楊成梁 毛連梅? 何小紅 魏麗美 唐小鴛 林海棠

宮頸癌在超聲造影檢查中的影像特征及其與ki67 抗原的相關(guān)性研究

楊成梁 毛連梅? 何小紅 魏麗美 唐小鴛 林海棠

目的 探討宮頸癌在超聲造影檢查中的影像特征及其與ki67 抗原的相關(guān)性。方法 選取2015年1月至2016年3月確診為宮頸癌而行手術(shù)治療的患者40例（所有患者均得到術(shù)后病理學檢查證實），均在手術(shù)前接受超聲造影檢查并獲得峰值強度（PI）、顯影時間（AT）及達峰時間（TTP）等超聲造影參數(shù)，并與術(shù)后組織標本進行免疫組化檢查所獲的細胞核增殖抗原（ki67抗原）表達情況作比較分析。結(jié)果 宮頸癌組織的AT和TTP較正常宮頸組織呈現(xiàn)明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；宮頸癌組織PI較正常宮頸組織呈現(xiàn)明顯增大，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）； ki67陽性宮頸癌組織中增強不勻、灌注缺損的出現(xiàn)率較ki67陰性宮頸癌組織增大，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）； ki67陽性宮頸癌組織的AT和TTP較ki67陰性宮頸癌組織明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；ki67陽性宮頸癌組織的PI較ki67陰性宮頸癌組織明顯增大，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論 宮頸癌在超聲造影檢查中有特征性的形態(tài)學改變，并與ki67抗原的表達情況存在一定關(guān)系，可為宮頸癌的臨床診療及預后提供參考依據(jù)。

宮頸癌 超聲造影 病理 細胞核增殖抗原 診斷

宮頸癌的發(fā)生發(fā)展不僅與其內(nèi)部的血流灌注分布情況有關(guān)，還與細胞核增殖抗原（ki67抗原）的異常表達密切相關(guān)［1］。大量研究表明，檢測腫瘤組織的ki67抗原表達情況能有效反映癌細胞的增殖能力，有利于腫瘤組織惡性程度的判定及預后評估［2］。近年來，隨著超聲診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，超聲造影檢查因能動態(tài)觀察和定量分析腫瘤內(nèi)部微小血管血流灌注分布情況而受到臨床重視。本文探討宮頸癌在超聲造影檢查中的影像學特征及其與ki67 抗原的相關(guān)性。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2015年1月至2016年3月本院宮頸癌行手術(shù)治療的患者40例，均經(jīng)術(shù)后病理檢查證實，年齡29～64歲，平均年齡（46. 43±10. 24）歲。所有患者均在手術(shù)前接受超聲造影檢查，并于術(shù)后對宮頸癌組織標本進行免疫組化檢查測定ki67 抗原的表達水平。

1.2 方法 超聲診斷儀型號：IU ELITE（PHILIPS 公司），配有型號為C5-1，頻率為1～5MHz的凸陣探頭；超聲造影劑：聲諾維（Bracco公司）。囑患者取仰臥位，平靜呼吸，首先進行常規(guī)超聲檢查，從多角度多方向觀察宮頸病灶的形態(tài)大小、邊界情況、周邊組織結(jié)構(gòu)關(guān)系情況、內(nèi)部回聲分布情況、血流分布情況。選取宮頸病灶超聲成像的最佳切面（病灶面積最大、血供最豐富的切面），并將病灶影像置于超聲成像的中央位置。啟動超聲造影模式后，將2.4ml的超聲造影劑以團注的方式推入肘前靜脈進行超聲造影檢查，并將超聲造影圖像存儲作后續(xù)觀察分析。測量并記錄感興趣區(qū)的超聲造影參數(shù)：峰值強度（peak intensity，PI，單位：%）、顯影時間（arrival time，AT，單位：s）、達峰時間（time to peak，TTP，單位 s）［3］。每個參數(shù)均重復測量3次，取其平均值。

1.3 ki67抗原測定方法 以10%甲醛溶液固定宮頸癌組織標本，石蠟包埋切片（層厚為3～4μm），應(yīng)用免疫組化SP法測定ki67抗原。ki67 抗原表達陽性：所選視野中細胞核呈現(xiàn)棕黃色染色的細胞數(shù)＞30%；ki67抗原表達陰性：所選視野中細胞核呈現(xiàn)棕黃色染色的細胞數(shù)≤ 30%［4］。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件。計量資料比較，用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料比較，用χ2檢驗。P＜0. 05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸癌組織的超聲造影表現(xiàn) 超聲造影檢查中，所有病灶均得到不同程度的回聲增強，其中病灶增強方式為向心性26例（先從周邊增強，后向中心增強），離心性14例（先從中心增強，后向周邊增強）。病灶增強分布呈不均勻性 24例，呈均勻性16例。患者增強過程中出現(xiàn)灌注缺損28例，未出現(xiàn)灌注缺損12例。即宮頸癌組織超聲造影特征主要是：向心性呈分布不均勻回聲增強，多伴有灌注缺損，見圖1。

