaustive swimming time of mice

運動耐力的下降是疲勞最直觀、最主要的表現(xiàn)，在持續(xù)運動過程中，體內營養(yǎng)物質的消耗以及代謝廢物的積累都會加快疲勞的產(chǎn)生。本實驗用小鼠力竭游泳實驗測定小鼠抗疲勞運動指標，結果如表5所示，酶解產(chǎn)物中劑量組的小鼠平均力竭游泳時間最長，為81.28 min，相當于空白對照組的2.08 倍，低、高劑量組小鼠的平均力竭游泳時間分別相當于空白對照組的1.81和1.66 倍，3 個劑量組與空白對照組之間均有極顯著差異（P＜0.01），說明海參內臟酶解產(chǎn)物能夠顯著延長小鼠的力竭游泳時間，具有一定的抗疲勞效果。另外，3 個劑量組之間也存在差異，隨著酶解產(chǎn)物攝入量的增加，小鼠負重游泳時間先延長后縮短，說明海參內臟酶解產(chǎn)物與抗疲勞活性并不是呈線性關系，適宜的濃度具有最大化的抗疲勞活性，濃度太大可能會適得其反。

2.4.2 酶解產(chǎn)物對小鼠血清LA含量的影響

表6 海參內臟酶解產(chǎn)物對小鼠血清LA含量的影響Table 6 Effect of sea cucumber visceral protein hydrolysate on LA contents in serum of mice

“LA假說”認為，在劇烈運動的情況下，肌肉耗氧量增加導致機體缺氧，糖酵解反應加速，產(chǎn)生大量的LA，造成機體pH值下降，肌肉中LA/H+濃度是造成肌肉疲勞的主要原因[21]。由表6可知，空白對照組的LA含量最高，為16.17 mmol/L，3 個劑量組分別比空白對照組的LA含量降低了22.51%、23.19%和21.58%，且與空白對照組之間具有極顯著差異（P＜0.01），說明海參內臟酶解產(chǎn)物可以顯著降低運動小鼠血清中LA的含量，對緩解或者消除LA在小鼠體內的堆積，具有一定的抗疲勞效果。

2.4.3 酶解產(chǎn)物對小鼠BUN含量的影響

表7 海參內臟酶解產(chǎn)物對小鼠BUN含量的影響Table 7 Effect of sea cucumber visceral protein hydrolysate on BUN contents of mice

劇烈運動之后，蛋白質逐漸分解產(chǎn)生NH3和CO2，使肝臟中尿素氮水平明顯增加。BUN含量直接代表了血液中尿素氮的水平。體內BUN水平和運動耐受力呈顯著負相關[22]。由表7可知，空白對照組具有最高的BUN含量，為6.71 mmol/L，低、中、高3 個劑量組的BUN含量分別比空白對照組下降了12.67%、13.11%和17.14%，且都與空白對照組具有極顯著性差異（P＜0.01）。說明海參內臟酶解產(chǎn)物能夠顯著降低運動小鼠BUN的含量，具有一定的抗疲勞活性。這可能是海參內臟酶解產(chǎn)物在小鼠體內參與能量代謝，減緩小鼠體內蛋白質代謝造成的。

2.4.4 酶解產(chǎn)物對小鼠肝糖原含量的影響

表8 海參內臟酶解產(chǎn)物對小鼠肝糖原含量的影響Table 8 Effect of sea cucumber visceral protein hydrolysate on liver glycogen contents of mice

長時間緊張運動，會使肝糖原分解為葡萄糖，將其轉化為能量，維持血糖水平以滿足機體需要，因此，肝糖原含量高低是衡量機體運動耐受力的重要標志，也是測定疲勞是否發(fā)生的一項重要指標[23]。由表8可知，空白對照組肝糖原含量最低，為5.50 mg/g，3 個劑量組的肝糖原含量分別比空白對照組提高了30.73%、58.36%和26.91%，且都與空白對照組具有極顯著性差異（P＜0.01）。說明海參內臟酶解產(chǎn)物能夠增加肝糖原的儲備，提高機體的運動耐受能力，增強機體抗疲勞能力，具有很好的抗疲勞活性，這可能與內臟酶解產(chǎn)物能夠改善機體的能量代謝體系有關。

3 討 論

運動性疲勞是一個綜合的癥狀，不僅與機體內源性物質的消耗相關，還與神經(jīng)、內分泌以及免疫系統(tǒng)的平衡調節(jié)相關[24]。在近100 年的研究中，多種有關運動性疲勞的理論被提出[25]，其中自由基理論逐漸被大多數(shù)人接受。高強度運動后產(chǎn)生過多的自由基，會對機體內的大分子物質和組織器官產(chǎn)生損傷，并氧化產(chǎn)生脂質過氧化物等物質，危害人體健康[26-27]。有研究表明，外源性抗氧化物質能與內源性自由基相互作用，減少機體氧化損傷、增強機體抗氧化防御能力、減少疲勞產(chǎn)生[28-30]。本研究通過對海參內臟酶解產(chǎn)物體內抗氧化和抗疲勞活性的分析，試圖為兩種活性間關系的深入探究提供數(shù)據(jù)支持。

通過中性蛋白酶酶解，結合10 kD的超濾膜純化和冷凍干燥工藝得到了海參內臟酶解產(chǎn)物。產(chǎn)物中粗蛋白質含量最高，占比73.02%，總得率為12.28%。通過進一步HPLC檢測，酶解產(chǎn)物的分子質量主要分布在187～998 D，該部分峰面積占總面積的77.9%，說明酶解產(chǎn)物以小分子肽為主。

