云南省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，云南 昆明 650011

氣相色譜法測定康力欣膠囊中丁香酚的含量

張?jiān)苤芴m來國防*

云南省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，云南 昆明 650011

目的建立氣相色譜法測定康力欣膠囊中丁香酚的含量。方法采用HP-Innowax毛細(xì)管柱(30m×0.32mm，0.25μm)，載氣為氮?dú)猓髁?.0 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度230 ℃，柱溫箱溫度190 ℃，F(xiàn)ID檢測器溫度為250 ℃；進(jìn)樣體積為1 μL，分流比10：1。結(jié)果丁香酚在0.049～1.199 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r= 0.9999)，平均加樣回收率為99.2%(RSD為1.8 ，n=9)。結(jié)論該法準(zhǔn)確、高效，可用于康力欣膠囊的質(zhì)量控制。

氣相色譜；康力欣膠囊；丁香酚

康力欣膠囊，由阿魏、九香蟲、丁香等藥材組成，是基于藏族民間藥方開發(fā)的中藥復(fù)方制劑，具有扶正去邪，軟堅(jiān)散結(jié)的功效，主治消化道惡性腫瘤、乳腺惡性腫瘤、肺惡性腫瘤見于氣血淤阻癥者[1-3]。研究表明[4-6]，丁香及其主要成分丁香酚在宮頸癌、前列腺癌、黑色素瘤等疾病的治療中顯示了良好的療效，是康力欣膠囊的重要組成部分，但在現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中無相關(guān)的含量測定項(xiàng)目。因此筆者采用氣相色譜法，測定康力欣膠囊中丁香酚的含量，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Agilent 6890氣相色譜儀(美國Agilent公司)； BP-211D電子天平(德國Sartorius公司)。

1.2 材料 丁香酚對(duì)照品(批號(hào)：110725-201615，含量為99.3%，購中國食品藥品檢定研究院)；康力欣膠囊樣品(云南名揚(yáng)藥業(yè)有限公司，批號(hào)：170201、161202、150803)；無水乙醇為色譜純(德國默克公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 HP-Innowax毛細(xì)管柱(30 m × 0.32 mm，0.25 μm)，載氣為氮?dú)猓髁?.0 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度230 ℃，柱溫箱溫度190 ℃，F(xiàn)ID檢測器溫度為250 ℃；進(jìn)樣體積為1 μL，分流比10：1。

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照品溶液制備 取丁香酚對(duì)照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1mL含丁香酚1.199 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液制備 取本品內(nèi)容物適量，混勻，取約1.0 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇25 mL，密塞，搖勻，稱定重量，避光超聲處理20min(功率250 W，頻率35 kHz)，放冷，再稱定重量，加無水乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 缺丁香陰性對(duì)照溶液制備 取除丁香外的七味藥材，依處方制備缺丁香陰性樣品，按“2.2.2”項(xiàng)下方法，制備缺丁香陰性對(duì)照溶液。

2.3 專屬性試驗(yàn) 分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及缺丁香陰性對(duì)照溶液各1 μL，注入氣相色譜儀，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，記錄色譜圖。供試品色譜圖中呈現(xiàn)與丁香酚對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相同的色譜峰，且與雜質(zhì)峰分離良好，陰性樣品無干擾，該方法專屬性較好。如圖1所示。

2.4 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，用無水乙醇逐級(jí)稀釋，制成系列濃度對(duì)照品溶液，分別精密吸取1 μL，注入氣相色譜儀，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，記錄色譜圖。以質(zhì)量濃度(mg·mL-1)為橫坐標(biāo)X，峰面積為縱坐標(biāo)Y，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果丁香酚在0.049～1.199 mg·mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好(r= 0.9999)，回歸方程為Y= 712.44X- 0.5649。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液1 μL，注入氣相色譜儀，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。計(jì)算丁香酚峰面積的RSD值為0.3 %(n= 6)，儀器精密度良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取批號(hào)為170201的供試品6份，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液。分別精密吸取1 μL，注入氣相色譜儀，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定并計(jì)算。結(jié)果丁香酚平均含量為6.482mg·g-1，RSD為0.7 (n= 6)，重復(fù)性良好。