圖1 宮頸癌的超聲檢查

2.2 宮頸癌組織的Ki67抗原表達情況 免疫組化檢查中，Ki67抗原表達呈陽性27例，Ki67抗原表達呈陰性13例，見圖2。

圖2 Ki67抗原的免疫組化檢查

2.3 宮頸癌組織與宮頸正常組織的超聲造影參數(shù)比較 見表1。

表1 宮頸癌組織與宮頸正常組織的超聲造影參數(shù)比較（x±s）

2.4 宮頸癌組織在不同Ki67抗原表達情況下超聲造影特征比較 見表2。

表2 不同Ki67抗原表達情況下超聲造影特征比較（x±s）

3 討論

宮頸癌是一種嚴重威脅女性健康的常見婦科腫瘤，其惡性程度及病死率極高，對其早期準確診斷及生物學特征的充分了解，將有助于宮頸癌治療決策和預后判定［5］。超聲檢查因其操作簡便、經(jīng)濟、無創(chuàng)、直觀等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于宮頸疾病的篩診中，而隨超聲技術(shù)的進步，超聲造影技術(shù)的出現(xiàn)進一步豐富超聲檢查的內(nèi)容，能從微循環(huán)水平動態(tài)觀察和定量分析宮頸病灶的血流灌注狀態(tài)，為臨床對宮頸病變的診治提供更豐富客觀的疾病信息［6］。

本資料中，對宮頸癌組織行超聲造影時，其影像改變特征主要是：向心性呈分布不均勻地回聲增強，多伴有灌注缺損，表明應(yīng)用超聲造影檢查能動態(tài)地反映宮頸癌組織內(nèi)部的血流灌注特征以及形態(tài)特征，有助于宮頸腫瘤良惡性質(zhì)的鑒別診斷。原因可能是宮頸癌組織內(nèi)部存在著大量異常增生的微小血管，其病理性的生成方式使其迂曲行走且分布極不均勻，從而導致超聲造影時聲學造影劑的分布呈現(xiàn)不均勻性。宮頸癌的生長速度較快，當腫瘤體積增大與血供營養(yǎng)間失去平衡時，局部癌組織發(fā)生缺血性壞死，而超聲造影時聲學造影劑即不能對該組織區(qū)域進行灌注顯影，從而導致灌注缺損［7］。本資料中，宮頸癌組織的AT和TTP較正常宮頸組織呈現(xiàn)明顯減少，而PI即較正常宮頸組織呈現(xiàn)明顯增大（P＜0.05），表明宮頸癌組織血供異常豐富，血流灌注速度及血流灌注量均與宮頸正常組織間存在明顯區(qū)別，即灌注速度更快，灌注量更大，同時提示應(yīng)用超聲造影血流灌注參數(shù)可定量分析宮頸癌組織的血流灌注情況，使量化分析后的結(jié)果具有更高的精確性和客觀性，更符合現(xiàn)代醫(yī)學研究的要求。這可能與宮頸癌發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ)有關(guān)，宮頸癌的快速生長依賴于其內(nèi)部大量新生的微小動脈血管所形成的極其豐富的微血管網(wǎng)，從而有助于宮頸癌組織內(nèi)部聚集大量的聲學造影劑，使PI增大。異常增生的微小動脈血管壁較薄，僅由血管內(nèi)細胞組成而肌層缺失，其血管通透性較高，且大量動靜脈瘺的存在，進一步加快聲學造影劑對宮頸癌組織區(qū)域的快速灌注顯像，使AT和TTP值減少［8］。

