吳艷麗，楊鴻雁，郭君欽

（吉林省藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130033）

HPLC法測(cè)定山葡萄藤中白藜蘆醇的含量

吳艷麗，楊鴻雁，郭君欽

（吉林省藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130033）

目的研究建立山葡萄藤質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的含量測(cè)定方法。方法采用高效液相色譜法測(cè)定山葡萄藤中白藜蘆醇的含量。色譜柱：Alltima HP C18 5 μm（250×4.6）mm；流動(dòng)相：乙腈-水（29:71）；流速：0.8 ml/min；柱溫：35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：306 nm；結(jié)果白藜蘆醇在0.02～0.31 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999）；平均加樣回收率為102.67%，RSD=0.79%（n=6）。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便易行，準(zhǔn)確，可作為控制山葡萄藤質(zhì)量的方法。

山葡萄藤；HPLC；白藜蘆醇

山葡萄藤為葡萄科植物山葡萄Vitis amurensis Rupr的干燥藤莖。山葡萄藤中含白藜蘆醇，白藜蘆醇可預(yù)防癌癥的發(fā)生及發(fā)展，還具有雌激素樣作用，可用于治療乳腺癌等疾病。

1 儀器與試藥

島津 LC-2010C高效液相色譜儀；白藜蘆醇對(duì)照品。乙腈，純化水。

樣品：七星山藥業(yè)有限公司、金泉寶山藥業(yè)有限公司、東豐藥業(yè)有限公司、新安藥業(yè)有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

取白藜蘆醇對(duì)照品的70%乙醇溶液，經(jīng)Shimadzun UV-2550型分光光度計(jì)在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，得光譜圖，白藜蘆醇在306.10 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故選定測(cè)定波長(zhǎng)為306 nm。

2.2 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Alltima HP C18 5μm（250×4.6）mm；流動(dòng)相：乙腈-水（29：71）；檢測(cè)波長(zhǎng)：306 nm；柱溫：35℃；流速：0.8 ml·min-1。

2.3 對(duì)照品溶液制備

取白藜蘆醇對(duì)照品，制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。

2.4 供試品溶液溶液制備

取本品粗粉1.0 g，精密稱定，精密加入70%乙醇50 mL，稱定重量，加熱回流提取2小時(shí)，冷卻至室溫，即得。

2.5 相色譜

在上述色譜條件下，分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液各5 μl，分別注入液相色譜儀，測(cè)得各液相色譜圖（圖1、2），供試品色譜中，在與白藜蘆醇對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的色譜峰，保留時(shí)間為8.7 min左右，理論板數(shù)以白藜蘆醇峰計(jì)N=16670。

圖1 白藜蘆醇對(duì)照品高效液相色譜圖

圖2 山葡萄藤樣品高效液相色譜圖

2.6 線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液（白藜蘆醇：20.84 μg·ml-1）1 μL、3 μL、5 μL、7 μL、9 μL、15 μL，按上述色譜條件分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行線性回歸，回歸方程為：Y＝9098863.8X+22102 r＝0.9999，線性范圍在0.02～0.31 μg。

2.7 回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量（0.6246 mg·g-1）的山葡萄藤樣品0.5 g，6份，各精密加入白藜蘆醇對(duì)照品溶液（12.504 μg·ml-1）25 mL和70%乙醇溶液25 mL，搖勻，按2.4項(xiàng)下方法提取制備供試品溶液，依法測(cè)定，結(jié)果回收率分別為103.46%，101.90%，103.21%，101.81%，103.57%，102.12%；平均回收率為102.67%，RSD=0.79%，表明本法準(zhǔn)確度較好。

3 樣品測(cè)定

依正文方法測(cè)定4家藥廠提供的4批樣品，結(jié)果分別為0.0648%，0.0910%，0.0703%，0.2901%。

4 討 論

試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇對(duì)照品溶液和供試品溶液在放置過程中峰面積隨時(shí)間的延長(zhǎng)而緩慢減小，但在24小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定，RSD為1.5%。

由上述方法學(xué)試驗(yàn)示出，本含量測(cè)定方法具有一定的精密性，穩(wěn)定性，重復(fù)性和準(zhǔn)確性，可作為本產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法。

文獻(xiàn)報(bào)道中多見對(duì)葡萄酒、葡萄皮和葡萄籽中白藜蘆醇的含量分析，目前，山葡萄藤已應(yīng)用于中藥制劑中，本文對(duì)山葡萄藤中白藜蘆醇含量進(jìn)行了測(cè)定，為葡萄藤的開發(fā)利用提供了參考。

[1] 向 陽(yáng),張 彤,張 煊,馬 龍.高效液相色譜法測(cè)定葡萄皮和葡萄籽中白藜蘆醇的含量[J].衛(wèi)生研究,2003,32(5):490.

[2] 劉達(dá)雄,欒玉明,區(qū)偉全,王國(guó)玲,蔣卓勤.國(guó)產(chǎn)葡萄酒中白藜蘆醇含量分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2008,18(12):2813.

R284.2

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ISSN.2095-8242.2017.38.7499.01

本文編輯：吳玲麗