張凌燕, 王凱莉
(1.西南政法大學(xué), 重慶 401120; 2.重慶市高等學(xué)校物證技術(shù)工程研究中心, 重慶 401120)
傳感器在毒品檢測中的應(yīng)用研究
張凌燕1,2, 王凱莉1
(1.西南政法大學(xué), 重慶 401120; 2.重慶市高等學(xué)校物證技術(shù)工程研究中心, 重慶 401120)
毒品定性定量分析結(jié)果是毒品犯罪分子定罪量刑的重要依據(jù)之一。如何對海量的毒品進(jìn)行快速靈敏的檢測一直是緝毒部門面臨的難題。目前毒品檢測的方法較多,但這些方法最大的缺點(diǎn)是單個樣品檢測周期長,不能對大批樣品進(jìn)行高通量的檢測,并且或存在儀器設(shè)備昂貴、或存在需對樣品進(jìn)行預(yù)處理、或存在不能定量分析等弊端。近些年,國內(nèi)外對新型毒品檢測方法進(jìn)行了研究,如利用懸臂梁、石英晶振、表面等離子共振、熒光、電流等對毒品進(jìn)行檢測的傳感器。這些傳感器能快速、靈敏且高通量的對毒品進(jìn)行定性定量檢測,為毒品檢測提供了新的方向與思路。
傳感器; 毒品檢測; 綜述
毒品問題現(xiàn)已成為重大的社會問題之一,毒品檢測技術(shù)的研究與發(fā)展迫在眉睫。氣相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用被廣泛應(yīng)用于毒品的檢測,但由于需要對樣品進(jìn)行純化和衍生等前處理,使之更適合應(yīng)用于實驗室。因此,尋找具有低檢測限、無需對樣品進(jìn)行預(yù)處理、且能進(jìn)行批量檢測的新方法尤為重要。石英晶振型、電流型、熒光型等傳感器具有特異性、可攜帶性、快速及低成本等優(yōu)點(diǎn),是很好的替代檢測方法。本文綜述了國內(nèi)外懸臂梁、石英晶振型、表面等離子共振型、熒光型、電流型等傳感器在毒品檢測中的應(yīng)用與進(jìn)展。
You-Chen Tsenge等[1]依據(jù)懸臂梁檢測原理研究了一種新型甲基苯丙胺(MA)傳感器。該傳感器利用自組裝原理以巰基丙胺及戊二醛縮合的物質(zhì)為交聯(lián)劑,將甲基苯丙胺抗體anti-MA固定在金及鈦混合壓電晶片上,并將晶片固定于十字支架的懸臂梁上。氦氖激光器、光學(xué)桿杠、四象限探測器組成該裝置的光學(xué)檢測系統(tǒng)。其原理是當(dāng)待測物中的MA抗原與固定在懸臂梁上的抗體結(jié)合后,會導(dǎo)致懸臂梁彎曲變形并產(chǎn)生共振頻率,此時待測物的量可由四象限探測器檢測反射激光的變化確定。該傳感器對MA抗原的檢測范圍為3.4×10-11~3.4×10-10mol/L,由于線性范圍窄,且裝置復(fù)雜,故未有更深入的報道。
石英晶振微天平傳感器由于成本低廉、結(jié)構(gòu)簡單,是一種具有潛力的應(yīng)用儀器。Thomas Frisk[2]實驗小組設(shè)計了一種可在普通環(huán)境中進(jìn)行液體樣品吸附及傳輸?shù)奈C(jī)械界面的石英晶體可卡因傳感器。如圖1所示,該傳感由2 cm×1 cm硅片、聚四氟乙烯塑膠入口連接管、不銹鋼管硅膠管等形成檢測池的底部,其中,作為敏感元件的硅片表面呈現(xiàn)出50 μm高的柱狀微陣列分布特點(diǎn),與可以與電路融為一體的硅組合成的微機(jī)械界面,消除了重復(fù)加樣時的機(jī)械沖擊對石英晶振蕩頻率產(chǎn)生的影響。分別將可卡因抗體、海洛因抗體固定在此柱狀微結(jié)構(gòu)的硅片薄膜上,在非密閉環(huán)境下,含有可卡因或海洛因等抗原的液體通過反應(yīng)池時,與固定的抗體發(fā)生特異性結(jié)合,薄膜質(zhì)量由此變化,引起石英晶振固有頻率變化,根據(jù)待測品標(biāo)準(zhǔn)品的含量與頻率信號變化繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可求出待測可卡因或海洛因的濃度。該傳感器檢測時間短,機(jī)器的體積和質(zhì)量小,成本降低,具有制成便攜式儀器的可能。但由于其穩(wěn)定性易受測試環(huán)境的影響,故近些年對其的研究報道也較少。
