朱 磊， 解德瓊， 張臣麗， 吳婭琳

(四川省宜賓市第二人民醫(yī)院腎內(nèi)科， 四川 宜賓 644000)

腎病綜合征患者外周血T細胞亞群及血清脂聯(lián)素水平與患者激素治療效果的關(guān)系

朱 磊， 解德瓊， 張臣麗， 吳婭琳

(四川省宜賓市第二人民醫(yī)院腎內(nèi)科， 四川 宜賓644000)

目的探討原發(fā)性腎病綜合征患者外周血中T細胞亞群(Treg)及血清脂聯(lián)素(APN)水平與患者激素治療效果的關(guān)系。方法選擇2014年5月至2016年5月期間在我院診斷為原發(fā)性腎病綜合征的80例患者作為研究對象，并以35例健康志愿者作為對照組,所有患者均檢測Treg及APN水平，所有患者均采用激素標準方案治療，探討血清中T細胞亞群及血清中脂聯(lián)合素水平與患者激素治療效果及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果觀察組外周血中Treg細胞百分比為4.25±1.32，低于對照組，APN、T輔助細胞17(Th17)、Th17/Treg細胞含量分別為33.6±12.5、1.63±0.26、0.51±0.07，高于對照組患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；以Treg細胞百分比中位數(shù)分為低水平組和高水平組，結(jié)果低水平組患者38例、高水平組患者42例，低和高水平組患者激素治療敏感分別為19例(50%)和26例(61.90%)；以血清中APN中位數(shù)分為低水平組和高水平組，結(jié)果低水平組患者39例，高水平組患者41例，低和高水平組患者激素治療敏感分別為19例(48.7%)和26例(63.41%)，這兩組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論腎病綜合征患者血清中Treg細胞含量和脂聯(lián)素水平與激素治療效果密切相關(guān)。

腎病綜合征； Treg； 脂聯(lián)素； 激 素； 效 果

原發(fā)性腎病綜合征是原發(fā)性腎小球疾病最常見的臨床綜合征之一，臨床表現(xiàn)為大量蛋白尿、高度水腫、高血脂、低白蛋白血癥[1,2]。原發(fā)性腎病綜合征的初治以激素為主，但是不同患者對激素的敏感性不一，導致激素敏感性不同的原因與患者炎癥狀態(tài)和免疫功能狀態(tài)密切相關(guān)[3,4]。T細胞亞群是反應(yīng)機體免疫功能狀態(tài)的主要臨床指標之一，脂聯(lián)素是反應(yīng)機體炎癥指標的重要指針[5]。本研究通過分析我院80例原發(fā)性腎病綜合征患者的臨床資料，探討原發(fā)性腎病綜合征患者血清中T細胞亞群和脂聯(lián)素與患者治療敏感性，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料:選擇2014年5月至2016年5月期間在我院診斷為原發(fā)性腎病綜合征的80例患者作為研究對象，納入標準：①所有患者均經(jīng)腎臟病理活檢證實為原發(fā)性腎病綜合征，排除繼發(fā)性腎病綜合征；②依從性好，同意進行本研究的。排除標準：①存在糖尿病、甲狀腺疾病疾病、免疫系統(tǒng)疾??；②精神異常患者；③合并過敏性紫癜、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、病毒性肝炎等可能誘發(fā)繼發(fā)性腎病綜合征的患者；④在腎穿刺活檢前1個月內(nèi)接受了激素或免疫抑制劑治療的患者。以同期35例健康體檢人群為對照組，并且對照組所有被檢人群均簽署知情同意書。觀察組患者男38例、女42例，平均年齡(28.6±6.5)歲，BMI(22.8±3.2)；對照組患者，男18例，女17例，平均年齡(29.8±5.9)歲，BMI(22.8±3.3)，兩組患者人口學資料對比差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準。

