黃 妍， 李小莉， 張勛力， 張迎慶

(1 湖北工業(yè)大學(xué)生物工程與食品學(xué)院，湖北武漢430068；2 北京納百恩食品有限公司，北京102200)

納豆銀杏紫蘇軟膠囊輔助降血脂人體試食試驗(yàn)研究

黃 妍1， 李小莉1， 張勛力2， 張迎慶1

(1 湖北工業(yè)大學(xué)生物工程與食品學(xué)院，湖北武漢430068；2 北京納百恩食品有限公司，北京102200)

目的：考察人體服用含納豆激酶、銀杏葉提取物、紫蘇籽油復(fù)配物軟膠囊的安全性以及輔助降血脂的功效。方法：選擇114例符合本試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的高血脂受試者進(jìn)行試食試驗(yàn)(分別為：對照組59例，男29例，女30例；試食組55例，男29例，女26例)。試食組連續(xù)服用納百恩牌輔助降血脂軟膠囊45 d后，采用自身對照及組間對照進(jìn)行評價(jià)。結(jié)果：試食組45 d后，血清總膽固醇(TC)，血清甘油三酯(TG)分別平均下降10.39%和16.03%，顯著大于對照組的0.30%和0.32%，差異均有顯著性(P< 0.01)；試食組血清總膽固醇(TC)及甘油三酯(TG)試驗(yàn)前后的自身比較結(jié)果，以及試驗(yàn)后與對照組的組間比較結(jié)果均具有顯著性差異(P< 0.01)，而對照組試驗(yàn)前后自身TC、TG值差異均無顯著性(P> 0.05)；試驗(yàn)后試食組血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量顯著高于對照組(P< 0.05)；試食組總有效率為47.31%，顯著高于對照組有效率(P< 0.01)。試食者各項(xiàng)指標(biāo)包括血常規(guī)、血液生化指標(biāo)、肝腎功能及其他臨床檢查均未顯示異常。結(jié)論：受試樣品具有輔助降血脂功能，并對受試人群健康無損害作用。

納豆激酶； 銀杏提取物； 紫蘇籽油； 人體試食試驗(yàn)； 輔助降血脂

納豆中活性物質(zhì)納豆激酶的溶栓和降脂功效已得到人們的普遍重視[1-3]，銀杏葉提取物中銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯等[4-6]以及紫蘇籽油中富含的亞麻酸[7-9]均是重要的輔助降血脂功能因子。本文對納豆凍干粉、銀杏葉提取物和紫蘇籽油復(fù)配軟膠囊在前期輔助降血脂動物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上[10]進(jìn)行了人體試食試驗(yàn)研究[11-13]，以考察人體服用含納豆激酶、銀杏葉提取物、紫蘇籽油復(fù)配物軟膠囊的安全性以及輔助降血脂的功效。

1 材料與方法

1.1樣品及安慰劑

納百恩牌納豆銀杏葉紫蘇籽油軟膠囊，北京納百恩食品有限公司提供(以納豆凍干粉、銀杏葉提取物、紫蘇籽油、蜂蠟為主要原料，每100 g含總黃酮1.5 g，α-亞麻酸40.3 g)，規(guī)格為0.5 g/粒，批號：20101011。室溫保存。該產(chǎn)品已經(jīng)過動物毒理學(xué)安全性評價(jià)和衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)，并經(jīng)動物實(shí)驗(yàn)證明具有輔助降血脂的功能[10]。安慰劑的規(guī)格及外觀與功能樣品相同。

1.2受試對象

本試驗(yàn)方案經(jīng)過廣西壯族自治區(qū)疾病預(yù)防中心保健食品人體試食試驗(yàn)倫理委員會批準(zhǔn)，并在廣西壯族自治區(qū)疾病預(yù)防中心完成。受試者納入標(biāo)準(zhǔn)：受試者均簽署過書面知情同意書，為單純血脂異常的人群，正常飲食，在半年內(nèi)進(jìn)行2次采血，2次血清總膽固醇(TC)含量均≥ 5.2 mmol/L，或兩次血清甘油三酯(TG)含量≥ 1.65 mmol/L[14]。

受試者排除標(biāo)準(zhǔn)：1)年齡小于18歲或超過65歲的；2)哺乳期或是妊娠期的婦女，以及對保健食品過敏的人群：3)患有嚴(yán)重疾病者，如患有精神病以及心、肝、腎和造血系統(tǒng)等疾病的：4)在近期內(nèi)服用過可能會對結(jié)果判斷產(chǎn)生影響的與受試功能有關(guān)的物品的；5)不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，沒有按時(shí)按量服用受試樣品，不能判定受試樣品的功效或資料不全，影響到受試樣品的功效或安全性判斷者[15]。

