吳宗澄

摘要：為測定氟嗎啉原藥對大鼠的急性吸入毒性，求出半數(shù)致死濃度（LC50），同時為亞慢性和其他毒理學研究中接觸劑量的選擇提供依據(jù)，參照《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法》，以中華人民共和國國家標準（GB15670-1995）為準則，用SD（Sprague Dawley）大鼠作為試驗動物，對氟嗎啉原藥進行了急性吸入毒性試驗。結果表明：氟嗎啉原藥對SD雌雄大鼠急性吸入毒性試驗LC50均大于2093±30 mg/m3。 根據(jù)GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法》大鼠急性吸入毒性分類標準，氟嗎啉原藥大鼠急性吸入毒性為低毒，該結論可為安全使用提供依據(jù)。

關鍵詞：氟嗎啉原藥；大鼠；急性吸入毒性；LC50

中圖分類號：X43

文獻標識碼：A文章編號：16749944（2017）18021902

1引言

氟嗎啉原藥是沈陽化工研究院自主研制的新型殺菌劑＼[1＼]。該殺菌劑是一種內(nèi)吸型殺菌劑，主要用于防治霜霉和疫霉屬病害，由卵菌綱病原菌引起的霜霉病、晚疫病等重要植物病害，尤其用于防治抗性病害＼[1，2＼]。氟嗎啉是我國第一個真正實現(xiàn)工業(yè)化且具有自主知識產(chǎn)權的農(nóng)藥品種，也是第一個獲得中國發(fā)明專利的農(nóng)用殺菌劑＼[3＼]。氟嗎啉原藥殺菌活性高，抗菌譜廣，與環(huán)境相容性優(yōu)于國外同類產(chǎn)品烯酰嗎啉＼[4＼]。但目前尚未見有關氟嗎啉原藥吸入毒性的報道。本實驗參照《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法》，以中華人民共和國國家標準（GB15670-1995）為準則[5]，通過對SD大鼠的急性吸入毒性試驗來檢測氟嗎啉原藥的急性吸入毒性，了解其經(jīng)呼吸道進入動物機體后對呼吸道及全身的損傷和危害程度，為該農(nóng)藥的毒理學安全評價提供資料。

2材料與方法

2.1受試物與儀器

氟嗎啉原藥為白色結晶固體，純度為95%，由沈陽化工研究院有限公司提供。稱取 95.0 g 受試樣品，加入 5.0 g 白炭黑用行星式球磨儀進行粉碎和研磨，配成 95%的受試樣待用。所用儀器有：HOPE-MED 8052H粉塵類動物口鼻多濃度動態(tài)暴露系統(tǒng)購自天津開發(fā)區(qū)合普工貿(mào)有限公司，賽多利斯BS124S電子天平購自杭州匯爾儀器設備有限公司，行星式高能球磨儀購自德國萊弛公司，TY-08C智能個體粉塵取樣機購自鹽城天悅儀器儀表有限公司，3321藥物氣溶膠粒徑普儀系統(tǒng)購自美國TSI公司。

2.2動物來源與飼養(yǎng)環(huán)境

SPF級SD大鼠40只，雌雄各半，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供（許可證號：SCXK<京>2012-0001）。引入動物后進行適應檢查，適應期每籠2只動物，適應時間12～13 d，引入當天進行健康檢查，并稱量體重。飼料為滅菌全價營養(yǎng)粉料，自由飲水，動物房溫度為20.13～23.82 ℃，濕度為40.75%～69.89%，光周期自動控制，每天明暗各12 h。

2.3試驗方法

2.3.1劑量設計

參 照 農(nóng) 藥 毒 理 學 試 驗 方 法（GB15670 - 1995），設計2000 mg/m3、1000 mg/m3、500 mg/m3、200 mg/m3，根據(jù)體重采用隨機分組法分為4組，每組10只動物，雌雄各半。分組時候組內(nèi)動物的體重不超過平均體重的±20%。如果2000 mg/m3劑量組試驗動物沒有出現(xiàn)死亡，則判定急性吸入毒性試驗LC50大于2000 mg/m3。

