鐘劍鋒+陳喜蓉+歐濱+林芳能+陽(yáng)記萍+王東江

摘 要：以活化硒礦和亞硒酸鈉兩種硒源的不同濃度來種植紫芝，研究對(duì)紫芝生物富硒能力的影響。結(jié)果表明，添加相同濃度的活化硒礦水溶液和亞硒酸鈉溶液的情況下，紫芝的硒含量差別很大，尤其是硒溶液濃度同為15mg/kg的時(shí)候達(dá)到最大值，即以亞硒酸鈉溶液為硒源的紫芝硒的含量是以活化硒礦水溶液為硒源的485倍。由此可知，與活化硒礦相比， 以亞硒酸鈉為硒源的紫芝富硒效果強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：硒礦；亞硒酸鈉；紫芝；富硒

紫芝為靈芝屬真菌， 在我國(guó)有悠久的藥用歷史， 被列為名貴中草藥。現(xiàn)代科學(xué)研究表明紫芝含有上百種化合物，不僅含有豐富的多糖、蛋白質(zhì)、維生素及其他活性物質(zhì)（比如生物堿、多肽、氨基酸等等），還有較強(qiáng)的富硒特性[1-2]。硒是人體內(nèi)必不可缺少的微量元素之一，缺硒易導(dǎo)致肝癌、胃癌、腎癌等多種重大疾病，缺硒也會(huì)降低人體的抵抗力。目前市面上出售最多的是無機(jī)硒產(chǎn)品，有機(jī)硒更適合人體吸收和儲(chǔ)存 [4-5]。利用紫芝富硒性和耐硒性的特點(diǎn)，將紫芝作為生物載體進(jìn)行硒的生物轉(zhuǎn)化，發(fā)掘出有機(jī)形態(tài)、使得有機(jī)硒的開發(fā)成本得以降低。本論文以紫芝為載體進(jìn)行研究，主要以無機(jī)硒（亞硒酸鈉、活化的硒礦粉）為硒源對(duì)紫芝的富硒特性進(jìn)行對(duì)比和觀察，比較不同硒源對(duì)紫芝生物富硒特性效應(yīng)的影響。

一、材料與方法

1.材料

（1）試驗(yàn)材料。紫芝菌株由海南省林業(yè)科學(xué)研究所林副特產(chǎn)研究室篩選、保存；培養(yǎng)基選用：木屑78%、麩皮20%、白糖1%、石膏1%。

（2）試驗(yàn)試劑。實(shí)驗(yàn)用水為分析純水，GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水；氫氧化鈉、硝酸、鹽酸、高氯酸均為優(yōu)級(jí)純。消解液為硝酸與高氯酸按9：1 體積混合；鹽酸（6 mol/L）、鐵氰化鉀（100 g/L）、硼氫化鉀溶液（10g/L）；硒標(biāo)準(zhǔn)液、硒標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。

2.試驗(yàn)方法

（1）硒礦活化。將硒礦石粉碎過篩，細(xì)度為40～180目；加入硒礦粉質(zhì)量體積比3倍體積，濃度為 0.6mol/L的氨水，在室溫下攪拌24h后，將溶液加熱煮沸并煮至1/3體積，然后自然冷卻至室溫并補(bǔ)加硒礦粉質(zhì)量體積比2倍體積、濃度為0.6mol/L的氨水，再次煮沸并煮至1/3體積，冷卻至室溫后；第三次加硒礦粉質(zhì)量體積比2倍體積、濃度為0.6mol/L 的氨水并加熱煮沸至 1/3 體積待用。

在硒礦水溶液中配制成硒濃度為0 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg、20 mg/kg、30mg/kg，按每100kg干料添加硒溶液120kg，采用代料栽培模式，通過裝袋、消毒、接種后放置培養(yǎng)室，待菌絲長(zhǎng)滿菌包移至棚內(nèi)出芝。一個(gè)濃度接種50包（抽取樣本40包），3次重復(fù)。

