祁 飛，張晨光，馬 悅

（石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，河北 石家莊 050035）

非洛地平緩釋片體外多p H溶出方法建立的研究

祁 飛，張晨光，馬 悅

（石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，河北 石家莊 050035）

目的建立一種模擬體內(nèi)胃腸道pH的體外溶出方法。方法 以非洛地平緩釋片作為研究對象，考察自制片與原研參比片在不同溶出條件下的體外釋放行為，并以 f2因子作為評價指標。結(jié)果 在pH ＝1．2和pH＝6．5的單一溶出介質(zhì)中，自制片與參比片之間的 f2因子均小于50；以pH調(diào)節(jié)劑改變?nèi)艹鲞^程中的介質(zhì)的pH后，二者體外釋放行為均符合peppas方程，f2值為61．1。結(jié)論 所建立的模擬胃腸道pH的緩釋片體外溶出方法能更準確地模擬藥物的釋放行為，與傳統(tǒng)的溶出方法相比，具有更高的科學(xué)性和合理性。

非洛地平緩釋片；體外溶出；酸堿度

Abstract：Ob jective To establish an in vitro dissolution method to stimulate the gastrointestinal pH in vivo．M ethods Felodipine Sustained Release Tablets were taken as the research object to investigate the in vitro release behavior of the self－made tablets and the original tablets in different dissolution conditions，and f2factor was taken as the evaluation index．Resu lts In the single dissolution medium of pH＝1．2 and pH＝6．5，the f2factor between the self－made and the reference tablets was less than 50．But after the pH of the medium in the process of dissolution was changed with the pH adjuster；the release equation of the two were both in accordance with the peppas equation，and the f2value was 61．1．Conclusion The method of in vitro dissolution of simulated gastric gastrointestinal pH can simulate the release behavior of drugs more accurately，and more scientific and reasonable than traditional dissolution method．

Key words：Felodipine Sustained Release Tablets；in vitro dissolution；pH

體外溶出試驗是評價固體制劑質(zhì)量的一種重要手段，也是建立體內(nèi)外相關(guān)性的一個重要數(shù)據(jù)基礎(chǔ)[1]，是預(yù)測口服固體制劑體內(nèi)釋藥行為的依據(jù)[2]。隨著仿制藥一致性評價項目的不斷開展，溶出條件和方法的建立越來越引起人們的關(guān)注，科學(xué)、準確的體外溶出度方法的建立，對于仿制藥的質(zhì)量控制和人體生物等效研究都具有重要意義。目前，體外溶出方法多采用不同pH條件下考察片劑的溶出行為，但片劑在體內(nèi)的崩解、溶出和吸收是一個連續(xù)的過程，具有時序性。藥物在胃腸道內(nèi)的pH環(huán)境是隨時間不斷變化的。非洛地平的化學(xué)名為2，6－二甲基 －4－（2，3－二氯苯基）－1，4－二氫 －3，5－吡啶二甲酸甲乙酯，為新一代鈣離子阻滯劑，對各種類型的高血壓均有較好的療效[3－4]。1995年，阿斯利康制藥公司的非洛地平緩釋片(商品名波依定)上市，自上市以來表現(xiàn)出良好的臨床療效，截至2015年，所帶來的經(jīng)濟價值近20億美元。近年來，高血壓的發(fā)病率逐年提高，該藥的市場仍有廣闊前景。作為目前高血壓的臨床一線用藥，長效、穩(wěn)定的釋放特性是實現(xiàn)仿制品與原研產(chǎn)品體內(nèi)生物利用度一致的保證[5]。因此，本研究中以非洛地平緩釋片為研究對象，建立一種模擬胃腸道pH變化的體外溶出方法，評價自制片的體外溶出行為，并以波依定作為參比制劑，比較該溶出方法與傳統(tǒng)單pH溶出方法的差異。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

Elite8型溶出儀（Hanson公司）；ZKT－7F型脫氣儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；MSA 224A－CE型和BS 200S－WEI型天平（Sartorius公司）；FE20型 pH計（Mettler Toledo公司）；2695－2998型高效液相色譜儀（PDA，Waters公司）。

1．2 試藥

磷酸二氫鈉（AR）、吐溫80（AR）、氫氧化鈉（AR），均為國藥集團化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品；無水磷酸氫二鈉（AR）、鹽酸（AR）、磷酸（AR），均為天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品；乙腈（HPLC）、甲醇（HPLC），均為默克集團產(chǎn)品；非洛地平原料藥（99．2%，浙江蘇泊爾制藥有限公司）；非洛地平緩釋片（批號為161119，自制）；波依定（批號為1507016，無錫阿斯利康制藥有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2．1 溶出介質(zhì)及pH調(diào)節(jié)劑的配制

Ⅰ號溶液：準確稱取25 g吐溫80，在不斷攪拌下，緩慢加入到4 L脫氣水中，再加入45mL鹽酸，并不斷緩慢攪拌至吐溫80完全溶解，定容至5 L，即得。

Ⅱ號溶液：準確稱取25 g吐溫80，在不斷攪拌下，緩慢加入到4 L脫氣水中，并不斷緩慢攪拌至吐溫80完全溶解，定容至5 L，即得。

Ⅲ號溶液：準確稱取25 g吐溫80、24．8 g磷酸氫二鈉、14 g磷酸二氫鈉，不斷攪拌下緩慢加至4 L脫氣水中，并不斷緩慢攪拌至吐溫80完全溶解，定容至5 L，即得。