2.3.2染毒途徑及方法

采用動式吸入染毒法，使用HOPE-MED 8052H固氣類動物口鼻多濃度動態(tài)染毒控制裝置對動物進行染毒。試驗開始前，將雌雄各半10只動物分別放入固定器中，將固定器安裝在染毒柜上，然后密封染毒柜。定量進樣的供試品同空調(diào)過濾的壓縮空氣（0.04 m3）吸入室內(nèi)混合，設置進樣速度和混合氣體流量，通過柜頂部的噴頭連續(xù)向柜內(nèi)發(fā)生氣溶膠。通過柜底部連接的尾氣吸收過濾裝置進行尾氣吸收。染毒柜內(nèi)設置溫度為22 ℃±3 ℃，染毒期間試驗動物禁食禁水。動物給藥前先對染毒柜內(nèi)濃度進行調(diào)試，2次檢測染毒柜內(nèi)濃度波動小于±20%，進行正式試驗，動物暴露染毒時間為2 h。染毒結束動物歸鼠籠觀察14 d，動物自由飲水和攝食。

2.3.3給藥暴露參數(shù)檢測

染毒過程中對動物呼吸帶供試品實際濃度和粒徑分布進行分析，對進氣流量、進樣流量、濃度測量、染毒柜溫度、相對濕度、氧氣濃度進行檢測。

濃度測量：采樣前稱量濾膜重量為A1，采樣結束后稱量濾膜重量為A2，計算采樣質(zhì)量（M），M=A2-A1，氣溶膠濃度為C（mg/m3）=采樣質(zhì)量（M）/采樣體積（V）×1000 （L/m3）。

粒徑測定：使用粒子空氣動力學粒徑譜分布儀3321進行粒徑測定。主要測定3個指標，其一：可吸入部分的粒徑數(shù)（<4μm），其二：粒子空氣動力學直徑質(zhì)量中值（MMAD），其三：粒子空氣動力學幾何標準差（GSD）。

2.3.4動物觀察與體重稱量

染毒結束后對動物進行觀察，24 h以后每天觀察1次至第14 d。記錄各動物中毒癥狀及其發(fā)生和緩解、消失的時間。仔細觀察和記錄被毛、眼睛和粘膜、呼吸系統(tǒng)、生殖泌尿系統(tǒng)、神經(jīng)消化系統(tǒng)，特別注意觀察供試品對呼吸系統(tǒng)的影響，如呼吸道刺激反應，呼吸節(jié)律的變化，以及呼吸和呼吸模式的改變。

體重稱量：染毒前稱量動物體重，染毒后7 d和14 d各稱量1次動物體重。

2.3.5大體解剖檢查

試驗期末對全部存活動物CO2麻醉，放血進行大體解剖。解剖時候對動物進行全面的仔細的肉眼觀察，特別關注肺部及上呼吸道的刺激及局部毒性反應，同時檢查顱腔、胸腔、腹腔、各個天然孔道及其內(nèi)容物，詳細記錄每只動物的大體解剖改變。

2.3.6數(shù)據(jù)處理和結果評價

統(tǒng)計各組死亡率與存活率，體重結果以均值加減標準差形式體現(xiàn)，如果最高劑量組（2000 mg/m3劑量組）試驗動物沒有出現(xiàn)死亡，則判定急性吸入毒性試驗LC50大于2000 mg/m3劑量組劑量均值加減標準差。然后按照表1進行毒性分級。endprint

3.2粒徑分布

使用粒子空氣動力學粒徑譜分布儀3321管理軟件進行采集和測定，主要測定三個指標，其一：可吸入部分的粒徑數(shù)（<4 μm），其二：粒子空氣動力學直徑質(zhì)量中值（MMAD），其三：粒子空氣動力學幾何標準差（GSD），結果見表3。

