仇普斌，周娟，郝東升，白娜仁吐雅，李敏，潘振亮

（1.嘉立荷畜牧有限公司，天津 300402；2.天津市畜牧獸醫(yī)研究所，天津 300381）

★奶牛保健

新生犢?？谔阋呙庖咝Ч^察及免疫程序建立

仇普斌1，周娟1，郝東升1，白娜仁吐雅1，李敏1，潘振亮2

（1.嘉立荷畜牧有限公司，天津 300402；2.天津市畜牧獸醫(yī)研究所，天津 300381）

本試驗(yàn)觀察研究了新生犢牛免疫不同口蹄疫三價(jià)疫苗后的抗體變化規(guī)律，試驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)過兩次免疫的新生犢牛口蹄疫O型和亞洲Ⅰ型的抗體效價(jià)和保護(hù)率相對(duì)較高，A型抗體效價(jià)和保護(hù)率較低，在滿6月齡時(shí)需要進(jìn)行第三次免疫。本試驗(yàn)為新生犢牛口蹄疫疫苗免疫程序的建立提供依據(jù)。

犢牛；口蹄疫；免疫；疫苗

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是以牛、豬和綿羊等偶蹄的家畜及野生動(dòng)物為主要感染對(duì)象的高度接觸性病毒傳染病，因其傳播速度快、發(fā)病率高，并可造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失而在世界范圍內(nèi)引起高度重視[1,2]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為A類烈性動(dòng)物傳染病，我國將其列為一類動(dòng)物傳染病[3]?？谔阋卟《竟灿?個(gè)血清型，型間沒有交叉免疫反應(yīng)[4]，極易變異，在我國流行的口蹄疫毒株僅有O型、亞洲Ⅰ型、A型。

目前，撲殺是歐、美、日、韓等發(fā)達(dá)國家防控口蹄疫的唯一方法。我國采取免疫預(yù)防加撲殺相結(jié)合的防制措施。在疫苗質(zhì)量可靠的基礎(chǔ)上，加強(qiáng)疫苗免疫效果監(jiān)測工作，合理制定免疫程序，能夠更好地提升疫苗的免疫效果，有效預(yù)防和控制口蹄疫，減少養(yǎng)殖業(yè)損失。對(duì)新生犢牛僅進(jìn)行口蹄疫疫苗首次免疫不能防止口蹄疫病毒感染，業(yè)界已有共識(shí)，首次免疫一月后再次進(jìn)行加強(qiáng)免疫這一免疫程序也得到了奶牛養(yǎng)殖行業(yè)的認(rèn)可，但有效抗體水平能維持多久的研究報(bào)道較少。本試驗(yàn)選擇健康犢牛，不同來源口蹄疫免疫疫苗后，對(duì)口蹄疫免疫抗體效價(jià)消長規(guī)律進(jìn)行了觀察研究，旨在為犢牛口蹄疫免疫程序的制定提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

隨機(jī)挑選嘉立荷示范奶牛場新生健康犢牛95頭，60日齡斷奶，自由采食飲水，與非試驗(yàn)牛群混合飼養(yǎng)。

1.2 試驗(yàn)用疫苗及免疫方法

兩種口蹄疫A型、O型、亞洲Ⅰ型三聯(lián)苗，來自國內(nèi)不同生物制品公司，命名為疫苗A和疫苗B，二者均在有效期內(nèi)，首次免疫和加強(qiáng)免疫均采用1mL臀部注射，加強(qiáng)免疫于首次免疫后30d進(jìn)行。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物分組

95頭健康犢牛分為兩批進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。49頭注射疫苗A，稱為A組；其余46頭注射疫苗B，稱為B組。

1.4 樣品采集

首次免疫前對(duì)95頭犢牛進(jìn)行尾靜脈采血并分離血清，檢測口蹄疫A型、O型和亞洲Ⅰ型抗體效價(jià)。分別于首次免疫后30d及加強(qiáng)免疫后30d、60d、90d檢測口蹄疫A型、O型和亞洲Ⅰ型抗體效價(jià)。

1.5 檢測方法

采用蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的液相阻斷ELISA試驗(yàn)試劑盒檢測口蹄疫A型、O型、亞洲Ⅰ型抗體效價(jià)，抗體效價(jià)≥1:128為免疫合格[5,6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 犢牛免疫后保護(hù)率變化規(guī)律及不同疫苗差異比較

從表1、圖1可以看出，90日齡新生犢牛如果沒有進(jìn)行口蹄疫疫苗免疫，A型、O型和亞洲Ⅰ型三個(gè)血清型的抗體效價(jià)水平都很低，A和B兩組能達(dá)到抵抗感染（≥1:128）的比例均低于10%，其中A組A型和亞洲Ⅰ型的比例均為0，兩組共同表現(xiàn)為O型≥1:128的比例較高，說明口蹄疫O型的母源抗體更高。

首次免疫后30d，A組口蹄疫A型、O型和亞洲Ⅰ型三個(gè)血清型的抗體效價(jià)合格率分別為16.03%、33.82%、31.90%，B組為0、11.19%、40.42%。試驗(yàn)結(jié)果證明，新生犢牛首次免疫的抗體效價(jià)合格率很難達(dá)到90%以上，所以加強(qiáng)免疫是必不可少的環(huán)節(jié)。