（2）亞硒酸鈉溶液配制。將亞硒酸鈉配制成硒濃度分別0mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、30mg/kg，采用代料栽培模式，通過裝袋、消毒、接種后放置培養(yǎng)室，待菌絲長(zhǎng)滿菌包移至大棚內(nèi)出芝。一個(gè)濃度接種50包（抽取樣本40包），3次重復(fù)。

（3） 測(cè)定內(nèi)容和方法。pH用WS型袖珍數(shù)顯pH計(jì)測(cè)量、硒含量使用AFS-230E雙道原子熒光光度計(jì)測(cè)定。

（4）試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法。Office 2007軟件作圖進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

二、結(jié)果與分析

1.兩種硒源培養(yǎng)基質(zhì)的pH

在基質(zhì)中添加兩種不同濃度的硒源，基質(zhì)中的pH值始終保持在5.5～6.0之間，這個(gè)范圍內(nèi)波動(dòng)均符合靈芝子實(shí)體最適生長(zhǎng)pH值5.0～6.0。

2.兩種硒源對(duì)紫芝富硒效果的影響

（1）活化硒礦水溶液不同添加量對(duì)紫芝子實(shí)體富硒效果的影響。添加活化的硒礦水溶液，使培養(yǎng)基中硒濃度分別為5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、30mg/kg。試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著活化硒礦水溶液濃度的增加，子實(shí)體對(duì)硒的吸收量不斷增加，在活化硒礦水溶液濃度達(dá)到15mg/kg時(shí)，硒含量達(dá)到最大值為0.243ug/kg，但當(dāng)活化硒礦水溶液濃度超過15mg/kg，子實(shí)體對(duì)硒的吸收量反而減少。

（2）亞硒酸鈉不同添加量對(duì)紫芝子實(shí)體富硒效果的影響。添加亞硒酸鈉溶液，使培養(yǎng)基中硒濃度分別為5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、30mg/kg。試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著活化硒礦水溶液濃度的增加，子實(shí)體對(duì)硒的吸收量不斷的增加，在亞硒酸溶液濃度達(dá)到15mg/kg時(shí)，硒含量達(dá)到最大值為118ug/kg，但當(dāng)活化硒礦水溶液濃度超過15mg/kg，子實(shí)體對(duì)硒的吸收量反而減少。

（3）兩種硒源對(duì)紫芝富硒效果影響的比較。試驗(yàn)結(jié)果表明，同濃度的兩種硒源對(duì)紫芝富硒能力的影響不一致。當(dāng)活化硒礦水溶液濃度和亞硒酸鈉溶液濃度一致的時(shí)候，亞硒酸鈉溶液對(duì)紫芝富硒能力的影響更大。活化硒礦水溶液對(duì)紫芝的富硒率在3.2%～6.5%；亞硒酸溶液對(duì)紫芝的富硒吸收率高達(dá)71%～86%。所以亞硒酸鈉對(duì)紫芝的吸收率更好，尤其是亞硒酸鈉濃度達(dá)到15mg/kg時(shí)，紫芝富硒能力最強(qiáng)。

三、討論與結(jié)論

利用活化的硒礦和亞硒酸鈉作為硒源，兩種硒源對(duì)于紫芝富硒能力的影響都是在濃度低于15mg/kg時(shí)，硒含量隨濃度的增加而增加，濃度為15mg/kg時(shí)，硒含量達(dá)到最大值；濃度高于15mg/kg時(shí)，硒含量下降，下降的原因可能是因?yàn)檫^高的SeO42-和SeO32-硒離子進(jìn)入細(xì)胞，引起代謝紊亂，酶促反應(yīng)失調(diào)，出現(xiàn)高硒的毒害作用。亞硒酸鈉溶液為硒源培育出的紫芝硒含量高于同濃度的活化硒礦水溶液。在硒溶液濃度為15mg/kg時(shí)，添加亞硒酸鈉溶液為硒源的紫芝硒含量是以活化硒礦水溶液為硒源的485倍，紫芝中硒含量為118μg/g，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定食品中最佳硒含量95～125μg/g。最終結(jié)論是使用15mg/kg濃度的亞硒酸鈉溶液對(duì)紫芝富硒以及生長(zhǎng)影響是最好的。

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