曹紅云，張曉南，游燕，王鵬，劉慧，和東陽

七葉蓮藥材中5種重金屬及有害元素的測定

曹紅云，張曉南，游燕，王鵬，劉慧，和東陽

目的：建立測定七葉蓮藥材中重金屬及有害元素含量的方法，并應(yīng)用于不同產(chǎn)地的七葉蓮研究，以期為七葉蓮的質(zhì)量控制提供可靠依據(jù)。方法：采用微波消解法進(jìn)行樣品前處理，并用電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測定。結(jié)果：各元素在相應(yīng)范圍內(nèi)線性良好（r＞0.999），精密度好（RSD＜6%，n=6），各元素加樣回收率為78.70%～112.59%。結(jié)論：封閉體系微波消解法進(jìn)行樣品前處理，電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行重金屬及有害元素含量測定，此方法體系簡單、快速準(zhǔn)確，適用于實驗室日常分析。

七葉蓮；微波消解；電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）

七葉蓮為五加科植物密脈鵝掌柴Schefflera elliptica (Blume) Harms的干燥莖、葉。在云南少數(shù)民族民間廣泛有使用，是著名的民族藥材。彝族將七葉蓮稱為“歸手”、傣族稱為“木克買”、佤族稱為“考嘎嘎”、拉枯族稱為“拉嘎”、哈尼族稱為“阿牛牛修”，民間還叫七葉藤、龍爪樹、五爪葉、萬年青、七加皮、漢桃葉、狗腳蹄、八里麻、走馬風(fēng)等[1,2]。七葉蓮性苦味甘，具有祛風(fēng)止痛，舒筋活絡(luò)的功效，對三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛、各種癌癥及手術(shù)后的疼痛等均有良好的療效[1,2]。七葉蓮收載于《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》（1974，1996年版）[3,4]，《云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》（2005年版）[5]，云南省藥物研究所開發(fā)的金品系列產(chǎn)品就是以七葉蓮為主要原料。

七葉蓮療效確切，應(yīng)用廣泛，但對其質(zhì)量控制的研究目前來看還比較薄弱，歷版《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》和《云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》所收載的質(zhì)控手段都非常簡單，對其重金屬及有害元素的控制更是完全沒有涉及。因此，本文參照2015年版《中華人民共和國藥典》四部通則的電感耦合等離子體質(zhì)譜法[6]，探討了微波消解法和電感耦合等離子質(zhì)譜法在測定七葉蓮中重金屬和有害元素的可行性，以期將此先進(jìn)的檢測手段應(yīng)用于七葉蓮藥材的質(zhì)量控制。

1 儀器及試劑

1.1 儀器

101A-2E型鼓風(fēng)干燥箱，聚四氟乙烯罐，AG285型電子天平，Speedwave 4微波消解系統(tǒng)（美國 利曼公司），ICP-MS（電感耦合等離子質(zhì)譜儀，型號：7700X，美國安捷倫公司），Milli-Q超純水發(fā)生器（美國密理博公司）。

1.2 試劑、試藥、對照品、供試品

1000 μg．mL-1鉛（Pb）標(biāo)準(zhǔn)液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心 批號：20150606）、1000 μg．mL-1鎘（Cd）標(biāo)準(zhǔn)液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心 批號：20150615）、1000 μg．mL-1銅（Cu）標(biāo)準(zhǔn)液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心 批號：20150610）、1000 μg．mL-1砷（As）標(biāo)準(zhǔn)液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心 批號：20150616）、1000 μg．mL-1汞（Hg）標(biāo)準(zhǔn)液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心 批號：20150617）、硝酸（優(yōu)級純 蘇州晶瑞），去離子水（自制），金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院 批號：12041612）。

10批七葉蓮樣品均經(jīng)過云南省藥物所究所天然藥物資源研究中心正高級工程師高麗鑒定，為五加科植物密脈鵝掌柴Schefflera elliptica (Blμme)Harms的干燥莖、葉。其產(chǎn)地、批號見表1。

