熊偉，吳磊，饒玉喜，史新安，李雄輝

（1.江西省科學(xué)院應(yīng)用化學(xué)研究所，江西南昌 330096；2.江西省喜果綠化有限公司，江西上饒 335500）

紅豆杉復(fù)方健康顆粒皮膚過敏性實(shí)驗(yàn)研究

熊偉1，吳磊1，饒玉喜2，史新安2，李雄輝1

（1.江西省科學(xué)院應(yīng)用化學(xué)研究所，江西南昌 330096；2.江西省喜果綠化有限公司，江西上饒 335500）

目的：觀察紅豆杉復(fù)方健康顆粒對豚鼠皮膚的過敏性，以評價(jià)其在臨床上使用的安全性。方法：豚鼠隨機(jī)分為3組，第一組為空白對照組，第二組為紅豆杉復(fù)方健康顆粒組，第三組為2,4-二硝基氯苯組，分別進(jìn)行致敏接觸、激發(fā)接觸，對出現(xiàn)過敏狀況評分。結(jié)果：豚鼠皮膚無紅斑和水腫等現(xiàn)象。結(jié)論：紅豆杉復(fù)方健康顆粒對皮膚無過敏反應(yīng)，可放心使用。

紅豆杉；復(fù)方健康顆粒；皮膚；過敏性

紅豆杉具有抗氧化、改善睡眠、降血壓、保護(hù)心血管、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功效[1-4]。項(xiàng)目組以紅豆杉為主料，輔以浮小麥、葛根、首烏藤、銀杏葉、茯神、薰衣草等中藥進(jìn)行配伍，制備了紅豆杉復(fù)方健康顆粒[5]，以期在臨床上具有一定抗氧化、改善睡眠等功效。本實(shí)驗(yàn)通過對紅豆杉復(fù)方健康顆粒的皮膚過敏性進(jìn)行研究，觀察紅豆杉復(fù)方健康顆粒對機(jī)體免疫系統(tǒng)在皮膚上的反應(yīng)，為其在臨床上的安全運(yùn)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

豚鼠，250～300g，白色，雌雄各半，由上海生汪實(shí)驗(yàn)動物養(yǎng)殖有限公司提供，每組10只，共30只。普通級動物房，溫度25～28℃，飲用自來水。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

紅豆杉復(fù)方健康顆粒（由江西省喜果綠化有限公司提供）；致敏試驗(yàn)對照藥：2,4-二硝基氯苯（中國醫(yī)藥公司北京分公司）；乙醇（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠）。

1.3 過敏性實(shí)驗(yàn)方法[6-7]

將紅豆杉復(fù)方健康顆粒碾碎，用蒸餾水稀釋成10%濃度，供實(shí)驗(yàn)用；采用2,4-二硝基氯苯作為陽性對照品，以95%乙醇配成1%的致敏濃度和0.1%的激發(fā)濃度。

采用完整皮膚，通過皮膚給藥途徑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)前24h將豚鼠背部兩側(cè)毛剃掉，脫毛面積約為3cm×3cm。

實(shí)驗(yàn)共設(shè)3組，分別為空白對照組（95%乙醇）、實(shí)驗(yàn)組（紅豆杉復(fù)方健康顆粒10%稀釋液）陽性對照組（2，4-二硝基氯苯），并分別進(jìn)行致敏接觸和激發(fā)接觸，致敏次數(shù)為3次（每周1次），激發(fā)次數(shù)為2次（最后一次致敏后2周）。

1.3.1 致敏接觸

取紅豆杉復(fù)方健康顆粒10%稀釋液0.2mL涂在豚鼠左側(cè)脫毛區(qū)，用一層油紙及二層紗布覆蓋，再以醫(yī)用膠布封閉、固定，每只豚鼠分籠飼養(yǎng)6h，6h后去掉紗布，第7天和第14天，以同樣的方法各重復(fù)一次，共計(jì)3次?？瞻讓φ战M和陽性對照組方法同上。

1.3.2 激發(fā)接觸

于末次給紅豆杉復(fù)方健康顆粒10%稀釋液致敏后14天，將0.2mL紅豆杉復(fù)方健康顆粒10%稀釋液涂在豚鼠右側(cè)脫毛區(qū)，空白對照組用0.2mL 4%乙醇，陽性對照組用0.1% 2,4-二硝基氯苯0.2mL，6h后去掉受試物，即可觀察，然后于24、48、72h再次觀察皮膚過敏反應(yīng)情況，并記錄各時(shí)間過敏反應(yīng)分值。