3.4死亡結果及觀察

2093 mg/m3濃度組動物染毒期間及染毒后14 d觀察期間，所有受試動物沒有發(fā)生死亡，觀察均也沒見異常。

3.5體重稱量結果

2093 mg/m3濃度組動物體重在試驗期間呈現(xiàn)增長趨勢，結果見表5。

3.6解剖與組織學觀察結果

觀察結束，所有受試動物的解剖與組織學檢查均未見異常。

4結論與討論

如前所述，如果2000 mg/m3劑量組試驗動物沒有出現(xiàn)死亡，則判定急性吸入毒性試驗LC50大于2000 mg/m3。根據(jù)試驗結果氟嗎啉原藥對雌雄大鼠半數(shù)致死濃度（LC50，2 h）分別如下：雄性大鼠：>2093±30 mg/m3，雌性大鼠：>2093±30 mg/m3。根據(jù)GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法》大鼠急性吸入毒性分類標準＼[5＼]，氟嗎啉原藥急性吸入毒性為低毒。

隨著農(nóng)業(yè)發(fā)展水平的提高，我過創(chuàng)新農(nóng)藥越來越多，農(nóng)藥的安全性問題也越來越得到廣泛的關注，氟嗎啉殺菌活性高，抗菌譜廣，與環(huán)境相容性好，具有較高的市場開發(fā)潛力。近年來，關于氟嗎啉急性吸入毒性尚未見報道，本實驗通過對SD大鼠的急性吸入毒性試驗來檢測氟嗎啉原藥的急性吸入毒性，結果表明，氟嗎啉毒性為低毒，若制成有效的噴霧劑，不僅提高了藥物的吸收速度，而且避免了其他給藥途徑帶來的不良反應，極大地提升了用藥的安全性。

參考文獻：

[1]

劉武成，劉長令. 新型高效殺菌劑氟嗎啉 ＼[J＼]. 農(nóng)藥，2002（1）：8～11.

＼[2＼]李鳳珍，王捷，姚寶玉，等. 氟嗎啉原藥大鼠慢性毒性與致癌試驗＼[J＼].農(nóng)藥，2005（1）.

＼[3＼]高貽軒. 氟嗎啉和唑菌酯在人參上的殘留動態(tài)及最大殘留限量標準的制定 ＼[D＼]. 長春：吉林農(nóng)業(yè)大學，2016.

＼[4＼]HUA Chenlei，KOTS K，KETELAAR T，et al. Effect of Flumorph on F-Actin Dynamics in the Potato Late Blight Pathogen Phytophthora infestans ＼[J＼]. Phytopathology，2015，105（4）： 419-423.

＼[5＼]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.GBI5670-1995.農(nóng)藥登記毒理學試驗方法＼[S＼].北京：中國標準出版社，1995.

Acute Inhalation Toxicity Test of Flumorph Technical on Rat

Wu Zongcheng

（Safety Evaluation Center of Shenyang Research Institute of Chemical Industry Ltd.， Shenyang 110021， China）

Abstract： ＼[Aims＼] To determine acute inhalation toxicity test of Flumorph Technical on rat， this paper obtained the median lethal concentration （LC50） and provided evidence for the selection of exposure dose for sub-chronical study. ＼[Methods＼] The method was designed to meet the pesticide registration toxicology test method from the national standard of the Peoples Republic of China （GB15670-1995）. The study was performed to assess the potential for acute inhalation toxicity of the Flumorph Technical in SD rats. ＼[Results＼]The acute inhalation LC50of SD male and female rats for Flumorph Technical was more than 2093±80 mg/m3. ＼[Conclusions＼] According to GB15670-1995 pesticide registration toxicological test methods of Rat Acute Inhalation Toxicity Classification Standards， Fluorine morpholine reversed-phased rat acute inhalation toxicity is low toxicity. The conclusions provide the basis for safe use.

Key words： Flumorph Technical； rat； acute inhalation toxicity； LC50endprint