圖1 傳感器的俯視圖(頂部)和剖視圖(中部)[2]
利用牛血清白蛋白(BSA)的吸附作用,MA-BSA的結(jié)合物可以物理吸附于傳感器的金薄片上,當(dāng)含有anti-MA的溶液流過此金薄片時,MA-BSA與anti-MA發(fā)生免疫結(jié)合,金薄片上的表面等離子體共振信號隨結(jié)合anti-MA濃度的增加而增加,當(dāng)加入的待測物含MA時,MA將與固定于金薄片上MA-BSA競爭結(jié)合anti-MA,使得能與金薄片上MA-BSA結(jié)合的anti-MA減少,導(dǎo)致表面等離子體共振(SPR)信號明顯降低,該信號的變化與待測物中MA在6.7×10-13~6.7×10-9mol/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。由于是物理吸附,該傳感器穩(wěn)定性差[3]。
Paul P. Dillon等[4]將酶免法與SPR傳感器結(jié)合用于嗎啡-3-葡萄糖醛酸苷(M3G)檢測,該方法首先利用酶免法對系列參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,然后用SPR技術(shù)對M3G進(jìn)行定量檢測。第一步:將M3G(抗原)與卵清蛋白形成的共軛物包被微孔板,然后加入抗體和M3G標(biāo)準(zhǔn)品的混合液,此時,M3G標(biāo)準(zhǔn)品能夠抑制抗體與微孔板上固定的M3G抗原的結(jié)合,該反應(yīng)完成后,再加入酶標(biāo)記的羊抗兔二抗與固定的剩余的M3G結(jié)合,通過檢測標(biāo)記酶的光信號對固定在微孔板上M3G及抗體的量等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。第二步:將M3G與卵清蛋白作為抗原以優(yōu)化條件后修飾芯片表面,然后加入優(yōu)化了量的抗體及M3G標(biāo)準(zhǔn)品(或抗體及M3G待測品),從而對M3G進(jìn)行定量分析。實驗證明,對本實驗裝置的芯片再生后,可重復(fù)使用50~60次,對尿液中M3G的檢測范圍為3.4×10-12~2.2×10-10mol/L,且變異系數(shù)范圍為1.48%~11.24%。
在IngerVikholm-Lundin小組[5]的研究報道中,抗3,4-亞甲基二氧甲基苯丙胺(anti-MDMA)被分割為帶有巰基的菠蘿蛋白酶的Fab片段。利用巰基與金的作用,可將該片段直接固定于金片上,再利用抗原抗體的結(jié)合,將BSA修飾的MDMA作為抗原固定于金片上(A~D),如圖2所示。當(dāng)溶液中有anti-MDMA時,其與固定在金片上的抗原結(jié)合(E),然而,當(dāng)溶液中通入含MDMA的待測品時,該anti-MDMA又脫離金片,成為自由抗體而與待測品中的MDMA結(jié)合(F),利用表面等離子共振的變化可以觀察此抗原抗體的結(jié)合及解離過程,如圖2所示,從而可定量檢測出MDMA,該傳感器的檢測下限可達(dá)1.4×10-10mol/L。
Laura Asturias-Arribas等[6]把單克隆嗎啡抗體(嗎啡單抗)包被的聚合物珠子置于嵌在發(fā)光體/檢測器里的流通池中,將熒光素結(jié)合的嗎啡作為熒光素標(biāo)記半抗原(即熒光素標(biāo)記的嗎啡),采用一步法熒光免疫分析原理。稀釋的尿液樣品與熒光素標(biāo)記的嗎啡混合后,通過流通池中抗體包被的珠子,如果樣品中有非標(biāo)記的嗎啡,將與熒光素標(biāo)記的嗎啡競爭結(jié)合抗體。當(dāng)標(biāo)記的嗎啡與抗體結(jié)合后,珠子表面發(fā)射出可被連續(xù)檢測到的熒光,如果與抗體結(jié)合的待測物多,則與該抗體結(jié)合的熒光素標(biāo)記的嗎啡就少,故通過檢測熒光信號的變化就能確定待測物的量。實驗證明,熒光素標(biāo)記的嗎啡與嗎啡抗體的結(jié)合在數(shù)分鐘內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定,且離解平衡常數(shù)為2.3×10-10。該方法對M3G的檢測范圍為7.0×10-13~1.8×10-10mol/L,分析靈敏度為7.0×10-13mol/L,分析時間為每個樣品3 min。