Ki67抗原是一種存在于細胞核中的蛋白質(zhì)成分。大量研究表明，其在多種惡性腫瘤如乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌等細胞的增殖期中均可見大量表達，在靜止期即無表達，且其與多種惡性腫瘤的病理學特征及生物學行為均有著密切的關(guān)系，通過監(jiān)測Ki67抗原的表達情況，不僅可以辨識腫瘤細胞的存在，且可對腫瘤細胞的增殖活性進行評估［9］。本資料中，ki67陽性宮頸癌組織中增強不勻、灌注缺損的出現(xiàn)率較ki67陰性宮頸癌組織增大（P＜0.05），提示宮頸癌組織的超聲造影圖像的特征性表現(xiàn)可能與ki67抗原的表達情況存在一定的關(guān)系。ki67陽性的宮頸癌細胞因具有更強的增殖能力，而常處于活躍的細胞增殖狀態(tài)中，致使宮頸癌生長速度更快，從而刺激癌組織新生微小血管的異常增生速度相應(yīng)加快，加劇癌組織內(nèi)部血管密度分布的不均勻性，同時過快的癌組織生長需要輸送大量相應(yīng)的營養(yǎng)供血作為支持，當異常增生的新生血管不能勝任對其進行充足的營養(yǎng)供血支持時，宮頸癌組織局部勢必出現(xiàn)缺血壞死，更易產(chǎn)生灌注缺失區(qū)。本資料中，ki67陽性宮頸癌組織的AT和TTP較ki67陰性宮頸癌組織明顯減少，而PI即較ki67陰性宮頸癌組織明顯增大（P＜0.05），表明宮頸癌組織的超聲造影血流灌注速度及灌注血流量與ki67抗原的表達有關(guān)。ki67抗原在宮頸癌組織中大量表達，促使宮頸癌組織內(nèi)部異常增生的微小動脈在數(shù)量上進一步加速增加，使PI增大。同時伴有更大量動靜脈瘺的相繼形成，致使聲學造影劑依靠更為豐富的血管網(wǎng)以及更多的異常通道得以更快速灌注癌組織，使AT和TTP減少。

綜上所述，宮頸癌在超聲造影檢查中有著特征性的形態(tài)學改變及血流灌注特征，并與ki67抗原表達情況具有一定的相關(guān)性，可為宮頸癌的臨床診治、治療決策以及預后判定提供有價值的參考依據(jù)。

［1］ 王鑾虹,李俊東． B23和Ki67與宮頸癌患者預后的關(guān)系探討． 河北醫(yī)學,2015,21(1):3-6．

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［3］ 余秀華,錢斌,施紅,等． 超聲造影增強顯像對子宮頸癌血管生成的初步研究． 功能與分子醫(yī)學影像學(電子版),2014,3(l):19-22．

［4］ 徐 濤,羅婷婷,等．P63和Ki67在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中的表達及意義． 交通醫(yī)學,2015,29(5):447-449．

［5］ 劉愛榮,高力英,管玲,等．超聲造影對宮頸癌根治性放療后療效評估研究．甘肅醫(yī)藥,2012,3l(11):819-821．

［6］ 商曉杰,孫秋紅．超聲造影在婦科疾病中的應(yīng)用．醫(yī)學研究雜志,2015,44(6):13-15．

［7］ 楊越波,曾智,張新玲,等．超聲造影在宮頸癌分期診斷中的評價．中國生育健康雜志,2010,21(5):267-269．

［8］ 張金慧,楊宗利,房世保,等．超聲造影在宮頸癌分期中的應(yīng)用．臨床超聲醫(yī)學雜志,2013,15(6):395-398．

［9］ 郭周慶,陳光輝,吳又明,等．TCT結(jié)合DNA定量及Ki67 p16免疫組化聯(lián)合對宮頸癌及其癌前病早期篩查的應(yīng)用研究．國際醫(yī)藥衛(wèi)生導報,2015,21(2):180-182．

Objective To explore the features of cervical cancer in contrast-enhanced ultrasound（CEU）and its correlation with nuclear proliferation antigen（ki67 antigen）. Methods A total of 40 cases（confirmed by postoperative pathology）who had the surgical treatment in patients with cervical cancer were selected during 2015-1 to 2016-3 in our hospital，preoperatively accepted CEU and got peak intensity（PI），arrival time（AT）and time to peak（TTP），compared with ki67 antigen expression of postoperative tissue samples got by immunohistochemical examination.Results AT and TTP in cervical cancer tissue reduced obviously than those in normal cervical tissue（P＜0.05）； PI in cervical cancer tissue increased obviously than that in normal cervical tissues（P＜0.05）. The emergence rate of uneven enhancement，perfusion defect in Ki67 positive cervical cancer tissue increased obviously than those in the ki67 negative cervical cancer tissue（P＜0.05）； AT and TTP in Ki67 positive cervical cancer ki67 decreased significantly than those in negative cervical cancer tissue（P＜0.05）； PI in Ki67 positive cervical cancer tissue increased obviously than that in ki67 negative cervical cancer tissue（P＜0.05）. Conclusion Cervical cancer has the characteristic morphological changes in CEU，and there is a certain relationship with ki67 antigen expression，can provide reference for the clinical diagnosis，treatment and prognosis of cervical cancer.

Cervical cancer Contrast-enhanced ultrasound Pathology Nucleus proliferation antigen Diagnosis

314000 浙江省嘉興市第二醫(yī)院（楊成梁）310016 武警總隊浙江杭州醫(yī)院（毛連梅 何小紅 林海棠 魏麗美 唐小鴛）

*通信作者