1.2治療方法

1.2.1治療方法:所有患者均根據(jù)王海燕第七版《腎臟病學》中激素的使用方法，給予1mg/kg潑尼松龍，給予足療程使用。

1.2.2外周血中T細胞亞群和脂聯(lián)素水平檢測：收集患者空腹外周靜脈血，用active motif公司的試劑盒按說明書提取外周血單個核細胞(PBMCs)，得到PBMCs后PBS重懸細胞，取20ul細胞懸液，調(diào)節(jié)細胞濃度，按照流式細胞檢測說明書加入相流式細胞儀抗體后，按照說明書進行相關(guān)操作，流式細胞儀上檢測細胞Treg細胞和Th17細胞含量，Treg細胞采用Foxp3 Alexa Fluor488/CD25PE/CD4 PerCP，Th17細胞采用抗人IL-17Alexa Fluor647/CD3 FITC/CD4PE，兩種抗體均購于上海百賽生物科技有限公司；血清脂聯(lián)素水平檢測：收集患者的外周靜脈血10mL，離心得到血清后按照酶聯(lián)免疫吸附試劑盒的說明書進行，在美國biotek酶標儀上點樣、抗體孵育以及吸光值檢測，繪制吸光值-標準品濃度的曲線后，將待測樣本的吸光值代入曲線并計算APN。APN試劑盒均購于欣博盛生物科技有限公司，檢測方法嚴格參照試劑盒說明書進行。

1.2.3臨床療效評價:根據(jù)王海燕第7版《腎臟病學》中規(guī)定的激素治療效果分為激素敏感、激素依賴、激素抵抗。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清中脂聯(lián)素和外周血T細胞亞群結(jié)構(gòu)比較:觀察組外周血中Treg細胞含量低于對照組，APN、Th17、Th17/Treg細胞高于對照組患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1

表1 兩組血清中脂聯(lián)素和T細胞亞群結(jié)構(gòu)比較

2.2血清中T細胞亞群與患者激素治療效果的關(guān)系：以Treg細胞百分比中位數(shù)分為低水平組和高水平組，結(jié)果低水平組患者38例、高水平組患者42例，低水平組患者激素治療敏感為19例，占50.00%，而高水平組患者26例，占61.90%，差異不具有統(tǒng)計學意義(χ2=1.149，P>0.05)。見表2

表2 血清中T細胞亞群與患者激素治療效果的關(guān)系

2.3血清中脂聯(lián)素水平與患者激素治療效果的關(guān)系：以血清中APN中位數(shù)分為低水平組和高水平組，結(jié)果低水平組患者39例、高水平組患者41例，低水平組患者激素治療敏感為19例，占48.72%，高水平組患者激素治療敏感為26例，占63.41%，差異不具有統(tǒng)計學意義(χ2=1.60，P>0.05)。見表3

表3 血清中脂聯(lián)素水平與患者激素治療效果的關(guān)系

3 討 論

原發(fā)性腎病綜合癥是腎臟病常見的臨床表現(xiàn)形式，原發(fā)性腎病綜合征的病理形式多種，可以是微小病變型腎病、系膜增生性腎小球腎炎、膜性腎病等，雖然不同病理類型對激素治療的敏感性不同，但是同一種病理類型對激素敏感性也不同，導致腎病綜合征患者對激素治療效果不同的原因非常復雜。血清中免疫細胞含量及炎癥狀態(tài)是影響患者激素效果的主要原因之一。本研究中納入的80例患者作為研究對象，本研究結(jié)果提示，80例患者最終激素敏感45例，激素依賴22例，激素抵抗各13例，激素敏感率為56.25%。

T細胞亞群結(jié)構(gòu)是反應(yīng)機體免疫機能的重要指標之一[6,7]。本研究探討了腎病綜合征患者血清中Treg細胞含量變化與激素敏感性的關(guān)系，結(jié)果現(xiàn)示腎病綜合征患者Treg細胞含量明顯低于健康對照組患者。相關(guān)研究結(jié)果提示腎病綜合征患者Treg細胞含量變化與患者病情之間存在潛在聯(lián)系，免疫炎癥活化是腎病綜合征的主要病理生理機制，而Treg細胞具有負向調(diào)控免疫炎癥反應(yīng)的作用，有助于抑制免疫炎癥反應(yīng)的形成，而且Treg細胞可以抑制Th17細胞，而Th17細胞在炎癥損傷中有促進炎癥因子活化，誘導炎癥瀑布形成的作用[8]。但我們根據(jù)腎病綜合征患者Treg細胞含量中位數(shù)分為高水平組和低水平組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Treg細胞高水平組患者激素敏感性與低水平組患者之間比較，差異不具有統(tǒng)計學意義。