1.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組方法

試驗(yàn)采用組間和自身兩種對照設(shè)計(jì)。受試者根據(jù)血脂水平被隨機(jī)地分為對照組和試食組，盡量減少性別、年齡、飲食等因素的差距，縮小對試驗(yàn)結(jié)果的影響，并通過均衡性檢驗(yàn)對組間的可比性予以保證。試驗(yàn)初始采用每組60例，最終統(tǒng)計(jì)的有效人數(shù)每組不少于50例。

1.4劑量及試食時(shí)間

試食組每人每日服食2 次，每次2 粒；對照組采用安慰劑，服用方法與樣品試食組的相同。均為45 d連續(xù)服食。

1.5觀察指標(biāo)

1.5.1安全性指標(biāo)觀察一般情況，包括受試者的睡眠、飲食、精神狀況、大小便等，這些現(xiàn)象由受試者自身每天寫入記錄。試食試驗(yàn)前進(jìn)行一次胸透、心電圖、腹部B超檢查。在試食試驗(yàn)前和試食試驗(yàn)結(jié)束后分別進(jìn)行一次血常規(guī)檢查、血壓和肝、腎功能檢查。

1.5.2功效性指標(biāo)功效判定采用如下標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)血清甘油三酯降低> 15%，總膽固醇降低> 10%；高密度脂蛋白膽固醇上升> 0.104 mmol/L，判定為有效；未達(dá)到此有效標(biāo)準(zhǔn)者，則判定無效。同時(shí)在測定中觀察血清甘油三酯有效率、高密度脂蛋白膽固醇有效率、血清總膽固醇有效率及總有效率以進(jìn)一步判定受試樣品的功效[16]。

1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法

采用配對t檢驗(yàn)進(jìn)行自身對照資料比較，并采用成組t檢驗(yàn)進(jìn)行兩組均數(shù)比較，兩組均數(shù)比較需采用方差齊性檢驗(yàn)，對于非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)，需采用適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，使其滿足正態(tài)方差齊以后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)來進(jìn)行t檢驗(yàn)；如果轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)依然無法滿足正態(tài)方差齊的要求，則改用t'檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；如果方差齊，但是變異系數(shù)太大(例如CV> 50%)的應(yīng)采用秩和檢驗(yàn)。采用X2檢驗(yàn)對有效率及總有效率進(jìn)行檢驗(yàn)。四格表總例數(shù)如果小于40，或總例數(shù)等于或大于40，但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，即應(yīng)改用確切概率法。

1.7結(jié)果判定方法

如果血清總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)兩項(xiàng)指標(biāo)均為陽性，而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)指標(biāo)不顯著低于對照組，則可判定該受試品具有輔助降血脂功能作用。[17]

2 結(jié)果

2.1試食前受試者一般情況

試食試驗(yàn)開始時(shí)，將符合受試標(biāo)準(zhǔn)的志愿者分為兩組，每組各60人。試食前試食組與對照組人群的一般情況(如年齡大小、精神狀態(tài)、睡眠狀況和飲食情況等)大體一致，兩組試食志愿者的檢查結(jié)果顯示，包括腹部B超、心電圖及胸部透視等均無明顯異常，并且血清總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)均無顯著性差異(P> 0.05)。試驗(yàn)過程失訪人數(shù)為6例，最終有效統(tǒng)計(jì)人數(shù)為試食組55 例，對照組59 例，脫失率為5.0%。兩組人群試驗(yàn)前基本情況見表1。

表1 試食前兩組人群血清TC、TG、HDL-C含量比較

2.2樣品對高血脂受試者功效性指標(biāo)的影響

試食后，血清TC含量檢測結(jié)果顯示：試食組和對照組受試者分別降低10.39%和0.30%，不僅試食組受試者的血清TC含量試食前后有顯著差異(P< 0.01)，而且試食組與對照組受試者的血清TC含量比較結(jié)果也有顯著性差異(P< 0.01)；同樣，血清TG含量檢測結(jié)果顯示：試食組和對照組受試者檢測的TG含量分別降低16.03%和0.32%，試食組實(shí)驗(yàn)前后比較以及與對照組組間比較，其TG含量均有顯著性差異(P< 0.01)。血清HDL-C含量檢測結(jié)果顯示：試驗(yàn)后試食組受試者血清HDL-C含量明顯高于對照組受試者，差異具有顯著性(P<0.05)。試食組輔助降血脂的總有效率為47.3%，結(jié)果顯著高于對照組的有效率(P< 0.01)(表2-表5)。結(jié)果提示，該樣品能夠降低試食者的血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量，說明該樣品具有輔助降血脂功能。