1.3.3 皮膚過敏評分和評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

皮膚過敏反應(yīng)程度評分標(biāo)準(zhǔn)見表1，皮膚過敏反應(yīng)性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見表2。皮膚過敏性反應(yīng)評分按照過敏反應(yīng)紅斑、水腫分值計(jì)算平均分值，判斷皮膚過敏程度。

表1 皮膚過敏反應(yīng)程度評分標(biāo)準(zhǔn)

表2 皮膚過敏反應(yīng)性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果與討論

各組豚鼠過敏性反應(yīng)結(jié)果見表3及表4。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，紅豆杉復(fù)方健康顆粒組及空白對照組豚鼠在第28天接觸紅豆杉復(fù)方健康顆粒組后皮膚無紅斑、無水腫，說明未出現(xiàn)皮膚過敏反應(yīng)；而陽性對照組豚鼠接觸2,4-二硝基氯苯后均出現(xiàn)了不同程度的紅斑和水腫，有較為明顯的皮膚過敏反應(yīng)。

表3 紅豆杉復(fù)方健康顆粒接觸不同時(shí)間紅斑水腫形成總分

表4 紅豆杉復(fù)方健康顆粒接觸不同時(shí)間致敏發(fā)生率（%）

3 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，紅豆杉復(fù)方健康顆粒皮膚給藥對豚鼠皮膚重復(fù)接觸不會引起過敏反應(yīng)，進(jìn)一步驗(yàn)證了紅豆杉復(fù)方健康顆粒外用安全可靠。

[1]王紅萍,段紅梅.紅豆杉的價(jià)值與開發(fā)利用研究進(jìn)展[J].北方園藝,2013(12):192-195.

[2]李英,呂曄,林麗萍.紅豆杉中抗氧化活性成分的研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué),2013,25(9):13-16.

[3]吳彥,劉慶,胡科,等.我國紅豆杉資源現(xiàn)狀和紫杉醇產(chǎn)業(yè)化對策[J].長江流域資源與環(huán)境,2002,11(6):515-520.

[4]李存芳,劉勇,董玫,等.南方紅豆杉化學(xué)成分的研究進(jìn)展[J].中草藥,2007,38(8):1121-1131.

[5]熊偉,付建平,饒玉喜,史新安,李雄輝.均勻設(shè)計(jì)法在紅豆杉保健枕配方優(yōu)化中的應(yīng)用[J].生物化工,2016,2(3):6-9.

[6]國家食品藥品監(jiān)督管理局.中藥、天然藥物免疫毒性(過敏性、光變態(tài)反應(yīng))研究技術(shù)指導(dǎo)原則[M].2005.

[7]杜慶山.腫痛消洗劑皮膚刺激性和過敏性實(shí)驗(yàn)研究[J].山東中醫(yī)雜志,2012,31(8):596-597.

Study on Skin Hypersensitivity of Taxus chinensis Compound Healthy Particles

Xiong Wei1,Wu Lei1,Rao Yu-xi2,Shi Xin-an2,Li Xiong-hui1
(1.Institute of Applied Chemistry，Jiangxi Academy of Sciences，Jiangxi Nanchang 330096;2.Jiangxi XiGuo greening limited company，Jiangxi Shangrao 335500)

Objective:To observe the skin allergy of guinea pig caused by Taxus chinensis compound healthy particles,and to evaluate the safety in clinical use .Method:Guinea pigs were randomly divided into 3 groups,the first group was blank ,the second group was Taxus chinensis compound healthy particles and the last group was 2,4-dinitrochlorobenzene,the skin allergy was evaluated by the sensitized and stimulate contact.Results:The experiment group did not show any complications such as erythema and edema in the allergy test.Conclusion:Taxus chinensis compound healthy particles has no skin or systemic allergic reactions.

Taxus chinensis;Compound healthy particles;Skin;Hypersensitivity

R285.5

A

2096-0387（2017）05-0026-02

國家自然科學(xué)基金（31260400）；江西省科學(xué)院杰出青年學(xué)者項(xiàng)目（2017-JCQN-02）；江西省科學(xué)院產(chǎn)學(xué)研合作項(xiàng)目（2014-CXY-04）。

熊偉（1982—），男，江西南昌人，碩士，副研究員，研究方向：天然產(chǎn)物提取分離與分子修飾。