Ⅳ號溶液：稱取10 g氫氧化鈉，在不斷攪拌下，緩慢加入100m L脫氣水中，即得2．5mol／L氫氧化鈉溶液。

將上述Ⅳ號溶液稀釋，得Ⅴ號1mol／L氫氧化鈉水溶液、Ⅵ號0．1mol／L氫氧化鈉水溶液。其中Ⅳ～Ⅵ號溶液作為pH調(diào)節(jié)劑。

2．2 溶出條件

人體胃腸液pH范圍為1．2～6．8，本研究中以Ⅰ號溶液作為基礎(chǔ)溶出介質(zhì)，模擬人體胃液環(huán)境，Ⅲ號溶液作為終點溶出介質(zhì)，模擬小腸液環(huán)境。溶出方法為籃法；溶出介質(zhì)體積 500 mL；轉(zhuǎn)速 100 r／min；取樣時間為1．00，1．50，2．00，2．50，3．00，3．50，3．75，4．75，5．75，6．75，7．75，8．75，9．75，10．75，13．75 h；于規(guī)定時間點取樣，取樣體積5 mL，Ⅱ號溶液補液5 mL，并以pH調(diào)節(jié)液調(diào)整溶出介質(zhì)pH。另分別以Ⅰ號和Ⅲ號溶液作為溶出介質(zhì)，考察自制片和參比片的體外溶出度，取樣時間為1，2，4，6，7，8，10，12 h。

2．3 樣品處理方法

不同時間點樣品，過0．22μm濾膜，續(xù)濾液采用高效液相色譜法進行含量測定。色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18柱（150mm×4．6mm，5μm）；檢測波長：254 nm；柱溫：25℃；流速：2 m L／min；進樣量：20μL。采用外標一點法計算樣品中非洛地平含量。

2．4 溶出度計算和評價

自制片與參比片的累積釋放百分率計算公式如下：

式中，F(xiàn)i為第 i次累積釋放百分率，Ci為第 i次取樣時釋放介質(zhì)中非洛地平含量（μg／m L），V為釋放介質(zhì)體積（m L），S為取樣體積（m L），G為標示量（mg）。

采用 f2因子法評價自制片與參比片波依定的體外釋放差異。計算公式如下：

式中，n為測試的點數(shù)，Rt和 Tt分別為在 t時間點時參比制劑和受試制劑的平均累積溶出百分率。

2．5 改pH條件下體外溶出結(jié)果

自制的非洛地平緩釋片和參比片（波依定）在不同條件下的累積釋放度測定結(jié)果見表1。對釋放結(jié)果進行擬合，擬合方程見表2。自制片與參比片在此溶出條件下的溶出行為均符合Peppas方程，說明二者的體外溶出行為一致，即藥物在骨架中，一部分借助濃度梯度擴散出來，同時緩釋片自身也在溶蝕，從而加速了藥物的釋放。

表1 非洛地平緩釋片在不同pH溶出介質(zhì)中的累積釋放度（n＝6）

2．6 溶出曲線比較

不同溶出介質(zhì)中自制片與參比片的溶出曲線見圖1。以波依定為參比制劑，計算各個溶出條件下的 f2因子值。結(jié)果溶出介質(zhì)為0．5%吐溫，pH分別為1．2，6．5及介 于 1．2～6．5之 間 時 f2值 依 次 為 48．64，29．69，61．10?？梢?，不同溶出條件下，自制片與參比片 f2因子相差較大，且同一處方在pH＝1．2和pH＝6．5條件下與參比制劑相比溶出趨勢相反。采用更改溶出介質(zhì)pH的溶出方法后，自制片 f2因子為61．1，大于50，說明本制劑與參比片相比體外溶出無顯著性差異。

3 討論

文獻報道，人胃液的pH為1．2～2，正常人空腹狀態(tài)藥物在胃內(nèi)的滯留時間為0～2 h[1，6－7]；十二指腸pH為2．5～4．5，藥物滯留時間較短，約為1 h；空腸pH為4．5～6．5，藥物滯留時間較長[8]。本試驗中，pH變化范圍和取樣時間均是參考上述藥物在人體胃腸道中的轉(zhuǎn)運狀態(tài)而確定，可在一定程度上反映藥物在人體內(nèi)的吸收過程。

表2 自制片與參比片體外釋放擬合方程

圖1 自制片與參比片在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線

f2相似因子法是體外溶出試驗中較具有代表性的評價方法[9]，計算過程簡單、結(jié)果可靠，是目前公認的評價藥物制劑體外釋放行為的相似性的手段[10－11]。本試驗中，在單獨pH介質(zhì)中，自制片與原研片的 f2值均小于50，且與原研制劑相比，2種條件下的溶出趨勢截然相反，導(dǎo)致處方調(diào)整困難。當溶出介質(zhì)的pH隨時間改變后，f2值大于50，且二者的溶出差異主要體現(xiàn)在較高pH范圍內(nèi)，這就為后續(xù)的處方調(diào)整提供了依據(jù)。

本研究中以非洛地平緩釋片為研究對象，建立了模擬人體胃腸道pH變化的體外溶出方法。試驗結(jié)果表明，與單一pH的溶出介質(zhì)相比，該溶出方法更能體現(xiàn)制劑的釋放特性，可為仿制藥的處方設(shè)計和調(diào)整提供更科學(xué)、合理的數(shù)據(jù)，有利于提高仿制藥與原研產(chǎn)品質(zhì)量和療效的一致性。

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Estab lishm ent of in Vitro M u lti－pH Dissolution M ethod for Felodipine Sustained Release Tab lets

Qi Fei，Zhang Chenguang，Ma Yue
（Shijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co．，Ltd．，Shijiazhuang，Hebei，China 050035）

R965.2；R972+.4

A

1006-4931(2017)18-0008-03

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．18．003

2017－04－01)

祁飛（1981－），女，大學(xué)本科，工程師，研究方向為藥品工藝，（電子信箱）53396780＠qq．com。