劉偉，程波，蔣瑞東，任書男，李云章，查斯圖，王軍

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，呼和浩特 010018；2.巴林左旗動物衛(wèi)生監(jiān)督所，赤峰 025450；3.內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，呼和浩特 010021）

★繁殖育種

中西藥物治療奶牛持久黃體的B超影像學(xué)監(jiān)測

劉偉1，程波1，蔣瑞東1，任書男1，李云章1，查斯圖2，王軍3

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，呼和浩特 010018；2.巴林左旗動物衛(wèi)生監(jiān)督所，赤峰 025450；3.內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，呼和浩特 010021）

為應(yīng)用中藥和西藥治療奶牛持久黃體提供理論依據(jù)，本試驗將26頭持久黃體奶牛分為中藥治療組、西藥治療組和陰性對照組，中藥治療組灌服中藥催情散，陰性對照灌服溫性自來水，連續(xù)灌服4d，西藥治療組肌注氯前列醇鈉；應(yīng)用B超對卵巢長寬、子宮角、子宮頸縱徑進(jìn)行測量，每3d進(jìn)行一次，監(jiān)測周期為22d。結(jié)果中藥、西藥物治療組總有效率為70%、90%，兩組相比差異顯著（P<0.05）；與陰性對照組16.7%有效率相比差異極顯著（P<0.01）。從B超影像學(xué)上來看，中、西藥物治療組奶牛持久黃體側(cè)卵巢平均長寬在停藥后均有所降低，但差異不顯著（P>0.05），陰性對照組在整個監(jiān)測周期內(nèi)總體趨勢基本保持不變；中、西藥物治療組奶牛子宮角和子宮頸縱徑在停藥后升高，但差異不顯著（P>0.05），陰性對照組在整個監(jiān)測周期內(nèi)變化相對比較平穩(wěn)。從三組有效率和B超監(jiān)測結(jié)果上來看，中藥催情散對黃體的溶解和子宮機(jī)能的恢復(fù)起到有效作用，西藥氯前列醇鈉對黃體有特異性溶解作用。

奶牛；持久黃體；中藥；西藥；直腸檢查；B超影像學(xué)

不孕癥作為奶牛的四大疾病之一，是影響奶牛繁殖和養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益的主要因素，其中卵巢疾病是導(dǎo)致奶牛不孕的主要原因，而奶牛持久黃體是常見的卵巢疾病[1,2]。持久性黃體可持續(xù)分泌孕酮、抑制卵泡發(fā)育，從而使發(fā)情周期停止循環(huán)而出現(xiàn)乏情現(xiàn)象，導(dǎo)致奶?？諔褧r間及產(chǎn)犢間隔延長，最終降低奶牛場經(jīng)濟(jì)效益[3]。臨床已有中西藥物治療奶牛卵巢疾病的報道[4～6]，但國內(nèi)外應(yīng)用B超影像學(xué)監(jiān)測中西藥物治療奶牛卵巢疾病效果的報道不多。本試驗是在用中西藥物對持久黃體奶牛治療的同時，應(yīng)用B超對卵巢和子宮進(jìn)行連續(xù)跟蹤監(jiān)測，以便為其治療持久黃體的作用機(jī)理提供可靠依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器耗材

50s型 Tringa Vet 獸用便攜式B超儀一臺，配備5.0-7.5MHz 變頻線陣探頭，Pimmed ICAL 公司生產(chǎn)。中藥催情散由淫羊藿、陽起石、肉蓯蓉、菟絲子、當(dāng)歸、川芎、熟地、香附、木香、厚樸、陳皮、甘草等12味中藥組成，本方劑是由《內(nèi)蒙古奶牛不孕癥的病因調(diào)查及中西醫(yī)綜合治療集成》課題組相關(guān)人員根據(jù)中獸醫(yī)理論研制而成，中藥材購自內(nèi)蒙古惠豐堂大藥房連鎖有限公司；西藥氯前列醇鈉注射液由寧波第二激素廠生產(chǎn)，獸藥字（2015）110252445。