圖2 表面等離子共振型毒品檢測傳感器工作原理示意圖
近年來,將適配體用于熒光傳感器的研究較多,將4-氨基苯磺酸以電化學(xué)氧化方法結(jié)合在石蠟灌注的石墨電極表面,然后利用磺酸基團(tuán)結(jié)合被三(2,2′-聯(lián)吡啶)釕(Ⅱ)標(biāo)記的適配體,從而制備了可卡因電化學(xué)發(fā)光傳感器[7]。當(dāng)溶液中有可卡因存在時,其與適配體特異結(jié)合,導(dǎo)致三(2,2′-聯(lián)吡啶)釕(Ⅱ)發(fā)生熒光淬滅,電化學(xué)發(fā)光的能力降低,該熒光減少的值與可卡因成比例。該傳感器用于可卡因檢測時,檢測下限可達(dá)1.0×10-11mol/L。此外,該適配體可卡因電化學(xué)發(fā)光傳感器展現(xiàn)出高的再生性能(再生7次,RSD=2.8%)及長期儲存穩(wěn)定性(21天后仍能保持初始熒光的96.8%)。
2011年,Cai Qinhong等人曾報道了一種用于檢測可卡因的電化學(xué)熒光三明治免疫傳感器[8]。該傳感器是將一個單一適配體分成兩個可以獨(dú)自折疊且可以分別與靶目標(biāo)結(jié)合的片段,其中一個片段作為捕獲探針固定于金電極表面,而另一個片段作為檢測探針則用摻雜納米硅的三(2,2′-聯(lián)吡啶釕)標(biāo)記,由于捕獲探針與檢測探針兩個片段之間不易發(fā)生反應(yīng),帶熒光的片段不能結(jié)合在電極上,故電化學(xué)熒光信號很弱。然而當(dāng)待測溶液中有可卡因時,其可誘發(fā)兩個片段發(fā)生強(qiáng)烈結(jié)合,從而使三(2,2′-聯(lián)吡啶釕)固定在電極上,使電化學(xué)熒光信號明顯增強(qiáng),如圖3所示,增強(qiáng)的電化學(xué)熒光度與可卡因濃度的對數(shù)在1.0×10-9~1.0×10-11mol/L范圍內(nèi)呈正比關(guān)系,如圖3所示,檢測濃度下限為3.7×10-12mol/L。
圖3 電化學(xué)熒光度與可卡因濃度關(guān)系[8]
2-氨基-5,6,7-三甲基-1,8-萘啶(ATMND)是一種熒光小分子物質(zhì)。當(dāng)可卡因適體MNS-4.1與ATMND非特異性結(jié)合時,會導(dǎo)致其熒光猝滅。然而當(dāng)溶液中存在可卡因時,可卡因會取代ATMND而與核酸適體發(fā)生特異性結(jié)合,釋放出的ATMND在溶液中發(fā)射熒光而產(chǎn)生一個陡峭的熒光數(shù)值。在此基礎(chǔ)上改變MNS-4.1的序列,組裝成新的可卡因適體(38-GC),它具有降低背景噪聲、提高信號等優(yōu)點(diǎn)。使用38-GC制備的新傳感器,可以在幾秒內(nèi)檢測到濃度低至6.6×10-10mol/L的可卡因,在未稀釋的唾液、尿液和血清樣品中檢測限分別為1.0×10-5mol/L、1.8×10-5mol/L和3.6×10-5mol/L。檢測限比基于目標(biāo)誘導(dǎo)構(gòu)象變化法的適配體可卡因傳感器低50倍[9]。
5.1 一次性電流型傳感器
