翟凱齊 張麗娜 李茉莉 喬克

開(kāi)封地區(qū)兒童急性呼吸道感染病原體檢測(cè)結(jié)果分析

翟凱齊1張麗娜2李茉莉3喬克4

目的回顧性分析開(kāi)封地區(qū)兒童呼吸道病毒感染常見(jiàn)病原學(xué)數(shù)據(jù)，為臨床診療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法收集2016年1-12月開(kāi)封市兒童醫(yī)院12755例急性呼吸道感染患兒血清標(biāo)本，采用免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)檢測(cè)患兒血清中6種常見(jiàn)呼吸道病原體早期特異性抗體IgM：肺炎衣原體(CP)、肺炎支原體(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)、副流感病毒(PIV)。對(duì)病例陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較不同年齡組、性別、季節(jié)、等感染情況的差異。結(jié)果12755例患兒標(biāo)本中有3636例陽(yáng)性，陽(yáng)性率為28.51%。6種呼吸道病原體的陽(yáng)性率依次為：MP 15.03%、ADV 11.13%、IV 7.76%、RSV 3.03%、CP 1.24%、PIV 0.4%;呼吸道病原體檢出率春、夏季節(jié)相對(duì)較高； 4-6歲組陽(yáng)性率最高，<1歲組感染率最低。結(jié)論該地區(qū)兒童呼吸道感染常見(jiàn)病原體以MP及ADV為主，其次是IV，其感染有季節(jié)、性別、年齡差異性；病毒混合感染中以MP混合感染為主。

呼吸道感染； 病毒； 檢測(cè)； 臨床分析

急性呼吸道感染(ARI)是兒科常見(jiàn)疾病，其病原譜中病毒感染占較大的比重。為了解開(kāi)封地區(qū)病毒所致的兒童ARI的病原學(xué)分布情況，采用免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)對(duì)開(kāi)封市兒童醫(yī)院12755例住院患兒6種常見(jiàn)呼吸道病毒早期特異性抗體IgM檢測(cè)，分析6種常見(jiàn)呼吸道病毒病原學(xué)構(gòu)成及性別、季節(jié)、年齡組分布差異性。

資料與方法

一、 一般資料

選擇2016年1-12月開(kāi)封市兒童醫(yī)院12755例ARI的患兒血清標(biāo)本為研究對(duì)象，入組患兒診斷符合《諸福堂實(shí)用兒科學(xué)》第7版ARI標(biāo)準(zhǔn)。其中男8005例，女4750例；年齡0-12歲，其中<1歲5242例、1-3歲5244例、4-6歲1526例、>6歲743例；春季3140例、夏季2894例、秋季2572例、冬季4149例。

二、方法

1 標(biāo)本采集：所有患兒均于入院后次日清晨空腹采集靜脈血1-2 mL，送檢至檢驗(yàn)科，3 000轉(zhuǎn)/min離心15min分離患兒血清待測(cè)。

2 檢測(cè)方法：取出芯片和試劑， 置室溫(25±1℃)下放置30分鐘后，平衡置室溫待用；根據(jù)樣本量，取潔凈小管按照10：1配置足量底物混合液；取待測(cè)血清100μL,加稀釋液200μL充分混勻；取洗滌液4滴加于檢測(cè)窗口膜面上，均勻潤(rùn)濕膜面；取處理后的待測(cè)血清混合液200μL，加于檢測(cè)窗口膜面上；待血清樣本滲透后，取洗滌液6滴，加于檢測(cè)窗口膜面上，取酶結(jié)合物4滴，加于檢測(cè)窗口膜面上；待酶結(jié)合物滲入后，取洗滌液6滴，加于檢測(cè)窗口膜面上；取配制好的底物混合液300μL，加于檢測(cè)窗口膜面上，芯片在25分鐘后放入XK2100生物芯片閱讀儀進(jìn)行分析，整個(gè)過(guò)程在室溫(25±1℃)環(huán)境中進(jìn)行，2小時(shí)完成檢測(cè)分析。

3 結(jié)果判讀：樣本檢測(cè)值<0.95倍臨界值，則該抗體檢測(cè)結(jié)果為陰性；樣本檢測(cè)值>1.05倍臨界值時(shí)，則該項(xiàng)結(jié)果為陽(yáng)性；檢測(cè)值介于0.95-1.05倍臨界值，該結(jié)果為可疑，需結(jié)合臨床癥狀分析判定。芯室質(zhì)控點(diǎn)顯色時(shí)實(shí)驗(yàn)有效。以上設(shè)備及試劑均購(gòu)自中國(guó)江蘇泰州欣康基因數(shù)碼科技有限公司。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

患兒檢測(cè)結(jié)果使用2007版Microsoft Office Excel軟件收集整理，應(yīng)用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，取P<0.05 有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