加強(qiáng)免疫后30d，A組口蹄疫A型、O型和亞洲Ⅰ型三個(gè)血清型的抗體效價(jià)合格率分別為82.98%、93.57%、85.33%，B組為49.88%、95.46%、94.74%。試驗(yàn)結(jié)果證明，加強(qiáng)免疫后，抗體效價(jià)合格率大幅增加，接近或超過了90%，但B組的A型抗體效價(jià)合格率與A組有較大差異，因此，疫苗的選擇對(duì)于免疫效果至關(guān)重要。

加強(qiáng)免疫后60d，A組的抗體效價(jià)合格率與加強(qiáng)免疫后30d相比無變化，B組則下降顯著，進(jìn)一步證明疫苗A的穩(wěn)定性要優(yōu)于疫苗B。加強(qiáng)免疫后90d，A、B兩組的口蹄疫A型、亞洲Ⅰ型抗體效價(jià)合格率顯著下降，尤其在A型，兩組均下降到50%以下。相反，兩組O型抗體效價(jià)并無顯著下降。

表1 新生犢牛免疫后抗體效價(jià)合格（≥1:128）比例 單位：%

圖1 新生犢牛免疫前后保護(hù)率變化趨勢圖

2.2 犢牛免疫后抗體效價(jià)變化規(guī)律

疫苗免疫后，牛群平均抗體效價(jià)水平也能很好體現(xiàn)免疫效果好壞。圖2顯示，補(bǔ)免90d后口蹄疫O型平均抗體效價(jià)最高，A、B兩組分別為353和328；亞洲Ⅰ型次之，分別為155和222；A型最低，僅為100和69。

圖2 新生犢牛免疫前后保護(hù)率變化趨勢圖

3 討論

新生犢牛首次免疫口蹄疫疫苗的日齡尚存爭議，研究認(rèn)為，牛接種口蹄疫疫苗的免疫應(yīng)答能力隨著牛年齡的增大而增強(qiáng)，而其他研究人員通過試驗(yàn)證明6月齡初次接種口蹄疫疫苗的無母源抗體犢牛的免疫應(yīng)答能力，與初次接種口蹄疫疫苗的18月齡的成年牛一樣，甚至還優(yōu)于成年牛[7]。兩個(gè)試驗(yàn)結(jié)果雖然大相徑庭，但前提條件都是試驗(yàn)動(dòng)物為無母源抗體干擾的犢牛，說明母源抗體的干擾遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過犢牛年齡的應(yīng)答能力。徐春志等[8]通過試驗(yàn)證明，新生犢牛的母源抗體水平遠(yuǎn)低于飼喂初乳后的抗體水平，該試驗(yàn)飼喂初乳犢牛在7日齡時(shí)母源抗體達(dá)到高峰，至60日齡維持在較高水平，此后口蹄疫抗體迅速降低，至90日齡回落近臨界值。這是由于規(guī)?；膛鐾ǔＴ?0日齡停吃母乳，所以斷乳后母源抗體迅速下降，說明母乳是犢牛獲得高質(zhì)量母源抗體的主要途徑。

首次免疫后抗體效價(jià)有所提高但保護(hù)率和整體效價(jià)水平依然較低，經(jīng)過加強(qiáng)免疫后迅速上升，這是由于首次免疫后所產(chǎn)生的抗體以IgM為主，在體內(nèi)維持時(shí)間較IgG短。加強(qiáng)免疫后60d內(nèi)，試驗(yàn)A組的保護(hù)率和牛群的平均效價(jià)均無顯著下降，這一結(jié)果與賈澤穎等[9]的研究結(jié)論一致。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，口蹄疫三聯(lián)苗的A型免疫效果不佳，在首次免疫30d時(shí)，A型的保護(hù)率和效價(jià)水平都與O型、亞洲Ⅰ型有很大差距，補(bǔ)免后雖然能達(dá)到有效水平，但保護(hù)率和效價(jià)下降迅速。據(jù)付程雄等[10]報(bào)道，免疫工作較好的試驗(yàn)場，犢牛的A型口蹄疫初免的免疫抗體水平非常低，即使補(bǔ)免也未達(dá)到有效保護(hù)率。因此，提高新生犢牛口蹄疫免疫效果尤為重要，若免疫效果不佳，需及時(shí)修改免疫程序，在犢牛出生后6月齡進(jìn)行第二次加強(qiáng)免疫。

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Observation of Immune Effect and Immune Program Established on Newborn Calves

QIU Pu-bin1, ZHOU Juan1, HAO Dong-sheng1, Bainarentuya1, LI Min1, PAN Zhen-liang2
(1.Tianjin Jialihe Livestock Co., Ltd., Tianjin 300402; 2.Tianjin Animal Science and Veterinary Research Institute,Tianjin 300381)

To establish FMD immune program about newborn calves, this study monitored the antibody level which was vaccinated results. Experiment results showed that antibody level and protection rate was high in O and Asia1,which was vaccinated twice, but antibody level and protection rate of A was lower than O and Asia1. The third vaccine was indispensable for the new immune program about newborn calves.

Newborn calves; Foot and mouth disease; Immune; Vaccine

S858.23

A

1004-4264（2017）10-0024-03

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.10.006

2017-01-19

優(yōu)質(zhì)后備奶牛培育關(guān)鍵營養(yǎng)及管理技術(shù)轉(zhuǎn)化與示范（15YFXQN00020）。

仇普斌，男，碩士，主要從事奶牛養(yǎng)殖工作。

潘振亮，男，碩士，長期從事奶牛營養(yǎng)、標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖等方面研究工作。