表1 10批七葉蓮藥材產(chǎn)地、批號

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

2.1.1 樣品消解 稱取藥材粉末（過4號篩）約0.3 g，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸8 mL，混勻，浸泡過夜，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解，消解程序見表2。消解完全后，藥液倒入50 mL量瓶中，用少量超純水洗滌消解罐3次，洗液并入量瓶中，加入金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 μg．mL-1）200 μl，用水稀釋至刻度，搖勻，必要時離心，取上清液，即得。同法同時制備樣品空白溶液。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密量取鉛、砷、鎘、銅、汞標(biāo)準(zhǔn)品儲備液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成含鉛、砷、鎘、銅、汞適量的混合溶液，本液應(yīng)臨用配制。

2.1.3 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密量取鍺、銦、鉍單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用水稀釋制成每1 mL各含1 μg的混合溶液，即得。

2.1.4 儀器條件 儀器預(yù)設(shè)方法為ROHs（7700x），等離子體模式設(shè)置為HMI，具體參數(shù)見表2。

表2 電感耦合等離子質(zhì)譜儀測定條件

2.1.5 測定法 測定時選取的同位素為63Cu、75As、114Cd、202Hg和208Pb，其中63Cu、75As以72Ge作為內(nèi)標(biāo)，114Cd以115In作為內(nèi)標(biāo)，202Hg、208Pb以209Bi作為內(nèi)標(biāo)。

儀器的內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣管在儀器分析工作過程中始終插入內(nèi)標(biāo)溶液中，依次將儀器的樣品管插入各個濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液中進(jìn)行測定（濃度依次遞增），以待測元素計數(shù)值與內(nèi)標(biāo)元素計數(shù)值的比率值（3次讀數(shù)的平均值）為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將儀器的樣品管插入供試品溶液中，測定，取3次讀數(shù)的平均值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算得相應(yīng)的濃度。在同樣的分析條件下進(jìn)行空白試驗，扣除空白干擾。

2.2 結(jié)果

2.2.1 5種元素的回歸方程、線性范圍、方法檢出限 將系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)樣，得到各元素的線性方程和相關(guān)系數(shù)。將樣品空白溶液平行測定11次，用檢測限的計算公式計算即得。計算公式為：檢出限=3×sd/m（sd為測試11次的標(biāo)準(zhǔn)偏差，m為標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率），經(jīng)計算，Cu、As、Cd、Hg、Pb的檢測限均能達(dá)到檢測要求，結(jié)果見表3。

表3 5種元素回歸方程、線性范圍、檢出限

2.2.2 精密度試驗

2.2.2.1 儀器精密度

取配制好的混合對照品溶液（Cu 40.00 μg．L-1、As 10.00 μg．L-1、Cd 10.00 μg．L-1、Hg 1.50 μg．L-1、Pb 10.00 μg．L-1），按選定條件進(jìn)樣，連續(xù)進(jìn)樣7針，以計數(shù)值比率和測得濃度計算，RSD值均小于6.0%，結(jié)果表明本法具有良好的儀器精密度，結(jié)果見表4。

2.2.2.2 重復(fù)性試驗

精密稱取同一批號（大理巍山 批號：20100930）的樣品6份，消解定容后按選定方法測定。計算得含量RSD%均小于6.0%，結(jié)果表明本法具有良好的重復(fù)性，結(jié)果見表4。

表4 精密度測定

2.2.3 準(zhǔn)確度試驗 精密稱取6份供試品（大理巍山 批號：20100930），已測含Cu 8.04 mg．kg-1、As 0.16 mg．kg-1、Cd 1.68 mg．kg-1、Hg 0.21 mg．kg-1、Pb 1.52 mg．kg-1，每份約0.3 g，分別加入一定量混合對照品溶液，然后按供試品溶液處理方法同法處理，將處理好的供試品溶液按含量測定方法同法測定，計算回收率，結(jié)果見表5。由結(jié)果可知，回收率在70%～125%之間，RSD在15%以內(nèi)，符合規(guī)定。