結(jié) 果

一、12755例患兒血清學(xué)標(biāo)本共3636例陽(yáng)性，陽(yáng)性率為28.51%。6種呼吸道病原體的單項(xiàng)陽(yáng)性率依次為：MP 15.03%、ADV 11.13%、IV 7.76%、RSV 3.03%、CP 1.24%、PIV 0.4%;單項(xiàng)病原學(xué)陽(yáng)性率數(shù)據(jù)(見(jiàn)表1)；兩種及兩種以上混合感染1272例，占陽(yáng)性標(biāo)本34.98%，混合感染中前三位病原體依次為ADV+IV 390例，MP+ADV 349例，MP+IV 300例。

二、呼吸道病原體感染情況與季節(jié)、月份關(guān)系

兒童呼吸道病原體在不同季節(jié)檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=297.037，P=0.000)。全年之中春、夏兩季為兒童呼吸道病毒高發(fā)階段，病原體檢出率最高(62.10%、40.64%)，秋、冬季病原學(xué)檢出率較低(32.32%，17.69%)。其中MP全年感染率夏季最高，ADV及IV在春季節(jié)檢出率較高，分別為(23.50%,15.73%),RSV、CP、PIV全年呈現(xiàn)低水平散發(fā)趨勢(shì)；由(表3)可以看出病原體檢出多集中于在3-7月，該地區(qū)患兒呼吸道病原體以MP、ADV、IV感染為主，其中MP全年各月份檢出率較高，ADV、IV感染主要集中于1-6月份。

表1 兒童急性呼吸道感染病原體(單項(xiàng))陽(yáng)性率及構(gòu)成比[n(%)]

注：?jiǎn)雾?xiàng)病原學(xué)陽(yáng)性總數(shù)含1272例混合感染

表2 兒童急性呼吸道感染病原體分布與季節(jié)關(guān)系[n(%)]

表3 病原體陽(yáng)性標(biāo)本各月份分布情況

三、兒童呼吸道病原體感染情況與性別關(guān)系

在8005例男性患兒呼吸道病原體感染的陽(yáng)性率為37.68%，女性為40.13%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(χ2=6.965，P=0.008)，女性患兒感染率稍高于男性患兒。(見(jiàn)表4)。

表4 兒童呼吸道病原體感染情況與性別的關(guān)系[n(%)]

四、呼吸道病原體感染情況與年齡的關(guān)系

患兒<1歲、1-3歲、4-6歲、> 6歲4個(gè)年齡組，呼吸道病原體的檢出率分別為,15.07、47.67、72.35、71.07 ，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.368，P=0.002)。4-6歲兒童呼吸道病原體感染率最高，<1歲組感染率最低，(見(jiàn)表5)。

表5 兒童呼吸道病原體感染情況與患兒年齡關(guān)系[n(%)]

討 論

AIR是兒科臨床常見(jiàn)疾病，也是兒童最為常見(jiàn)的感染性疾病之一，嚴(yán)重威脅兒童生命健康[1-2]，肺炎衣原體(CP)、肺炎支原體(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)、副流感病毒(PIV)為兒童AIR常見(jiàn)感染因素，本研究顯示該地區(qū)呼吸道病毒總陽(yáng)性率為28.51%，高于湖北地區(qū)13.29%[3]，浙江地區(qū)21.75%[4]，與無(wú)錫地區(qū)感染率相接近31.16[5],低于四川53.3%[6]及廣州80.25%[7]，考慮可能與本研究未涵蓋地域因素、氣候因素、人群易感因素、檢測(cè)方法學(xué)因素有關(guān) ，此外也可能與未覆蓋近年研究較多的偏肺病毒(HMPV)、鼻病毒、柯薩奇病毒等各類(lèi)相關(guān)病原有關(guān)。不同地區(qū)氣溫、水文、季節(jié)性、性別的差異性造成了各地區(qū)兒童呼吸道病毒病原譜的多樣性，不同感染因素又導(dǎo)致AIR臨床癥狀和特點(diǎn)不同，因此分析AIR該地區(qū)常見(jiàn)病原體分布情況有助于臨床提高診療效果，進(jìn)一步減少病毒性ARI患兒治療過(guò)程中抗生素濫用問(wèn)題。

本次研究顯示，該地區(qū)常見(jiàn)AIR的病毒性感染因素為MP、ADV，這與王生清[8]研究近似，考慮可能與兩地區(qū)相近的氣候條件所致；且AIR混合性感染在兒童階段并不少見(jiàn)，占所有陽(yáng)性病例的34.98%，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道亦印證了該項(xiàng)結(jié)論。目前，雖然上呼吸道感染病原體的檢測(cè)方法較多，有培養(yǎng)分離法、特異性抗原、抗體檢測(cè)及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等，培養(yǎng)分離方法雖是診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但考慮其操作程序復(fù)雜，培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，技術(shù)條件要求高，檢測(cè)成本較高，在臨床上推廣相對(duì)困難，亦不適用于一般實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)要求；免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)方法具有準(zhǔn)確性高、速度快、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)[9]可以為臨床初步診斷提供呼吸道病毒檢測(cè)依據(jù)。

