任 霖，徐 鑒

·經(jīng)驗(yàn)交流·

原發(fā)性肝癌患者血清骨橋蛋白和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)水平的研究

任 霖，徐 鑒

目的探討血清骨橋蛋白和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在原發(fā)性肝癌患者中的表達(dá)。方法依據(jù)研究對(duì)象的納排標(biāo)準(zhǔn)，選擇84例原發(fā)性肝癌患者作為觀察組(HCC組)，同期選擇30例健康體檢者作為正常對(duì)照組，采集114例研究對(duì)象清晨空腹8 h肘靜脈血，應(yīng)用ELISA方法測(cè)定血清AFP、VEGF、OPN水平。結(jié)果對(duì)HCC組與正常對(duì)照組患者血清AFP、OPN、VEGF水平進(jìn)行比較，HCC組血清AFP、OPN、VEGF水平均明顯高于正常對(duì)照組(P<0.05)。依據(jù)巴塞羅那肝癌分期標(biāo)準(zhǔn)，將84例原發(fā)性肝癌患者分為A期18例、B期27例、C期25例、D期14例，比較4期血清AFP、OPN、VEGF水平，血清AFP、OPN、VEGF水平均呈逐漸升高趨勢(shì)，但血清OPN、VEGF水平升高明顯(P<0.05)。結(jié)論血清VEGF、OPN在原發(fā)性肝癌患者中明顯升高，且隨病情進(jìn)展逐漸升高，可能參與肝癌病情發(fā)展過(guò)程中的癌細(xì)胞異常增生、血管生成、腫瘤轉(zhuǎn)移等。

原發(fā)性肝癌；骨橋蛋白；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

肝細(xì)胞性肝癌(HCC)是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，每年約有500 000人死于肝癌，占我國(guó)腫瘤死因的第2位，惡性程度高、發(fā)展速度快而且預(yù)后差[1]，臨床癥狀隱匿，多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬肝癌晚期。目前研究提示，骨橋蛋白(OPN)廣泛分布于消化系統(tǒng)，經(jīng)檢測(cè)證實(shí)有OPN分布與表達(dá)的消化器官和組織有：胃、肝內(nèi)膽管、膽囊上皮、肝臟的巨噬細(xì)胞。研究證實(shí)，OPN具有顯著的促進(jìn)腫瘤惡化的傾向，被看作是惡性腫瘤生長(zhǎng)浸潤(rùn)的一種血清標(biāo)記物。OPN及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在肝癌的發(fā)病、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移機(jī)制中發(fā)揮著不同程度的促進(jìn)作用[2-3]。本研究通過(guò)檢測(cè)原發(fā)性肝癌患者血清中OPN及VEGF水平，探討其在原發(fā)性肝癌發(fā)病過(guò)程中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：2012年1月-2016年6月期間，在銀川市第一人民醫(yī)院感染疾病科門(mén)診及住院治療患者及肝膽外科、消化內(nèi)科住院治療患者中，收集明確診斷為乙肝相關(guān)性原發(fā)性肝癌患者84例作為研究對(duì)象。另選擇30名同期健康體檢者為對(duì)照組，其各項(xiàng)肝炎病毒學(xué)檢測(cè)指標(biāo)均為陰性，肝功能血清檢查在正常范圍之內(nèi)，其中男性17例，女性13例，平均年齡(40.6±8.4)歲。84例乙肝相關(guān)性原發(fā)性肝細(xì)胞癌的患者，診斷符合原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)[2]的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男性52例，女性32例，平均年齡(46.5±7.9)歲。2組研究對(duì)象的性別、年齡等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 血清OPN、VEGF水平的檢測(cè)：采集30例正常對(duì)照組及84例入組肝癌患者空腹8 h以上肘靜脈血5 mL，采集后3 000轉(zhuǎn)離心8 min，血清置-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆茫瑧?yīng)用ELISA測(cè)定血清AFP、OPN、VEGF水平。

2 結(jié)果

2.1 HCC組與正常對(duì)照組患者血清AFP、OPN、VEGF水平的比較：HCC組血清AFP、OPN、VEGF水平均明顯高于正常對(duì)照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 HCC組與正常對(duì)照組患者血清AFP、OPN、VEGF水平的比較

2.2 84例HCC患者巴塞羅那分期后血清AFP、OPN、VEGF水平的比較：依據(jù)巴塞羅那肝癌分期標(biāo)準(zhǔn)，將84例原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行分組：A期18例，B期27例，C期25例，D期14例，比較4期血清AFP、OPN、VEGF水平發(fā)現(xiàn)，血清AFP、OPN、VEGF水平隨肝癌病情進(jìn)展而呈逐漸升高趨勢(shì)，其中血清OPN、VEGF水平升高明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 84例HCC患者巴塞羅那分期后血清AFP、OPN、VEGF水平的比較