1.2 試驗動物

試驗動物由內(nèi)蒙古鄂爾多斯市達(dá)拉特旗解放灘鎮(zhèn)康泰侖農(nóng)牧業(yè)股份有限公司二期牧場提供，結(jié)合繁殖資料，對體況評分在2.75～3.25分、2胎及以上并且在產(chǎn)后60d以上順產(chǎn)的中國荷斯坦牛，采用直腸及B超檢查技術(shù)對卵巢上存有直徑小于2.50cm黃體、間隔7d后檢查黃體依然存在且大小無明顯變化的奶牛作為診斷和納入標(biāo)準(zhǔn)；伴發(fā)其他臨床疾病的作為排除標(biāo)準(zhǔn)[7～9]，最終挑選出26例試驗?zāi)膛！?/p>

2 方法

2.1 試驗分組及給藥

將26頭試驗?zāi)膛７譃橹兴幹委熃M（10頭）、西藥治療組（10頭）和陰性對照組（6頭）。中藥治療組每頭奶牛每天用5L溫性自來水灌服315g（推薦劑量）的催情散粉劑，連續(xù)灌服4d；西藥治療組每頭奶牛肌肉注射0.3mg（臨床劑量）氯前列醇鈉；陰性對照組每頭奶牛每天灌服5L溫性自來水，連續(xù)灌服4d。

2.2 試驗?zāi)膛５腂超影像學(xué)檢查

使用B超對奶牛卵巢及子宮在用藥前1d及用藥后的一個情期（22d）內(nèi)不同時間段進(jìn)行動態(tài)跟蹤掃描，每隔3d測量1次，適時觀察圖像，當(dāng)顯示出卵巢、黃體及子宮清晰圖像后，將畫面凍結(jié)，通過B超儀內(nèi)置電子標(biāo)尺對卵巢、黃體及子宮等指標(biāo)進(jìn)行測量，測量時以各指標(biāo)的最大直徑為標(biāo)準(zhǔn)，最后將B超儲存的圖像傳輸?shù)诫娔X中。

2.3 療效判定

中藥治療組在停藥后30d、西藥治療組在停藥后15d內(nèi)，經(jīng)直腸和B超檢查黃體消退且發(fā)情癥狀明顯可配種者記為治愈；有大卵泡生成未出現(xiàn)發(fā)情者記為顯效；有中等卵泡生成者記為有效；卵巢上有小卵泡生成或黃體未消退者記為無效。（注：小卵泡直徑0.1～0.5cm、中等卵泡直徑0.5～1cm、大卵泡直徑大于1cm）。

2.4 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)用Excel進(jìn)行整理，應(yīng)用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

3 結(jié)果與分析

3.1 奶牛持久黃體B超診斷聲像圖

圖1為一例持久黃體奶牛的B超聲像圖。2016年9月20日產(chǎn)犢，胎次3胎，產(chǎn)后63d無發(fā)情記錄，2016年11月22日直腸及B超檢查，左側(cè)卵巢上有蘑菇狀突起，聲像圖顯示為較強(qiáng)回聲，黃體直徑2.47cm（圖1A），間隔7d，11月30日第二次檢查發(fā)現(xiàn)黃體未消失，直徑為2.44cm（圖1B），確診為持久黃體。

圖1 持久黃體奶牛B超聲像圖

3.2 中西藥物治療奶牛持久黃體的臨床效果

中西藥物治療奶牛持久黃體的效果見表1。中藥治療組和西藥治療組總有效率分別為70%和90%，而陰性對照組總有效率為16.7%。中藥治療組和西藥治療組總有效率相比差異顯著（P<0.05），與陰性對照組相比差異極顯著（P<0.01）。