為了滿足廣大基層檢驗人員以及大批量檢測的需要,有必要研究一次性電流型傳感器。常見毒品搖頭丸主要由亞甲二氧基苯丙胺和與甲基苯丙胺衍生物組成,其中甲基苯丙胺衍生物有3,4-亞甲二氧基苯(MDA)、3,4-亞甲基二氧甲基苯丙胺(MDMA)以及3,4-亞乙基二氧甲基苯丙胺(MDMA)。通過單克隆技術(shù)制備的亞甲二氧基苯丙胺和甲基苯丙胺抗體(anti-MA)可用于亞甲二氧基類相似物的測定,Deirdre B等[10]使用一次性碳絲網(wǎng)印刷電極和辣根過氧化物酶標(biāo)記的電流型免疫傳感器可檢測唾液和尿液中搖頭丸的成分。該傳感器含一個特殊的抗MDA-BSA抗體,該抗體僅對MDA、MDMA等成分發(fā)生特異性反應(yīng),用四甲基聯(lián)苯胺(TMB)作為酶的底物,在+100 mV vs時以Ag/AgCl為參比電極,檢測碳絲網(wǎng)印刷電極上氧化產(chǎn)物從而定量分析待測物。結(jié)果表明,MDA的標(biāo)準(zhǔn)曲線在3.0×10-12~2.0×10-9mol/L濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,在唾液和尿液中檢測限分別為1.8×10-12mol/L和2.0×10-13mol/L。該傳感器操作簡便,無需對血樣、唾液或尿液樣本進(jìn)行稀釋即可檢測。
Laura Asturias-Arribas等[11]報道了碳納米管修飾電極的一次性電流型傳感器。然而,該一次性傳感器易受到可待因、對乙酰氨基酚或者咖啡因的影響,他們的氧化峰可能會重疊而導(dǎo)致假陽性。針對這一問題有兩種方案。第一種方案是使用未經(jīng)修飾的絲網(wǎng)印刷碳電極,用偏最小二倍回歸分析用來解決伏安信號的重疊,第二方案是用碳納米管修飾一次性碳傳感器,用最小二倍回歸法對可卡因產(chǎn)生的伏安電流進(jìn)行定量計算,在可卡因濃度范圍為10~155 μmol·L-1時呈比例關(guān)系,重現(xiàn)性為5.6%(RSD,n=7)。這兩個方案都已成功應(yīng)于可卡因的純度的評價,具有巨大的發(fā)展?jié)摿蛷V闊的應(yīng)用前景。此外,Lindy Murphy等[12]也報道了絲網(wǎng)印刷電極制備的一次性傳感器,該一次性傳感器可以直接用于唾液中鹽酸安非他明的檢測,其檢測濃度下限可達(dá)2.2×10-9mol/L。
5.2 再生型電流型傳感器
吸附型傳感器很難防止產(chǎn)生假陽性,由此極大限制了其在復(fù)雜樣品(如血液)中的應(yīng)用,而抗原抗體特異性免疫反應(yīng)或基于核酸適配體構(gòu)型變化的電流型傳感器能與目標(biāo)物質(zhì)高特異性、高選擇性地結(jié)合,從而避免假陽性。與抗體相比,核酸適配體能夠識別與之相對應(yīng)的靶分子,并形成高親和力的靶分子-適配體復(fù)合物。Brian R. Baker[13]實驗小組報道了一種適配體可卡因電流型生物傳感器。該傳感器首先在金電極上自組裝一層烷基硫醇,通過其醇基將被亞甲藍(lán)標(biāo)記的適配體固定在電極上。在缺乏靶目標(biāo)時,標(biāo)記的適配體僅有三分之一保持完整的雙鏈狀態(tài),剩余的三分之二均是展開的單鏈。當(dāng)溶液中有可卡因靶目標(biāo)存在時,適配體與可卡因形成了三向連接構(gòu)象結(jié)合物,使亞甲藍(lán)暴露于溶液中,電極還原峰電流顯著增加。實驗中選用了分別稱為A1、A2、A3、A4的適配體,結(jié)果表明A1與A4適配體修飾的電極均能檢測人唾沫及其他復(fù)雜且易受污染的樣品中的可卡因,其檢測濃度下限為5.0×10-4mol/L。此外,該E-AB傳感器具有檢測時間短,電極易通過簡單的洗滌再生利用,無酶標(biāo)記故壽命長等優(yōu)點(diǎn)。
H.Tom. Soh[14]研究小組利用微流體技術(shù),研制了微流體E-AB傳感器檢測系統(tǒng)。與傳統(tǒng)的龐大設(shè)備相比,微流體技術(shù)在物質(zhì)運(yùn)輸和擴(kuò)散方面更具優(yōu)勢,精細(xì)加工允許其在微型化流動池中進(jìn)行多電極精確組合,可同時對多個樣品進(jìn)行檢測。該檢測系統(tǒng)由液體輸入、電極基體、液體輸出3部分組成,其中電極基體由1支鉑參比、1支鉑對電極和3支經(jīng)同一種適配體修飾的金工作電極呈線排列而成。