ARI病毒性感染一年四季均可發(fā)病，本次結(jié)果顯示不同季節(jié)呼吸道病原體檢出率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。春、夏兩季為兒童呼吸道病毒高發(fā)階段，病原體檢出率最高，秋、冬季病原學(xué)檢出率較低，主要病原體中，MP在夏季檢出率最高(18.94%)，且一年之中處于較高的檢出率(12.09%-18.94%)，說(shuō)明該地區(qū)呼吸道病原體構(gòu)成中以MP感染為主，與章國(guó)平[10]報(bào)道一致；ADV及IV 在春季檢出率最高(23.50%、15.73%)，夏、秋、冬檢出率較低(2.29%-9.99%、1.4%-8.53%)，說(shuō)明此兩項(xiàng)病毒檢出存在更為明顯的季節(jié)差異性；RSV、CP、PIV在一年之中感染率相對(duì)較低，呈現(xiàn)一年之中相對(duì)低發(fā)的表現(xiàn)；因此可以看出，呼吸道病毒感染與季節(jié)密切相關(guān)，一方面是由于各種病原體所特有的生物學(xué)特性不同，另一方面由于各地區(qū)環(huán)境、氣候條件、溫濕度等不同，而導(dǎo)致的感染率差異[11]。

本研究中12755例患兒，男性8005例和女性4750例，其呼吸道病毒的檢出率分別為37.68%，女性為40.13%，且女性患兒感染率稍高于男性患兒，結(jié)果與以往研究不同[12-13],考慮與本次研究中男性患兒多在低年齡組且病毒感染率較低所致；本研究將患兒按年齡為<1歲、1-3歲、4-6歲、>6歲四個(gè)組別，各年齡組的病原體檢出率分別為15.07%、47.67%、72.35%、71.07%，且統(tǒng)計(jì)分析顯示病毒病原體分布有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。四組之中，4-6歲年齡組感染率最高，<1歲感染率最低，且MP及ADV在4-6歲感染率最高，與相關(guān)報(bào)道一致[14-15]。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示：MP、ADV、IV 是該地區(qū)兒童呼吸道感染最為常見(jiàn)病原體；不同年齡組、性別、季節(jié)性對(duì)于病原體類(lèi)型的檢出存在差異，女性患兒檢出率稍高于男性；提示在呼吸道感染高發(fā)的春、夏兩季應(yīng)做好疾病的預(yù)防工作，可以有效減低兒童呼吸道病毒性感染的發(fā)生。最后，臨床ARI患兒治療時(shí)，應(yīng)考慮患兒病原學(xué)流行病學(xué)差異性，適時(shí)調(diào)整治療方案，合理使用治療藥物，縮短治療周期，保障兒童生命健康。

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AnalysisofpathogendetectionresultsofchildrenwithacuterespiratoryvirusinfectioninKaifengarea

ZHAIKai-qi,ZHANGLi-na,LIMo-li,QIAOKe

KaifengChildren’sHospital,Kaifeng,Henan475000,China

ObjectiveTo retrospectively analyze the common pathogen data of respiratory virus infection in children in Kaifeng area, and to provide laboratory basis for clinical diagnosis and treatment.MethodsA total of 12755 children with acute respiratory tract infection were enrolled in Kaifeng Children's Hospital from January to December in 2016. Immunoassay test was used to detect the early specific antibody IgM: Chlamydia pneumoniae (CP), Mycoplasma pneumoniae (MP), respiratory syncytial virus (RSV), adenovirus (ADV), influenza virus (IV), and parainfluenza virus (PIV). The positive samples were statistically analyzed, and their age, sex, season, and other differences were compared.ResultsOf the 12755 children, 3636 were positive, and the positive rate was 28.51%. The positive rates of six respiratory pathogens were: MP 15.03%, ADV 11.13%, IV 7.76%, RSV 3.03%, CP 1.24% and PIV 0.4% respectively. The detection rate of respiratory pathogens was relatively high in spring and summer. Children younger than 1 year old had the lowest positive rate, and children aging from 4 to 6 had the highest rate.ConclusionThe common pathogens of respiratory tract infection in children in this region are predominantly MP and ADV, followed by IV. The infection is different in different season, sex and age. The mixed infection of the virus is dominated by MP infection.

respiratory tract infection; virus; detection; clinical analysis

2017-03-06]

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.11.011

1. 475000 河南 開(kāi)封，開(kāi)封市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科 2. 475002 河南 開(kāi)封，開(kāi)封市第二人民醫(yī)院病理科 3. 475000 河南 開(kāi)封，開(kāi)封市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 4. 475000 河南 開(kāi)封，開(kāi)封市中心醫(yī)院輸血科