車洪智，付玉榮，馬瑩，晏紅，趙恩峰，李秀麗，姜淑芳，欒復(fù)興

(1.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院婦產(chǎn)科實(shí)驗(yàn)室，北京 100853；2.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院海南分院，海南 三亞 572013)

370例百歲老人的陰道微生態(tài)分析

車洪智1，付玉榮1，馬瑩1，晏紅1，趙恩峰1，李秀麗1，姜淑芳1，欒復(fù)興2

(1.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院婦產(chǎn)科實(shí)驗(yàn)室，北京 100853；2.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院海南分院，海南 三亞 572013)

目的初步探討百歲老人的陰道微生態(tài)狀況。方法2014年6月至2015年12月由解放軍總醫(yī)院海南分院婦產(chǎn)科收集海南地區(qū)370例百歲老人的陰道分泌物標(biāo)本，用Nugent評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)判斷分析陰道微生態(tài)狀況。結(jié)果百歲老人的微生態(tài)失調(diào)者占31.62%(117/370)：其中細(xì)菌性陰道炎114例，占微生態(tài)失調(diào)的97.44%(114/117)，假絲酵母菌感染占1.71%(2/117)，混合感染占0.85%(1/117)。結(jié)論百歲老人陰道微生態(tài)失調(diào)較為常見(jiàn)，這種微生態(tài)的改變與長(zhǎng)壽之間的關(guān)系值得進(jìn)一步探討。

陰道；微生態(tài)；百歲老人

在人體體表和與外界相通的腔道中寄居著一些對(duì)人體無(wú)損害作用的微生物，通稱為正常微生物群。微生物群不同種類之間，微生物群與宿主之間，微生物群、宿主和環(huán)境之間始終處于一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，形成一個(gè)相互依存、相互制約的系統(tǒng)。女性下生殖道為開(kāi)放性腔道，是一個(gè)復(fù)雜的微生態(tài)體系，是人體內(nèi)重要微生態(tài)區(qū)，主要由細(xì)菌、真菌、原蟲(chóng)和病毒組成，它們主要棲居于陰道的側(cè)壁黏膜皺褶中[1]。正常情況下陰道微生態(tài)系統(tǒng)是以乳酸桿菌為優(yōu)勢(shì)菌群，發(fā)揮著競(jìng)爭(zhēng)粘附、抑制病原體的生長(zhǎng)和免疫防御作用。當(dāng)乳酸桿菌減少或缺如，陰道加特納菌、動(dòng)彎桿菌、普雷沃菌、類桿菌等厭氧菌增加，甚至特異性病原微生物繁殖，就會(huì)引起陰道微生態(tài)系統(tǒng)失調(diào)，包括細(xì)菌性陰道病(bacterial vaginosis，BV)、外陰道假絲酵母菌陰道病(vulvovanal candidiasis，VVC)、滴蟲(chóng)性陰道炎等。解放軍總醫(yī)院海南分院從2014年6月開(kāi)始對(duì)海南地區(qū)的百歲老人進(jìn)行全面體檢，包括內(nèi)科、外科和婦科等全面常規(guī)查體，目的在于關(guān)愛(ài)百歲老人身體健康，初步探討百歲老人長(zhǎng)壽的秘訣。本文主要是對(duì)370例百歲老人的陰道微生態(tài)情況進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 解放軍總醫(yī)院海南分院2014年6月至2015年12月收集百歲以上老人陰道分泌物標(biāo)本370例，最年長(zhǎng)者115歲，最小者100歲，平均(102±2)歲，所有人身體健康，衛(wèi)生習(xí)慣基本一致，檢查前1周未使用陰道用藥，未做陰道沖洗。

1.2 方法

1.2.1 檢查與標(biāo)本采集 由經(jīng)驗(yàn)豐富的臨床婦產(chǎn)科醫(yī)師為百歲老人提供健康檢查。常規(guī)用窺器暴露宮頸。先用無(wú)菌棉拭子在陰道壁取分泌物，然后把分泌物涂在潔凈的載玻片上，自然干燥，用以微生態(tài)分析。