當(dāng)存在可卡因時,適配體與可卡因形成三元復(fù)合物,電子媒介體亞甲藍(lán)與電極的距離縮短,電子轉(zhuǎn)移速度由此加快,還原峰電流增大,增加的還原峰電流與血液中的可卡因在1.0×10-5~1.0×10-4mol/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。該系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)在于可流動注射樣品,故可實時、在線檢測可卡因,且3支工作電極可以同時對同一濃度樣品進(jìn)行3次平行檢測,從而分析標(biāo)準(zhǔn)偏差。此外,可同時對多個樣品進(jìn)行檢測,提高檢測效率。
然而,在上述報道中,適配體與靶分子僅是1∶1結(jié)合,限制了信號進(jìn)一步放大,從而影響了檢測靈敏度,因此,需要對檢測系統(tǒng)進(jìn)行放大信號或者降低背景的處理。隨著研究的深入,發(fā)現(xiàn)核酸釋放能夠提高電化學(xué)檢測靈敏度,但該研究面臨的新問題是由于空間位阻的影響,阻止DNA從核酸釋放中脫離。于是Tang Dianping[15]小組經(jīng)過試驗選擇了納米磁性石墨烯作為平臺,制備了硫堇和二茂鐵作為標(biāo)記且利用核酸釋放能進(jìn)行電化學(xué)分析檢測的多通路適配體傳感器。納米磁性石墨烯具有磁晶各向異性、良好導(dǎo)電、大的比表面積及二維結(jié)構(gòu)等性能,可以吸附大量適配體。由于核酸酶及芳香化合物的作用,二茂鐵標(biāo)記的三磷酸腺苷適配體(Fc-P1)與硫堇標(biāo)記的可卡因適配體(Th-P2)被非特異結(jié)合在納米磁性石墨烯表面。固定在電極上的Th-P2和Fc-P1分別出現(xiàn)在不同的峰電位。當(dāng)待測物中三磷酸腺苷(ATP)、可卡因(cocaine)與相應(yīng)的Fc-P1和Th-P2反應(yīng)后形成了ATP/Fc-P1、cocaine/Th-P2復(fù)合物,該復(fù)合物中的cocaine、ATP阻礙了納米磁性石墨烯對適配體的吸附,從而使ATP/Fc-P1、cocaine/Th-P2復(fù)合物脫離納米磁性石墨烯,而脫離納米磁性石墨烯后的ATP/Fc-P1、cocaine/Th-P2復(fù)合物能夠被DNase I剝離出cocaine和ATP,這些剝離出的cocaine和ATP能夠再次進(jìn)攻納米磁性石墨烯上的適配體,導(dǎo)致電極電流顯著減少,此電流的變化與cocaine和ATP呈定量關(guān)系。該傳感器對cocaine、ATP的檢測濃度下限分別可達(dá)1.5 pM和0.1 pM,而且該方法有望制成E-AB傳感陣列,為大批量檢測臨床或法庭科學(xué)中的可卡因毒品的檢測提供可能。
Ali A. Ensafi等[16]研究了基于聚二烯丙基二甲基銨分散多壁碳納米管修飾的石墨電極為工作電極的可待因、嗎啡生物電流型傳感器。該研究利用差分脈沖伏安技術(shù)檢測電化學(xué)氧化信號來檢測電流,但可待因和嗎啡的峰電流位置區(qū)別不明顯,當(dāng)DNA存在時,可待因峰電位負(fù)移,嗎啡峰電位正移,二者的峰電位截然不同,從而可對兩者進(jìn)行有效區(qū)分。實驗證明,該傳感器對血漿、尿液樣本以及藥物制劑中可卡因和嗎啡的檢測濃度下限分別為1.4×10-4mol/L和1.5×10-4mol/L。
Laura Asturias-Arribas等[17]用乙酰膽堿酶與絲網(wǎng)印刷碳電極、四硫富瓦烯共同制備的電極,當(dāng)待測樣品中有硫代乙酰膽堿時,電極的電流響應(yīng)顯著增加。然而,將可待因加入硫代乙酰膽堿中,可待因?qū)σ阴D憠A酯酶有抑制作用,會導(dǎo)致對硫代乙酰膽堿的催化作用降低,電流降低,其中該電流的變化與可待因成比例關(guān)系。該傳感器對可待因的檢測濃度下限可達(dá)2.0×10-5mol/L。