表5 加樣回收率測定結(jié)果

2.2.4 樣品測定 采用選定方法測定十個產(chǎn)地七葉蓮樣品中的5種重金屬含量，結(jié)果見表6。

楚雄大姚201208168.32 0.44 1.16 0.15 2.80貴州畢節(jié)201104237.99 0.45 1.07 0.29 3.11

3 討論

鵝掌柴屬植物全世界約200種，分布于兩半球的熱帶地區(qū)。我國約37種，分布于西南部和東南部的熱帶和亞熱帶地區(qū)，云南有31種，在我國福建、廣西、廣東、貴州、臺灣等地亦有分布。廣東、貴州等地還將鵝掌藤、廣西鵝掌柴和鴨腳木的新鮮或干燥根、莖、葉作為藥用。在云南省部份地區(qū)民間還將同屬植物穗序鵝掌柴、球序鵝掌柴、扁盤鵝掌柴、鵝掌柴、小葉鵝掌柴作為“七葉蓮”使用[7,8]。七葉蓮類藥材具有深厚的民間藥用基礎(chǔ)，且分布廣泛，資源豐富，值得深入研究，加強開發(fā)。

用微波消解和ICP-MS測定各元素含量，測定時間短，試劑用量少，檢出限低，準(zhǔn)確可靠，是七葉蓮中重金屬及有害元素測定的可行方法。由測定結(jié)果可以看出，各批次七葉蓮樣品中的鎘元素含量都較高，筆者曾經(jīng)測定過多批其它藥材的重金屬及有害元素含量，其中葉類或含葉量較高的莖葉類藥材鎘含量普遍較高，比如金葉子、露水草等，含量甚至超過帶有泥土的根及根莖類藥材。筆者分析，這可能和植物葉的呼吸作用有關(guān)，通過呼吸作用，葉片富集了大量粉塵，造成了鎘含量較高，是否是因為這個機制造成葉類藥材鎘含量較高，將在我們未來的工作中繼續(xù)探討。

[1] 云南藥物研究所.云南重要天然藥物[M].昆明：云南科技出版社,2006,12:1.

[2] 國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草.第五冊[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1999:5051.

[3] 云南省衛(wèi)生局.云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)[M].廣西:廣西白色印刷廠.1974:6.

[4] 云南省衛(wèi)生局.云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)[M].云南:云南大學(xué)出版.1996:3.

[5] 云南省藥品食品監(jiān)督管理局.云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn).第二冊[M].云南：云南美術(shù)出版社,2005:3.

[6] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典四部[M].中國醫(yī)藥科技出版社,2015:205.

[7] 劉同祥,張艷平.七葉蓮的研究進(jìn)展[J].中央民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2010,19(2):75.

[8] 朱臻榮,張志清,汪昆侖,等.云南七葉蓮資源調(diào)查與生物學(xué)研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2015,36(4):101.

(責(zé)任編輯：胡慧玲)

Determination of five heavy metals and harmful elements in Qiyelian/

CAO Hong-yun, ZHANG Xiao-nan, YOU Yan,WANG Peng, LIU Hui, HE Dong-yang//( Yunnan Institute of Materia Medica, kunming 650111, Yunnan)

Objective:To develop a method to detect fi ve heavy metals and harmful elements in Qiyelian, and apply it to the study of samples from different areas to provide an evidence for the quality control of Qiyelian.Method:The samples were pretreated by microwave digestion and analyzed by inductively coupled plasma mass spectrometry.Result:The linearities of every elements are good (r＞0.999) with good precise (RSD＜6%, n=6). the recoveries of each elements were 78.70%～112.59%.Conclusion:The sample are pretreated by microwave digestion and the content are detected by ICP-MS. The method system is sensitive and accurate, and feasible for fi ve heavy metals content determination of Qiyelian.

Qiyelian; microwave digestion; inductively coupled plasma-mass spectrometry (ICP-MS)

A

1674-926X(2017)03-002-03

云南省科技廳云南特色藥材七葉蓮規(guī)范化種植研究與示范計劃項目（2013CG001）

云南省藥物研究所，云南 昆明 650111

曹紅云，工程師，主要從事中藥分析

Tel:15969499257 Email:caohy612@163.com

游燕，副高級工程師，主要從事中藥分析

Tel:0871-66226009轉(zhuǎn)8201

Email:youwanyan@sohu.com

2016-08-08