脂聯(lián)素(APN)是脂肪組織特異性分泌的一種激素，參與糖類和脂肪的代謝，近年來APN被證實參與胰島素抵抗的病理過程，具有強大的抗炎作用，能抑制炎癥反應(yīng)程度，而且血清中APN參與腎病綜合征患者高脂血癥的病理生理過程[9]。我們對比腎病綜合征患者血清中APN與健康患者APN的量，發(fā)現(xiàn)腎病綜合征患者血清中APN高于健康患者，進一步根據(jù)APN中位數(shù)分為高水平組和低水平組探討激素敏感性發(fā)現(xiàn)，高水平組APN患者激素敏感性與低水平組比較差異不具有統(tǒng)計學意義，這可能由于高水平的APN反應(yīng)機體對炎癥刺激反應(yīng)敏感，機體參與炎癥刺激更明顯。

綜上所述，我們研究結(jié)果提示，腎病綜合征是腎小球腎炎常見的臨床綜合征，腎病綜合征初治多采用激素，即使相同病理類型的患者可能對激素的敏感性也不同，腎病綜合征患者外周血中Treg細胞含量低于正常人群，而APN水平高于健康人群，本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)外周血中Treg細胞含量和脂聯(lián)素水平與激素治療效果密切相關(guān)，值得臨床關(guān)注。

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TheRelationshipbetweenPeripheralBloodTLymphocyteSubsetsSerumAdiponectinLevelsandtheEffectofHormoneTherapyinPatientswithNephroticSyndrome

ZHULei,XIEDeqiong,ZHANGChengli,etal

(TheSecondPeople'sHospitalofYibin,SichuanYibin644000,China)

Objective:To investigate the relationship between peripheral blood T lymphocyte subsets(Treg), serum adiponectin (APN) levels and the effect of hormone therapy in patients with nephrotic syndrome.Methods80 cases of primary nephrotic syndrome patients were selected during May 2014 to May 2016 in our hospital.35 healthy volunteers as control group, all patients were detected in the serum adiponectin level in patients with T cell subsets and serum in all patients using standard hormone treatment, serum T cell subsets and serum lipid in the association between hormone levels and treatment effect and prognosis of patients with hormone.ResultsThe levels of peripheral blood Treg cells in patients of the observation group was 4.25±1.32,which significantly lower than that in patients of the control group; The levels of APN, T helper cell 17 (Th17) and the ratio of Th17/Treg cells were 33.6±12.5 mg/L, 1.63± 0.26, 0.51 ± 0.07, which significantly higher than that in the control group (P<0.05). Patients were divided into low and high levels of hormone-sensitive therapy based on the numbers of Treg cells, and the results showed 38 cases of patients in the low-level group and 42 cases in high level group. Of them, 19 cases (50%) and 26 cases (61.90%) in the low-level and high-level groups respectively, were sensitive to hormone therapy. Patients were divided into low-level and high-level groups based on the median of serum APN and the results showed 39 and 41 cases of patients that sensitive to hormone therapy. Of them, 19 cases (48.70%) and 26 cases (63.41%) in the low-level and high-level groups respectively, were sensitive to hormone therapy. The difference was not statistically significant, P>0.05.ConclusionThe number of Treg cells and serum adiponectin levels were closely related to the effect of hormone therapy.

Nephrotic syndrome; Treg; Adiponectin; Hormone; Effect

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.10.018

1006-6233(2017)10-1646-04

四川省衛(wèi)生廳基金資助項目,(編號：SC081920)