生物酶作為催化劑制備的傳感器,利用酶放大電信號的特點(diǎn)可提高其檢測靈敏度。但酶易失活,酶標(biāo)記電流型傳感器的使用壽命較短。因此需尋找可以替代生物酶的人工酶。Zhang Lingyan[18]等以普魯士藍(lán)和anti-MA修飾電極,利用具電子媒介體及催化功能的普魯士藍(lán)催化過氧化氫的能力,顯著增強(qiáng)了電極電流,提高了檢測靈敏度。當(dāng)待測液中的甲基苯丙胺(MA)與抗體結(jié)合后,電極上的電流信號減弱,減弱的電流與抗原成比例。實驗證明,該傳感器操作簡單、使用壽命長、靈敏度好,且對MA的檢測濃度范圍為1.0×10-8~5.0×10-6mol/L。此外,Satoshi Arimoto等[19]報道了二茂鐵衍射物(CocAP-Fc)共聚DNA適配體修飾金電極的傳感器,其檢測原理為電極表面的CocAP-Fc對可卡因分子進(jìn)行識別,并與之發(fā)生免疫結(jié)合,從而導(dǎo)致電極的構(gòu)象變化。如圖4所示,對該電極進(jìn)行熱處理(70 ℃加熱5 min)后,傳感器的氧化電流隨待測液中的可卡因濃度的增加而增加。
圖4 CocAP-Fc共聚DNA適配體修飾電極的傳感器對可卡因的測定[19]
最新研究發(fā)現(xiàn)可卡因和嗎啡在雙鏈DNA上能夠產(chǎn)生構(gòu)象變化,且這些構(gòu)像變化會導(dǎo)致這兩種化合物產(chǎn)生不同的電化學(xué)氧化信號。Nada F. Atta等[20]報道的三明治電流型傳感器,不但可以檢測人尿液中的嗎啡,還可以同時檢測抗壞血酸和尿酸。
傳感器技術(shù)現(xiàn)被應(yīng)用于許多領(lǐng)域,在法庭科學(xué)領(lǐng)域中也有所應(yīng)用,如傳感器檢測技術(shù)已被應(yīng)用于機(jī)場安檢的爆炸物檢測。但是該技術(shù)仍然存在著諸多弊端,若要在法庭科學(xué)領(lǐng)域進(jìn)行廣泛應(yīng)用需要進(jìn)一步的研究。雖然當(dāng)前對于傳感器技術(shù)的研究仍處于基礎(chǔ)性、應(yīng)用性階段,但是由于其具有低檢測限、批量化、高通量、檢驗靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),傳感器技術(shù)在法庭科學(xué)技術(shù)研究領(lǐng)域中將有更廣闊的應(yīng)用前景。
[1] TSENG Y C,CHANG J S,LIN S,et al.3,4-Methylenedioxymethylamphetamine detection using a microcantilever-based biosensor[J].Sensors & Actuators A Physical,2012,182(8):163-167.
[2] FRISK T,RONNHOLM D,VAN D W,et al.A micromachined interface for airborne sample-to-liquid transfer and its application in a biosensor system[J].Lab on A Chip,2006,6(12):1504-1509.
[3] SAKAI G,NAKATA S,UDA T,et al.Highly selective and sensitive SPR immunosensor for detection of methamphetamine[J].Electrochimica Acta,1999,44(21-22):3849-3854.
[4] DILLON P P,DALY S J,MANNING B M,et al.Immunoassay for the determination of morphine-3-glucuronide using a surface plasmon resonance-based biosensor [J].Biosensors & Bioelectronics,2003,18(2-3):217-227.