使用昆明種雄性小鼠連續(xù)灌胃給藥30 d，末次灌胃后利用乙醇氧化損傷的方法進行造模處理，通過小鼠體質量、肝臟SOD活力、MDA含量、GSH含量4 項指標對海參內臟酶解產(chǎn)物體內抗氧化活性進行了分析。結果表明，與空白對照組相比，各劑量組小鼠體質量間無明顯差異（P＞0.05），說明海參內臟酶解產(chǎn)物不會影響小鼠體質量的正常增長。與氧化損傷模型對照組相比，不同劑量的海參內臟酶解產(chǎn)物均能降低小鼠肝臟的MDA含量，增加其SOD活力和GSH含量，且均達到極顯著水平（P＜0.01）。說明海參內臟酶解產(chǎn)物能幫助氧化損傷機體抗氧化指標的有效恢復。根據(jù)保健食品抗氧化功能評價方法結果判定，動物實驗中脂質氧化產(chǎn)物、蛋白質氧化產(chǎn)物、抗氧化酶、抗氧化物質4 項指標中3 項陽性，可判定該受試樣品抗氧化功能動物實驗結果陽性，可知海參內臟酶解產(chǎn)物具有一定的抗氧化活性。

給小鼠灌胃不同劑量的海參內臟酶解產(chǎn)物30 d，檢測小鼠力竭游泳時間，血清LA含量、BUN含量以及肝糖原含量，對海參內臟酶解產(chǎn)物的抗疲勞活性進行了評價。結果表明，與空白對照組相比，海參內臟酶解產(chǎn)物的3 個劑量組均能極顯著延長小鼠的力竭游泳時間并提高運動小鼠的肝糖原含量，降低其血清LA和BUN含量（P＜0.01），說明海參內臟酶解產(chǎn)物能有效降低運動疲勞物質的產(chǎn)生，提高機體的運動耐受能力，減緩疲勞的發(fā)生。根據(jù)《保健食品功能學評價程序和檢驗方法》[31]，若1 項以上（含1 項）的運動實驗和2 項以上（含2 項）的生化指標為陽性，可判定該受試物具有抗疲勞作用，因此，可以判定海參內臟酶解產(chǎn)物具有一定的抗疲勞功效。另外，在上面兩項活性實驗中發(fā)現(xiàn)，不同劑量對各指標的影響無規(guī)律，劑量-效應關系不明顯，很多指標都是中劑量組具有最佳效果，這可能需要進一步通過更精確的劑量設置進行驗證。

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Antioxidant and Antifatigue Activities of Enzymatic Protein Hydrolysate from Sea Cucumber Viscera

HE Chuanbo1, WEI Haocheng1, XIONG Hejian1,*, WU Guohong1, WU Jianyong2

(1. College of Food and Biological Engineering, Jimei University, Xiamen 361021, China;2. Department of Applied Biology and Chemical Technology, The Hong Kong Polytechnic University, Hongkong 999077, China)

Protein hydrolysate from visceral waste proteins of sea cucumber was prepared by hydrolysis with neutral protease, followed by ultrafiltration and freeze drying. The protein content in the protein hydrolysate was 73.02%,which was composed mainly of small peptides. The results of high performance liquid chromatography analysis showed that the relative molecular weight of the hydrolysate was mainly distributed in the range of 187-998 D, accounting for 77.9% of the total peak area. In vitro antioxidant experiments showed that the protein hydrolysate had significant antioxidant activity. The hydrolysate at various dosages (200, 400 and 800 mg/(kg·d)) could significantly reduce the malonaldehyde content in mouse livers, and also increase the activity of superoxide dismutase, and glutathione contents(P 〈 0.01). The results illustrated that the hydrolysate could effectively restore antioxidant indexes. The experiments of antifatigue activity proved that the hydrolysate had high antifatigue activity. All three dosages of the hydrolysate could significantly increase the exhaustive swimming time and liver glycogen contents of mice, and reduce the contents of lactic acid and urea nitrogen in the serum of mice (P 〈 0.01).

sea cucumber viscera; enzymatic hydrolysis; antioxidant; antifatigue

10.7506/spkx1002-6630-201721032

TS254.9

A

1002-6630（2017）21-0201-06

何傳波, 魏好程, 熊何健, 等. 海參內臟酶解產(chǎn)物抗氧化和抗疲勞活性[J]. 食品科學, 2017, 38(21): 201-206.

10.7506/spkx1002-6630-201721032. http://www.spkx.net.cn

HE Chuanbo, WEI Haocheng, XIONG Hejian, et al. Antioxidant and antifatigue activities of enzymatic protein hydrolysate from sea cucumber viscera[J]. Food Science, 2017, 38(21): 201-206. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201721032. http://www.spkx.net.cn

2016-07-28

福建省自然科學基金項目（2015J01141）；廈門市科技計劃項目（3502Z20153014）；廈門市海洋漁業(yè)局（南方海洋中心）項目（14GZP007NF07）

何傳波（1978—），男，副教授，博士，研究方向為多糖物質及其綜合利用。E-mail：hcbcc@jmu.edu.cn

*通信作者：熊何?。?968—），男，研究員，碩士，研究方向為食品化學與營養(yǎng)學。E-mail：hjxiong@jmu.edu.cn