表1 中西藥物治療奶牛持久黃體的效果

3.3 用藥前后持久黃體奶牛卵巢和子宮的形態(tài)變化

3.3.1 用藥前后持久黃體奶牛有持久黃體側(cè)卵巢長度的變化

表2 用藥前后持久黃體奶牛有持久黃體側(cè)卵巢長度的變化 單位：cm

表3 用藥前后持久黃體奶牛有持久黃體側(cè)卵巢寬度的變化 單位：cm

表4 用藥前后持久黃體奶牛子宮角縱徑的變化 單位：cm

表5 用藥前后持久黃體奶牛子宮頸縱徑的變化 單位：cm

由表2可知，持久黃體奶牛卵巢長度變化中藥和西藥治療組用藥前后差異不顯著（P>0.05），治療組與對照組相比差異也不顯著（P>0.05）；中藥治療組在停藥后1～10d卵巢長度開始下降，之后開始升高，第16天達(dá)到高峰；西藥治療組在停藥后1～7d卵巢長度呈下降趨勢且幅度比中藥治療組大，之后到第13天逐漸升高，第13～16天開始下降；陰性對照組整個監(jiān)測周期內(nèi)卵巢長度變化不明顯。

3.3.2 用藥前后持久黃體奶牛有持久黃體側(cè)卵巢寬度的變化

由表3可知，中藥、西藥組用藥前后卵巢寬度差異不顯著（P>0.05），治療組與對照組相比差異也不顯著（P>0.05）；中藥治療組奶牛持久黃體側(cè)卵巢寬度在停藥后1～10d呈現(xiàn)下降趨勢，之后到16d逐漸升高；西藥治療組在停藥后1～7d呈下降趨勢，之后到第13天逐漸升高；陰性對照組在整個監(jiān)測周期內(nèi)整體變化趨勢不明顯。

3.3.3 用藥前后持久黃體奶牛子宮角縱徑的變化

由表4可知，中藥、西藥組用藥前后子宮角縱徑差異不顯著（P>0.05），治療組與對照組相比差異也不顯著（P>0.05）。中藥治療組子宮角縱徑在停藥后4～22d有小幅度升高趨勢。西藥治療組子宮角縱徑在停藥后1～13d呈現(xiàn)升高趨勢，16～22d呈下降趨勢。陰性對照組在整個監(jiān)測周期內(nèi)變化相對比較平穩(wěn)。

3.3.4 用藥前后持久黃體奶牛子宮頸縱徑的變化

由表5可知，中藥、西藥組用藥前后子宮頸縱徑差異不顯著（P>0.05），治療組與對照組相比差異也不顯著（P>0.05）；中藥治療組子宮頸縱徑在停藥后1～22d呈上升趨勢；西藥治療組子宮頸縱徑在停藥后7～13d開始升高。而陰性對照組在整個監(jiān)測周期內(nèi)變化比較平穩(wěn)。

4 討論

4.1 中西藥治療奶牛持久黃體的作用機(jī)理

中醫(yī)認(rèn)為持久黃體的發(fā)病機(jī)理主要為三方面：第一是腎虛，由腎虛導(dǎo)致的“腎虛-天癸-沖任-胞宮”生殖軸功能紊亂是導(dǎo)致該病發(fā)生的重要原因[10]；第二是肝氣郁結(jié)，夾有腎虛、痰濕和血[11]；第三是氣血 滯所致的黃體功能不全，多因生殖器官病變導(dǎo)致卵巢供血不足而影響黃體功能[12]。根據(jù)中獸醫(yī)辯證理論，催情散中的陽起石、淫羊藿、肉蓯蓉、菟絲子歸腎經(jīng)，起到溫腎補腎、壯陽固精的作用；而當(dāng)歸、川芎、熟地具有補血養(yǎng)血、活血祛 ，調(diào)節(jié)沖任二脈的作用；香附、木香、厚樸、陳皮具有行氣解郁的作用，而甘草具有益氣補中、調(diào)和諸藥之療效，從上述三個發(fā)病機(jī)理出發(fā)，從而達(dá)到治療的目的[13]。淫羊藿中主要成分是總黃酮，具有一定植物性雌激素的作用，雌激素可增加子宮肌對催產(chǎn)素的敏感性，促進(jìn)子宮收縮，有助前列腺素的生成，從而起到溶解黃體的作用[14]。