3 討論

原發(fā)性肝癌(HCC)是一種惡性程度極高的腫瘤，其病因以病毒性肝炎感染為主，在我國(guó)仍呈現(xiàn)較高的發(fā)病趨勢(shì)，其高惡度、易轉(zhuǎn)移已經(jīng)成為肝癌治療領(lǐng)域的一大難題。多數(shù)患者首次就診發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬腫瘤晚期，部分患者即使確診及時(shí)并行根治性手術(shù)切除治療，但其遠(yuǎn)期預(yù)后仍較差。復(fù)發(fā)、侵襲和轉(zhuǎn)移是影響肝癌預(yù)后的重要因素。有研究表明，肝癌的轉(zhuǎn)移和侵襲涉及多個(gè)基因和多個(gè)因子，如甲胎蛋白(AFP)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、骨橋蛋白(OPN)等，而甲胎蛋白主要由肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞和卵黃囊細(xì)胞在胚胎期合成，當(dāng)非妊娠狀態(tài)的成人肝細(xì)胞受損后，肝臟干細(xì)胞可進(jìn)一步分化為肝細(xì)胞和膽管細(xì)胞，其中肝細(xì)胞的子代有合成、分泌AFP的能力，也有發(fā)生變異進(jìn)展為腫瘤細(xì)胞的可能性[3]，AFP的異常升高常被應(yīng)用于慢性肝病相關(guān)性HCC的普查和診斷，是一種較為特異的血清標(biāo)志物。本研究也證實(shí)原發(fā)性肝癌患者血清AFP水平比健康體檢者顯著升高，提示肝癌腫瘤細(xì)胞異常合成、分泌AFP，AFP在臨床上廣泛應(yīng)用于HCC的普查和診斷。

各界專(zhuān)家研究認(rèn)為，腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移主要是腫瘤血管的不斷再生，這是其進(jìn)展的重要步驟。腫瘤血管生成是一個(gè)多種因子、多種基因介入的歷程，腫瘤細(xì)胞可分泌多種加快腫瘤進(jìn)展、促進(jìn)腫瘤血管形成的細(xì)胞因子[4-5]。原發(fā)性肝癌主要與肝細(xì)胞癌變有關(guān)，其惡性程度高、易轉(zhuǎn)移、病情進(jìn)展快，主要原因之一為肝臟腫瘤局部具有豐富的血供，可分泌、釋放多種細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子可加快腫瘤的進(jìn)展、促進(jìn)腫瘤血管的形成，其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、骨橋蛋白(OPN)是目前臨床研究較為熱門(mén)的促腫瘤血管生成細(xì)胞因子。研究顯示，肝癌患者血清VEGF的主要作用為：①對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有促進(jìn)增殖的作用；②可明顯增加血管的通透性；③促進(jìn)血管再生所需的支持物如細(xì)胞因子等不斷生成；④抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡過(guò)程[6]。骨橋蛋白(OPN)在肝癌中有不同程度的表達(dá)，在肝癌的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后中扮演重要角色，在肝癌中的意義日益受到研究者的關(guān)注。肝癌組織中OPN不同程度的表達(dá)與肝癌包膜完整性有顯著相關(guān)性，提示OPN可能有促進(jìn)肝癌細(xì)胞發(fā)生肝內(nèi)轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)的作用[7]。

本研究結(jié)果顯示，HCC組血清VEGF、OPN水平較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.05)，與目前研究結(jié)果一致，提示腫瘤細(xì)胞異常增生，肝癌細(xì)胞合成、分泌釋放大量VEGF、OPN，且隨原發(fā)性肝癌病情的進(jìn)展呈進(jìn)行性升高趨勢(shì)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示VEGF、OPN可能參與肝癌病情發(fā)展過(guò)程中的細(xì)胞增生、血管生成、腫瘤轉(zhuǎn)移等[8-9]，與目前研究結(jié)果一致。肝癌實(shí)體瘤的生物學(xué)特點(diǎn)決定了它對(duì)豐富血管的依賴(lài)性，多項(xiàng)研究表明在肝癌組織中OPN、VEGF表達(dá)水平明顯增高，OPN、VEGF的表達(dá)與肝癌組織分化程度密切相關(guān)，肝癌患者血清中VEGF含量與其TNM 分期呈正相關(guān)[10]。VEGF在肝臟腫瘤組織中的分泌表達(dá)較肝硬化和正常肝組織中均明顯增高，其對(duì)肝臟腫瘤組織的作用主要是促進(jìn)腫瘤血管形成、促使腫瘤細(xì)胞的血液供應(yīng)進(jìn)一步豐富、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的逐漸浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移。肝癌惡性度高和預(yù)后差，與OPN、VEGF等細(xì)胞因子的高表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)血管的生成、浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。血清高水平OPN、VEGF是肝癌患者不良預(yù)后因素，也可作為評(píng)估肝癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測(cè)指標(biāo)，可作為判斷肝癌侵襲能力、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的指標(biāo)[11]。

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10.13621/j.1001-5949.2017.09.0824

寧夏銀川市第一人民醫(yī)院，寧夏 銀川 750001

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2017-03-14責(zé)任編輯王凱榮