葛光巖

【摘要】 目的 研究糖尿病患者與正常人之間以及不同骨量糖尿病患者之間維生素D受體基因型的分布差異及臨床意義。方法 選取56例糖尿病患者作為觀察組， 另選同期體檢的56例健康者作為對(duì)照組。采用聚合酶連反應(yīng)限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)對(duì)兩組進(jìn)行維生素D受體基因型檢測(cè)， 并分析比較不同骨量糖尿病患者不同部位骨密度分布情況， 及VDR基因型與骨量變化的關(guān)系。結(jié)果 維生素D受體基因結(jié)果可分為Aa、AA、aa等3個(gè)型號(hào)。觀察組VDR基因型：Aa型19例（33.93%）， AA型5例（8.93%）， aa型32例（57.14%）；對(duì)照組VDR基因型：Aa型20例（35.71%）， AA型6例（10.71%）， aa型30例

（53.57%）。兩組VDR基因型分布比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。56例糖尿病患者中， 骨量正?；颊?3例（41.07%）， 骨量減少患者15例（26.79%）， 骨質(zhì)疏松患者18例（32.14%）。不同骨量糖尿病患者各部位骨密度均呈下降趨勢(shì)， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病患者VDR基因中， Aa、AA、aa基因各部位骨密度呈下降趨勢(shì)， 不同基因型骨密度比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。骨質(zhì)疏松、骨量減少患者aa基因型頻率明顯高于骨量正?；颊?， 而Aa基因型頻率又低于骨量正常患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 糖尿病患者維生素D受體基因分布對(duì)比健康人群無(wú)明顯差異；而糖尿病患者對(duì)應(yīng)Apal酶切位點(diǎn)維生素D受體基因多態(tài)與患者骨質(zhì)疏松存在必然關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】 骨質(zhì)疏松；糖尿??；維生素D受體基因

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.27.038

糖尿病并發(fā)骨質(zhì)疏松癥在臨床中較為常見， 且骨質(zhì)疏松癥在糖尿病患者中發(fā)生率較高；現(xiàn)目前， 對(duì)糖尿病患者的維生素D受體基因多態(tài)的研究與骨質(zhì)疏松的相關(guān)性， 尚不明確[1]。本次研究， 對(duì)本院2015年12月～2017年2月收治的56例糖尿病患者作為研究對(duì)象， 觀察糖尿病患者與正常人之間維生素D受體基因型的分布差異， 為篩選出糖尿病合并骨質(zhì)疏松患者等高危人群提供依據(jù)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2015年12月～2017年2月收治的56例糖尿病患者為觀察組， 其中男35例， 女21例， 年齡42～75歲， 平均年齡（58.5±16.5）歲；其中1型糖尿病患者24例， 2型糖尿患者32例， 其中骨質(zhì)疏松18例， 骨量減少15例；另選同期本院體檢的56例健康人群作為對(duì)照組， 其中男34例， 女22例， 年齡40～71歲， 平均年齡（55.5±15.5）歲。兩組均自愿參與本次研究。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 ①維生素D基因受體檢測(cè)；引物設(shè)計(jì)、合成：上游引物5， -CAG ATG AGG GAG GAC AGC GAA-3；下游引物5， -GCA ACT CCT GTC GGT CAT GAG TC-3。②全血DNA抽取， 15 g/L抗凝全血250 μl， 抽提兩組人員DNA， 將其置于-20℃環(huán)境中保存。擴(kuò)增產(chǎn)物的限制性內(nèi)切酶酶切， 聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增產(chǎn)物5 μl， 運(yùn)用2.5 U TaqI或5 U Apal酶切， 采用37℃ Apal水浴保溫2 h。反應(yīng)終止后， 產(chǎn)物經(jīng)15 g/L（Apal）瓊脂糖凝膠電泳， 溴化乙啶染色， 采用凝膠圖像分析系統(tǒng)分析。

1. 3 觀察指標(biāo) ①糖尿病患者與健康人群維生素D受體基因分布情況；②不同骨量糖尿病骨質(zhì)疏松患者的維生素D受體基因分布情況分析。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)， 多行多列比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)， 多行多列比較采用秩和檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 VDR基因Apa I酶切結(jié)果 維生素D受體基因結(jié)果可分為Aa、AA、aa等3個(gè)型號(hào)。觀察組VDR基因型：Aa型19例（33.93%）， AA型5例（8.93%）， aa型32例（57.14%）；對(duì)照組VDR基因型：Aa型20例（35.71%）， AA型6例（10.71%）， aa型30例（53.57%）。兩組VDR基因型分布比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2. 2 糖尿病患者不同骨量患者各部位骨密度比較 56例糖尿病患者中， 骨量正?；颊?3例（41.07%）， 骨量減少患者15例（26.79%）， 骨質(zhì)疏松患者18例（32.14%）。不同骨量糖尿病患者各部位骨密度均呈下降趨勢(shì)， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 3 糖尿病患者VDR基因型與骨量變化關(guān)系分析 糖尿病患者VDR基因中， AA、Aa、aa基因各部位骨密度呈下降趨勢(shì)， 不同基因型骨密度比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。骨質(zhì)疏松、骨量減少患者aa基因型頻率明顯高于骨量正常患者， 而Aa基因型頻率又低于骨量正常患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

糖尿病并發(fā)骨質(zhì)疏松癥在臨床中較為常見， 且骨質(zhì)疏松癥在糖尿病患者中發(fā)生率較高；現(xiàn)目前， 對(duì)糖尿病患者的維生素D受體基因多態(tài)的研究與骨質(zhì)疏松的相關(guān)性， 尚不明確。糖尿病骨質(zhì)疏松癥是糖尿病的并發(fā)癥之一， 該病發(fā)病機(jī)制尚不明卻， 可能與鈣、維生素D或胰島素缺乏及遺傳基因等有關(guān)[2]。

目前研究顯示， 雌激素受體、維生素D受體基因等基因多態(tài)性與患者骨密度、骨量存在一定關(guān)系。本次研究顯示， 糖尿病患者與健康人群維生素D受體基因型分布比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。據(jù)有關(guān)報(bào)道顯示， 維生素D受體基因多態(tài)與骨密度之間存在必要聯(lián)系， 維生素D受體基因其對(duì)骨密度的影響是家族遺傳的75%～85%；對(duì)于絕經(jīng)婦女的一般資料顯示：AA、 Aa、aa、基因型分布頻率比較正常女性較高[3-7]。

根據(jù)本次研究對(duì)本院收治的56例糖尿病患者作為研究對(duì)象， 其中骨質(zhì)疏松、骨量減少的糖尿病患者aa基因型頻率明顯高于骨量正常糖尿病患者（P<0.05）， 而Aa基因頻率相比又低于骨量正常糖尿病患者， 因此維生素D受體基因與糖尿病患者骨質(zhì)疏松存在必然關(guān)系。

綜上所述， 糖尿病患者維生素D受體基因分布對(duì)比健康人群無(wú)明顯差異；而糖尿病患者對(duì)應(yīng)Apal酶切位點(diǎn)維生素D受體基因多態(tài)與患者骨質(zhì)疏松存在必然關(guān)系。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2017-05-08]endprint