目前，臨床上常用的西藥為外源性PGF2α類藥物，主要有THAMPGF2α（天然PGF2α的氨基丁三醇鹽類化合物）和氯前列醇鈉（人工合成的PGF2α類似物）[15,16]。在反芻類家畜，黃體退化是由子宮內(nèi)膜上皮產(chǎn)生的PGF2α及黃體分泌的催產(chǎn)素在雌激素和孕酮調(diào)解下相互作用的結(jié)果[17]。有研究表明，PGF2α溶解黃體的機(jī)制也和黃體上表達(dá)的受體以及一些基因表達(dá)的變化有關(guān)，阻斷孕酮的生物合成是溶解黃體的主要生理機(jī)制。PGF2α溶解黃體的關(guān)鍵是DAX-1基因，StAR和LH受體表達(dá)的變化使黃體孕酮的生物合成被抑制[18]。

4.2 中西藥物治療奶牛持久黃體的療效

本試驗，中、西藥物治療組治愈奶牛的平均發(fā)情時間分別為（21.30±1.39）d和（12.40±1.56）d，相差將近8d，且西藥治療組比中藥治療組總有效率高，而且差異顯著（P<0.05），說明中藥催情散對持久黃體僅起到有效作用，而西藥氯前列醇鈉對持久黃體有特異性的溶解作用。

4.3 中西藥物對持久黃體奶牛卵巢形態(tài)的影響

本試驗中，中藥治療組奶牛持久黃體側(cè)卵巢平均長寬與用藥前相比有所下降，甚至恢復(fù)正常大小[9]，但差異不顯著（P>0.05），說明催情散有溶解黃體的作用。西藥治療組奶牛持久黃體側(cè)卵巢平均長寬與用藥前相比體積也有所下降，但差異不顯著（P>0.05）。陰性對照組在整個監(jiān)測周期內(nèi)變化比較平穩(wěn)。而對于陰性對照組表現(xiàn)為顯效奶牛的合理解釋為，隨著產(chǎn)后天數(shù)的增加，奶牛逐漸渡過產(chǎn)奶高峰期，營養(yǎng)得到改善；在B超直腸檢查過程中相當(dāng)于間接按摩奶牛子宮、卵巢等生殖器官，能夠改善局部血液循環(huán)和新陳代謝，刺激相關(guān)激素的分泌，從而促進(jìn)了卵泡的發(fā)育[19,20]。

4.4 中西藥物對持久黃體奶牛子宮形態(tài)的影響

本試驗中，中藥治療組奶牛子宮角和子宮頸平均縱徑與用藥前相比有所增加，但差異不顯著（P>0.05），說明中藥催情散對子宮機(jī)能的恢復(fù)起到一定作用。西藥治療組奶牛子宮角和子宮頸平均縱徑與用藥前相比有所增加，差異也不顯著（P>0.05），但子宮頸相對子宮角變化不明顯，這與前列腺素對奶牛子宮平滑肌有收縮作用而對子宮頸有松弛作用有關(guān)。陰性對照組在整個監(jiān)測周期內(nèi)變化比較平緩。

5 結(jié)論

中藥催情散對持久黃體的溶解和子宮機(jī)能的恢復(fù)起到有效的作用，而西藥氯前列醇鈉對持久黃體具有特異性溶解作用。直腸按摩奶牛生殖器官對持久黃體有一定的輔助治療作用。

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S823.3

A

1004-4264（2017）10-0016-04

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.10.004

2017-04-27

內(nèi)蒙古自治區(qū)科技計劃項目“奶牛不孕癥的病因調(diào)查及中西醫(yī)綜合治療集成（20130224）”。

劉偉（1993-），男 ，漢族，內(nèi)蒙古通遼市扎魯特旗人，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師， 碩士研究生，主要研究方向為臨床獸醫(yī)外產(chǎn)科學(xué)。

李云章（1956-），男，蒙古族，內(nèi)蒙古呼和浩特市人，教授，博導(dǎo)，研究方向為賽馬及奶牛疾病。