表2 試食前后兩組受試人群的血清TC含量比較

表3 試食前后兩組受試人群的血清TG含量比較

表4 試食前后兩組受試人群的血清HDL-C含量比較

表5 試食后兩組受試人群輔助降血脂有效情況

2.3樣品對安全性指標(biāo)的影響

2.3.1樣品對血壓、心率的影響試食樣品前后，兩組受試者的心率和血壓均處于正常值范圍內(nèi)(表6)，試食組受試者試食前后自身比較以及對照組受試者的組間比較均無顯著性差異(P> 0.05)，結(jié)果表明樣品試食對受試者的心率以及血壓無不良影響。

表6 試驗(yàn)前后兩組人群的血壓及心率的檢驗(yàn)結(jié)果

2.3.2樣品對尿、便常規(guī)的影響除個(gè)別受試者的尿液中檢出上皮細(xì)胞增多外，試食前后兩組人群的尿液、糞便常規(guī)檢查結(jié)果均正常，表明該樣品對受試者的大、小便常規(guī)無不良影響。

2.3.3樣品對血常規(guī)的影響由表7可見，試食前后，兩組受試者的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板及血紅蛋白均處于正常值范圍內(nèi)，且試食組受試者試食前后血常規(guī)指標(biāo)自身比較以及與對照組受試者的血常規(guī)指標(biāo)組間比較，并無顯著差異(P> 0.05)。結(jié)果表明該樣品對試食受試者的血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)并無不良影響。

2.3.4樣品對血液主要生化指標(biāo)的影響表8結(jié)果顯示，試食前后，兩組受試者所檢測的各項(xiàng)血液生化指標(biāo)結(jié)果均在正常值范圍內(nèi)，試食組受試者試食前后血液主要生化指標(biāo)自身比較以及與對照組受試者各指標(biāo)組間比較差異均無顯著性(P> 0.05)。表明樣品對試食受試者肝、腎功能均無不良影響。

2.3.5不良反應(yīng)試驗(yàn)過程中試食該膠囊的受試者均未出現(xiàn)諸如惡心、脹氣、腹瀉及過敏等不良反應(yīng)。

表7 試驗(yàn)前后兩組人群的血常規(guī)的檢驗(yàn)結(jié)果

表8 試驗(yàn)前后兩組人群的血液生化指標(biāo)的檢驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

對符合本試食試驗(yàn)受試標(biāo)準(zhǔn)的高血脂志愿者共進(jìn)行了114例試食試驗(yàn)(包括：對照組59例，男29例，女30例；試食組55例，男29例，女26例)。其中試食組連續(xù)服用納百恩牌輔助降血脂軟膠囊45 d后，血清TC、TG分別平均下降10.39%和16.03%，顯著大于對照組的0.30%和0.32%，差異均具有顯著性(P< 0.01)；試食組受試者血清TC、TG試驗(yàn)前后自身比較以及試驗(yàn)后與對照組受試者血清TC、TG的組間比較結(jié)果均有顯著性差異(P< 0.01)，而對照組受試者試驗(yàn)前后自身TC、TG值均不存在顯著性差異(P> 0.05)；試驗(yàn)后試食組受試者血清HDL-C含量顯著高于對照組(P< 0.05)；試食組總有效率為47.31%，顯著高于對照組有效率(P< 0.01)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，該樣品具有輔助降血脂的作用。

試食試驗(yàn)前后，試食受試者的尿便常規(guī)、血常規(guī)和血液生化指標(biāo)等得到的檢查結(jié)果都屬于正常值范圍內(nèi)，此結(jié)果表明該樣品對受試者身體健康無不良影響。試驗(yàn)中試食受試者人群均未出現(xiàn)如惡心、脹氣、腹瀉及過敏反應(yīng)等不良反應(yīng)。表明該樣品的安全性符合要求。

[1] Kamiya S, Hagimori M, Ogasawara M, et al. In vivo evaluation method of the effect of nattokinase on carrageenan-induced tail thrombosis in a rat model[J]. Acta Haematologica, 2009, 124(4): 218-224.

[2] Dabbagh F, Negahdaripour M, Berenjian A, et al. Nattokinase: production and application[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2014, 98(22): 9199-9206.

[3] Weng Y, Yao J, Sparks S, et al. Nattokinase: an oral antithrombotic agent for the prevention of cardiovascular disease[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2017, 18(3): 523.

[4] 朱成義, 伊瓊, 馬金力,等. 銀杏葉提取物對血脂、血液流變學(xué)及血小板的影響[J]. 臨床內(nèi)科雜志, 2016, 33(7): 490-492.