1.2.2 標(biāo)本處理與染色 把涂有分泌物的載玻片通過(guò)酒精火焰固定后進(jìn)行革蘭染色。主要操作步驟包括：①用堿性染料結(jié)晶紫染30 s水洗、甩干；②用媒染劑碘伏染30 s水洗、甩干；③用95%的酒精脫色劑脫色10～15 s水洗、甩干；④用復(fù)染液稀釋復(fù)紅進(jìn)行復(fù)染15 s水洗、甩干。等片子干燥后用于鏡檢分析。

1.2.3 鏡檢與微生態(tài)分析 在油鏡(100×100)下瀏覽全片進(jìn)行微生態(tài)分析：選定陰道分泌物中出現(xiàn)的4種主要菌群進(jìn)行形態(tài)觀察，并按照Nugent陰道分泌物革蘭氏染色評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[2]進(jìn)行評(píng)分。乳酸桿菌屬于大型革蘭陽(yáng)性桿菌、陰道加德納菌和普雷沃爾菌是小型革蘭陰性菌或球桿菌、動(dòng)彎桿菌呈革蘭陰性梭形彎曲桿菌。標(biāo)本總分值是4種形態(tài)的細(xì)菌分值之和，見(jiàn)表1。如果標(biāo)本分值達(dá)到7～10分，即判斷為BV[3]。同時(shí)在鏡下觀察到有無(wú)滴蟲(chóng)，假絲酵母菌感染。

表1 陰道分泌物Nugent評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié) 果

2.1 百歲老人陰道微生態(tài)狀況 陰道微生態(tài)失調(diào)者117例占31.62%(117/370)，其中百歲老人患有細(xì)菌性陰道病114例(114/117，97.44%)，患有假絲酵母菌陰道炎2例(2/117，1.71%)，細(xì)菌性陰道病和假絲酵母菌陰道炎混合感染1例(1/117，0.85%)。

2.2 百歲老人的陰道分泌物Nugent評(píng)分 有115例百歲老人陰道分泌物Nugent評(píng)分為7～10分，初步診斷有細(xì)菌性陰道病，占31.08%(115/370)。

3 討 論

當(dāng)陰道微生物的密集度、多樣性、優(yōu)勢(shì)菌、炎性反應(yīng)、pH和乳酸桿菌功能任何一項(xiàng)出現(xiàn)異常都可診斷為微生態(tài)失調(diào)。微生態(tài)失調(diào)時(shí)，最常見(jiàn)的感染性疾病是細(xì)菌性陰道病(BV)，其主要表現(xiàn)是乳酸桿菌減少或缺如，陰道加特納菌、動(dòng)彎桿菌、普雷沃菌、類桿菌等厭氧菌增加引起的黏膜炎癥綜合征。檢測(cè)陰道內(nèi)微生物代謝物診斷BV，是目前廣泛應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法，但這類方法難以反映陰道內(nèi)的菌群失調(diào)。Nugent革蘭氏染色評(píng)分是20世紀(jì)90年代由Robea Nugent首先提出[3]，是以菌群的半定量為依據(jù)，如實(shí)報(bào)告菌群分布，將陰道菌群客觀地分為正常態(tài)、過(guò)渡態(tài)和BV態(tài)，簡(jiǎn)便易行，結(jié)果可靠，被視為實(shí)驗(yàn)室診斷BV的金標(biāo)準(zhǔn)，可以作為臨床醫(yī)生診斷BV和療效觀察的客觀依據(jù)。近年來(lái)我國(guó)患有細(xì)菌性陰道病的女性有上升的趨勢(shì)，國(guó)內(nèi)感染率為15%～50%[4]，國(guó)外則高達(dá)33%～64%[5]。BV可能引起嚴(yán)重的并發(fā)癥：包括盆腔炎、早產(chǎn)、絨毛膜羊膜炎、宮外孕、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕、低體質(zhì)量新生兒[6-8]。有資料顯示BV并不會(huì)威脅生命,但它增加了患者對(duì)HIV感染敏感性[9]。陰道微生態(tài)失衡因不同人群而異，細(xì)菌陰道病常集中在31～50歲婦女中，在31～40歲組中最高，而在30歲以下及51歲以上人群中較低。假絲酵母菌陰道炎、滴蟲(chóng)性陰道病集中在31～50歲婦女中[10]。本研究結(jié)果顯示百歲老人細(xì)菌性陰道病發(fā)生率為31.08%，可能是因?yàn)槔先硕家呀^經(jīng)，卵巢功能衰退，雌激素水平下降，使得陰道上皮內(nèi)糖原含量減少，pH值上升，加之陰道黏膜發(fā)生萎縮、變薄，局部抵抗力降低等，陰道加特納菌、動(dòng)彎桿菌、普雷沃菌、類桿菌等厭氧菌增加所導(dǎo)致。假絲酵母菌感染較少，只有1例，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有滴蟲(chóng)感染。