[5] VIKHOLM-LUNDIN I,AUER S,HELLGREN A C.Detection of 3,4-methylenedioxymethamphetamine(MDMA, ecstasy) by displacement of antibodies[J].Sensors & Actuators B Chemical,2011,156(1):28-34.
[6] ELDEFRAWI M E,AZER N L,NATH N,et al.A sensitive solid-phase fluoroimmunoassay for detection of opiates in urine[J].Applied Biochemistry and Biotechnology,2000,87(1):25-35.
[7] SUN B,QI H,MA F,et al.Double covalent coupling method for the fabrication of highly sensitive and reusable electrogenerated chemiluminescence sensors[J].Analytical Chemistry,2010,82(12):5046-5052.
[8] CAI Q,CHEN L,LUO F,et al.Determination of cocaine on banknotes through an aptamer-based electrochemiluminescence biosensor[J].Analytical &Bioanalytical Chemistry,2011,400(1):289-294.
[9] RONCANCIO D,YU H,XU X,et al.A label-free aptamer-fluorophore assembly for rapid and specific detection of cocaine in biofluids[J].Analytical Chemistry,2014,86(22):11100-11106.
[10] BUTLER D,PRAVDA M,GUILBAULT G G.Development of a disposable amperometric immunosensor for the detection of ecstasy and its analogues using screen-printed electrodes[J].Analytica Chimica Acta,2006,556(2):333-339.
[11] ASTURIAS-ARRIBAS L,ALONSO-LOMILLO M A,DOMINGUEZ-RENEDO O,et al.Sensitive and selective cocaine electrochemical detection using disposable sensors[J].Analytica Chimica Acta,2014,834(1):30-36.
[12] BARTLETT C A,TAYLOR S,F(xiàn)ERNANDEZ C,et al.Disposable screen printed sensor for the electrochemical detection of methamphetamine in undiluted saliva[J]. Chemistry Central Journal,2016,10(3):1-9.
[13] BAKER B R,LAI R Y,WOOD M C,et al.An Electronic Aptamer-Based Small-Molecule Sensor for the Rapid, Label-Free Detection of Cocaine in Adulterated Samples and Biological Fluids[J].Journal of the American Chemical Society,2006, 128(10):3138-3139.
[14] SWENSEN J S,XIAO Y,F(xiàn)ERGUSON B S,et al.Continuous, Real-Time Monitoring of Cocaine in Undiluted Blood Serum via a Microfluidic, Electrochemical Aptamer-Based Sensor[J]. Journal of the American Chemical Society,2009, 131(12):4262-4266.
[15] TANG D,TANG J,LI Q,et al.Ultrasensitive aptamer-based multiplexed electrochemical detection by coupling distinguishable signal tags with catalytic recycling of DNase I[J].Analytical Chemistry,2011,83(19):7255-7259.
[16] ENSAFI A A,HEYDARI-BAFROOEI E,REZAEI B.Different interaction of codeine and morphine with DNA: a concept for simultaneous determination[J].Biosensors & Bioelectronics,2013,41(1):627-633.
[17] ASTURIAS-ARRIBAS L,ALONSO-LOMILLO M A,DOMINGUEZ-RENEDO O,et al.Screen-printed biosensor based on the inhibition of the acetylcholinesterase activity for the determination of codeine[J].Talanta,2013,111:8-12.
[18] ZHANG L Y,LIU Y J.Label-free amperometric immunosensor based on prussian blue as artificial peroxidase for the detection of methamphetamine[J].2014,806:204-209.
[19] ARIMOTO S,SHIMONO K,YASUKAWA T,et al.Improvement of Electrochemical Response of Cocaine Sensors Based on DNA Aptamer by Heat Treatment[J].Analytical Sciences: the International Journal of the Japan Society for Analytical Chemistry,2015,32(4):469-472.
[20] ATTA N F,GALAL A,HASSAN S H.Electrochemical Sensor for Morphine Based on Gold Nanoparticles/ Ferrocene Carboxylic Acid/Poly (3,4-Ethylene-Dioxythiophene) Composite[J].International Journal of Electrochemical Science,2015,10(3):2265-2280.
(責(zé)任編輯于瑞華)
D918.93
重慶市科委自然科學(xué)基金項目(cstc2016jcyjA0503);重慶市教委自然科學(xué)基金項目(KJ1500111)。
張凌燕(1971—),女,湖南長沙人,博士,教授。研究方向為物證技術(shù)。