[5] 陳梅霞, 蘇潔, 張玥莉, 等. 銀杏葉提取物與銀杏黃酮對高脂血癥大鼠血脂水平影響的比較研究[J]. 中國新藥雜志, 2014(7): 833-838.

[6] 萬冬宇, 黃維義, 劉全未. 銀杏葉提取物抗動脈粥樣硬化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué), 2012, 39(15): 3908-3910.

[7] 孫書紅, 孟宏濤, 惠增騫,等. n-3PUFA對高脂SHR大鼠血壓及血漿游離脂肪酸譜的影響[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2016, 16(2): 225-229.

[8] 戴毅, 閆慧慧, 王楓. α-亞麻酸和γ-亞麻酸對高脂血癥人群的降血脂作用[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2009, 9(23): 4492-4495.

[9] 韓浩. α-亞麻酸植物甾醇酯對動脈粥樣硬化的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D]. 武漢：華中科技大學(xué), 2015.

[10] 卜榮華, 李小莉, 張勛力,等. 納豆銀杏紫蘇軟膠囊輔助降血脂動物試驗(yàn)研究[J]. 湖北工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2016, 31(4): 93-96.

[11] 陳偉,母智深,李洪亮,等. α-亞麻酸、植物甾醇酯復(fù)方牛奶降血脂人體試食研究[J]. 食品工業(yè)科技,2013,34(11):353-360.

[12] 黃亦琦,趙鵬,楊輝,等. 葛明膠囊調(diào)節(jié)血脂作用臨床試驗(yàn)[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,13(8):41-43.

[13] 中華人民共和國衛(wèi)生部. 保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范[S/OL].[2010-02-26] http://www.sdfda.gov.cn/art/2010/2/26/art_206_15132.htm.

[14] 董捷, 張紅城, 胡余明. 蜂膠軟膠囊輔助降血脂人體試食研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 29(9): 557-559.

[15] 李玲, 儲智勇, 袁波,等. 貽貝多糖膠囊輔助降血脂人體試食研究[J]. 中藥材, 2011, 34(10): 1645-1647.

[16] 王輝, 于鵬, 任璐,等. 功能性牛奶輔助降血脂的人體試食研究[J]. 食品工業(yè), 2015, 36(4): 214-217.

[17] 袁根良, 黃遠(yuǎn)英. 鮭魚油軟膠囊輔助降血脂的人體作用研究[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào), 2016, 7(4): 1568-1571.

[責(zé)任編校：張眾]

ClinicObservationofFeedingTrialsontheAssistantHypolipidemicEffectofNattoGingkoPerillaOilSoftCapsules

HUANG Yan1, LI Xiaoli1, ZHANG Xunli2, ZHANG Yingqing1

(1SchoolofFoodandBioengin.),HubeiUniv.ofTech.,Wuhan430068,China; 2BeijingNABIOFoodLimitedCompany,Beijing102200,China)

The paper was to evaluate the assistant hypolipidemic effects and safety of mixture soft capsules of nattokinase, ginkgobiloba extract and Perilla seed oil on human feeding trials. It selected 114 patients with hypolipidemia in the trials (control group 59 patients, male: 29, female: 30; test group 55 patients, male: 29, female: 26). The test group were administrated NABIO assistant hypolipidemic soft capsules for 45 days, and then evaluated by self-control and inter-group control. After the treatments for 45 days, serum total cholesterol (TC) and triglyceride (TG) of the test group were decreased 10.39% and 16.03% respectively, significantly higher than that of the control group which were 0.30% and 0.32%, and the differences were significant (P< 0.01); The TC and TG of test group decreased significantly after treatments in self-control and inter-group control compared with the control group (P< 0.01). However，the TC and TG of control group had no significant difference in self-control after treatment (P> 0.05); the high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) of test group was significant higher than that of the control group after treatment (P< 0.05). The total efficiency of test group was 47.31%, significantly higher than that of the control group (P< 0.01). The indexes of blood routine, hepatic and renal function, blood biochemical test and other clinical test of test patients were not abnormal. The results suggest that the test sample has assistant hypolipodemic effects, and does no harm to test patients.

nattokinase; ginkgo biloba extract; perilla seed oil; human feeding trials; assistant hypolipidemic effects

2017-07-24

黃 妍(1993-)， 女，湖北武漢人，湖北工業(yè)大學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)樯锘?/p>

張迎慶(1969-)，女，湖北黃石人，工學(xué)博士，湖北工業(yè)大學(xué)教授，研究方向?yàn)樯镏扑?/p>

1003-4684(2017)05-0054-05

R153

A