關(guān)于細(xì)菌性陰道病的臨床處理，早在1998年美國(guó)疾病控制中心頒布了性傳播疾病治療指南[11]，對(duì)細(xì)菌性陰道病的治療慢慢規(guī)范化，分為系統(tǒng)的全身用藥和局部的陰道用藥。雖然細(xì)菌性陰道病1周治愈率是80%～90%，但在3個(gè)月內(nèi)有15%～30%的婦女會(huì)復(fù)發(fā)，在50%長(zhǎng)期隨訪的婦女中至少有1/4的婦女復(fù)發(fā)[12]。細(xì)菌性陰道病與淋病、滴蟲(chóng)、霉菌性陰道炎是不同的，局部炎癥不明顯，并且有10%～40%的患者沒(méi)有明顯的癥狀與體征[13]。本研究中，31.08%(115/370)百歲老人陰道分泌物Nugent評(píng)分為7～10分，認(rèn)為有細(xì)菌性陰道病，但他們臨床癥狀并不明顯。因此，認(rèn)為百歲老人的這種微生態(tài)的改變與長(zhǎng)壽之間的關(guān)系值得進(jìn)一步探討。

[1]廖秦平.女性陰道微生態(tài)圖譜[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2014:1-7．

[2]Spiegel CA,Amsel R,Holmes KK.Diagnosis of bacterial vaginosis by direct gram stain of vaginal fluid[J].J Clin Microbiol,1983,18(1):170-177．

[3]Nugent RP,Krohn MA,Hillier SL.Reliability of diagnosing bacterial vaginosis is improved by a standardized method of gram stain interpretation[J].J Clin Microbiol,1991,29(2):297-301．

[4]馬玉楠.細(xì)菌性陰道病及其診斷[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2000,23(5):303-304.

[5]Biswas MK.Bacterial vaginosis[J].Clin Obstet Gynecd,1993,36(1):166-17.

[6]Kimberlin DF,Andrews WW.Bacterial vaginosis:association with adverse pregnancy outcome[J].Semin Perinatol,1998,22(4):242-250.

[7]Pretorius C,Jagatt A,Lamont RF.The relationship between periodontal disease,bacterial vaginosis,and preterm birth[J].J Perinat Med,2007,35(2):93-99.

[8]Ledger MJ.Historical review of the treatment of bacterial vaginosis[J].Am J Obstet Gynecol,1993,169(2pt2):474-478.

[9]Cohn JA,Hashemi FB,Camarca M,et al.HIV-inducing factor in cervicovaginal secretions is associated with bacterial vaginosis in HIV-1-infected women[J].J Acquir Immune Defic Syndr,2005,39(3):340-346.

[10]鄧琦,李海倩,初正敏，等.云南滄源縣佤族婦女陰道微生態(tài)環(huán)境與年齡關(guān)系的分析[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2015,27(12):1461-1463.

[11]樊啟榮,董悅.1998年美國(guó)疾病控制中心性傳播疾病治療指南[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2000,35(4):253-255.

[12]Wilson J.Managing recurrent bacterial vaginosis[J].Sex Transm Infect,2004,80(1):8-11．

[13]樂(lè)杰.婦產(chǎn)科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:261-262.

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1003—6350（2017）20—3408—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.20.047

海南省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(編號(hào)：ZDYF2016135、ZDYF2017095)

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2017-03-09)