2.7 加樣回收試驗(yàn) 取批號(hào)為170201的供試品0.5g，共9份，精密稱定，按“2.6”項(xiàng)下測得含量的50%，100%，150%，共3個(gè)水平，分別加入丁香酚對(duì)照品，每水平3份，按“2.2.2”項(xiàng)下方法，制備供試品溶液。分別精密吸取1 μL，注入氣相色譜儀，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定并計(jì)算。結(jié)果丁香酚平均回收率為99.2 %，RSD為1.8(n= 9)，方法準(zhǔn)確性良好。見表 1。

表1 加標(biāo)回收試驗(yàn)

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取批號(hào)為170201的供試品，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12 h進(jìn)樣測定，記錄峰面積，計(jì)算丁香酚峰面積RSD值為0.6 (n= 6)，表明供試品溶液在制備后12 h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.9 樣品含量測定 取康力欣膠囊樣品3批，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別精密吸取1 μL，注入氣相色譜儀，分別按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，測定并計(jì)算。見表 2。

表2 樣品測定結(jié)果 (n= 3)

3 討論

3.1 提取溶劑的選擇 正己烷是丁香酚含量測定的常用提取溶劑[7-8]?？盗π滥z囊由乙醇提取浸膏與藥材細(xì)粉混勻制成，考慮到乙醇與丁香酚混溶[9]，對(duì)藥材浸潤性較好，且操作過程中較正己烷損失少，因此選擇無水乙醇作為提取溶劑。

3.2 提取方法的優(yōu)化 丁香酚含較活潑的酚羥基，光熱條件下易氧化或降解[10]，因此選擇避光超聲作為提取方法。通過不同超聲提取時(shí)間對(duì)丁香酚提取效果的比較，最終確定超聲處理時(shí)間為20min。

3.3 含量測定結(jié)果分析 依處方制法計(jì)算，每1 g康力欣膠囊內(nèi)容物相當(dāng)于丁香藥材0.2 g。含量測定結(jié)果顯示，3批樣品中丁香酚約占丁香藥材的3.4 %～4.6 %(按干燥品計(jì)算)，批間差異較小，質(zhì)量較為穩(wěn)定。

[1] 國家藥品監(jiān)督管理局.國家藥品監(jiān)督管理局國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編：中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分，兒科口腔科腫瘤科分冊[S].2002:398-401.

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QuantitativeDeterminationofEugenolinKanglixinCapsulesUsingGasChromatography

ZHANG Yuanjie ZHOU Lan LAI Guofang*

Yunnan Institute for Food and Drug Control，Kunming 650011，China

ObjectiveTo establish a method for quantitative determination of eugenol in Kanglixin capsules using gas chromatography (GC).MethodsThe analyses were performed on a HP-Innowax capillary column (30 m × 0.32 mm, 0.25 μm) using nitrogen as carrier gas at a flow rate of 2.0 mL·min-1. The temperatures of inlet, oven and FID detector were set at 230 ℃, 190 ℃ and 250 ℃, respectively. The injection volume was 1μL (split ratio 10:1).ResultsThe calibration curve of eugenol showed good linearity (r= 0.9999) within the range of 0.049 mg·mL-1～1.199 mg·mL-1. The average recovery was 99.2 % (RSD= 1.8 %,n= 9).ConclusionThe method was accurate and efficient for quality control of Kanglixin capsules.

Gas Chromatography; Kanglixin Capslues; Eugenol

R927.2

A

1007-8517(2017)18-0034-03

2017-08-22 編輯：鄧麗佳)

張?jiān)? 1984- )，男，漢族，碩士研究生，主管藥師，研究方向?yàn)樗幤窓z驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。E-mail:yx8996@163.com

來國防(1973-), 男，漢族，博士研究生，主任藥師, 研究方向?yàn)樗幤窓z驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。E-mail: 1547592470@qq.com