袁德雨+李雅心

摘 要：研制新型病毒性疫苗是當前我國臨床醫(yī)學(xué)中一項十分重要的工作之一，人類二倍體細胞是控制疫苗生產(chǎn)質(zhì)量、促進項目研發(fā)的首要選擇。本文對二倍體細胞病毒感染生物學(xué)以及酶活性動力學(xué)特點進行了詳細的闡述與分析，希望可以起到參考作用。

關(guān)鍵詞：病毒感染生物學(xué)反應(yīng)； 酶活性動力學(xué)； 二倍體細胞

二倍體細胞指的是由原始培養(yǎng)物所培養(yǎng)生成的細胞群。本次實驗研究所選取的二倍體細胞是人胚成纖維細胞，為有效制備病毒抗原，合理選擇人二倍體細胞對于相關(guān)的實驗研究有著十分重要的意義。

一、人二倍體細胞株概述

隨著醫(yī)學(xué)病毒學(xué)以及細胞遺傳學(xué)的不斷發(fā)展，二倍體細胞的培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)取得了一定的突破。當前在國際范圍內(nèi)，遺傳學(xué)、細胞學(xué)、病毒學(xué)等領(lǐng)域的研究成果已經(jīng)廣泛應(yīng)用于二倍體細胞的制備以及疫苗的生產(chǎn)中。二倍體中存在比較明顯的正常細胞特征，相關(guān)的鑒定標化工作能夠落實得比較全面。能夠有效防止出現(xiàn)原代細胞污染問題。經(jīng)臨床醫(yī)學(xué)證實，二倍體細胞基質(zhì)，能夠廣泛應(yīng)用于產(chǎn)，疫苗以及病毒學(xué)研究中。部分國家已經(jīng)充分通過人二倍體細胞株來制造腺病毒IV型活疫苗、麻疹疫苗以及脊髓灰質(zhì)炎疫苗。在絕大部分國家，人二倍體細胞開始應(yīng)用于腮腺炎、森林腦、痘苗、風(fēng)疹以及鼻病毒疫苗的研制工作中。經(jīng)長期的實驗研究發(fā)現(xiàn)，通過人二倍體細胞所培養(yǎng)出現(xiàn)的疫苗是可以適用于人類的。

二、二倍體細胞的酶活性動力學(xué)

細胞特定酶學(xué)反應(yīng)特征在二倍體細胞代謝鑒定工作中十分重要，能夠?qū)⒓毎纳飳W(xué)性狀與遺傳學(xué)基礎(chǔ)充分反映出來。然而，在病毒疫苗生產(chǎn)規(guī)?；约凹毎笇W(xué)反應(yīng)研究兩個方面仍然存在著一定的不適應(yīng)性。本次實驗研究從二倍體細胞酶學(xué)檢測的角度出發(fā)，對琥珀酸脫氫酶動力學(xué)狀態(tài)、超氧化物歧化酶、乳酸脫氫酶等方面的指標進行分析與檢測。乳酸脫氫作為一個種關(guān)鍵酶能夠在丙酮酸與乳酸之間互相轉(zhuǎn)化。LDH也是一種能夠促進細胞能量代謝的酶物質(zhì)。超氧化物歧化酶能夠以超氧自由基為原料，通過歧化反應(yīng)生成氧氣和過氧化氫，將人體內(nèi)多余的自由基清除干凈，從超氧化物歧化酶自身的活性可以判斷出人體自由基的清除能力。琥珀酸脫氫酶是促進有氧呼吸與三羧酸循環(huán)的重要成分，是促進電子傳遞以及連接氧化磷酸化的重要物質(zhì)之一，能夠為原核細胞呼吸以及真核細胞線粒體的氧化提供電子，是線粒體內(nèi)部的重要組成部分之一。以上三種酶由于細胞代次不同、細胞種類不同而發(fā)生變化，能夠?qū)⒓毎L狀態(tài)以及遺傳穩(wěn)定性等方面的情況有效反映出來，是控制疫苗研制質(zhì)量的基礎(chǔ)性物質(zhì)。

三、二倍體細胞的病毒感染生物學(xué)反應(yīng)特征

KMB17細胞屬于纖維細胞的一種，能夠?qū)ι掀そM織所受到的外來生物侵擾起到良好的保護作用，其基本功能與天然免疫系統(tǒng)相類似。本次實驗研究重點關(guān)注了二倍體細胞在兩種不同病毒感染下mRNA的表達方式，重點研究KMB17細胞，以Hela細胞和Vero細胞作為對照細胞進行相關(guān)性研究。干擾素具有比較強的調(diào)節(jié)作用與抗病毒作用。在細胞感染病毒的情況下，細胞因子是一道十分重要的防線。干擾素對多種DNA病毒與RNA病毒均有一定的抑制作用。干擾素?zé)o法直接抑制病毒或殺來病毒，同時也能夠增強T淋巴細胞、巨噬細胞、以及自然殺傷細胞的活力，進而起到抗病毒的效果。

四、討論

KMB17細胞與N0細胞中的酶活力變化反映了二倍體細胞一定的生物學(xué)特性。Hela和Vero細胞酶活力變化趨勢基本一致，變化不大。KMB17細胞與N0細胞在細胞代次比較低的情況下，細胞的超氧化物歧化酶的酶活力較高，乳酸脫氨酶的酶活力較低，當細胞超過一定代次后，細胞的乳酸脫氨酶的酶活力升高，超氧化物歧化酶的酶活力降低， 琥珀酸脫氫酶的酶活力升高，這些酶活指標的變化反映了人二倍體細胞特定的生物學(xué)特性。當Vero細胞和Hela代次增加時，乳酸脫氨酶、超氧化物歧化酶、琥珀酸脫氫酶的酶活力變化沒有明顯的規(guī)律性，酶活力基本維持在一個水平，這反映了化Vero細胞和Hela細胞的生物學(xué)特性，且其不同于人二倍體細胞。

五、結(jié)語

以二倍體為基礎(chǔ)材料所研制的病毒性疫苗，通常包含滅活疫苗以及減毒疫苗兩種，同時也包含一部分細胞基質(zhì)?；L期的臨床醫(yī)學(xué)證實，這種病毒性疫苗在應(yīng)用中有著獨特的優(yōu)勢，其應(yīng)用范圍將會越來越廣泛。為了提供二倍體細胞株的可靠性，還需要經(jīng)歷一個生物學(xué)指標鑒定過程，使病毒性疫苗所研究工作具有更加充分的科學(xué)性與合理性。本次實驗研究選用人胚肺二倍體細胞研制疫苗，所培育出來的細胞不存在致癌性，相比于其它細胞來說有著比較強的安全性。在生物制藥領(lǐng)域不斷發(fā)展的過程，已經(jīng)實現(xiàn)了細胞的大量繁殖，規(guī)模化生產(chǎn)也逐漸成為可能。然而，二倍體細胞對于許多病毒均有著比較強的敏感性，需要進一步加強實驗與研究。endprint