閆斌,于躍利,韓麗紅

1.包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院普外二科，內(nèi)蒙古包頭 014010；2.包頭醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室，內(nèi)蒙古包頭 014060

*論著*

p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織中的表達(dá)及意義

閆斌1,于躍利1,韓麗紅2

1.包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院普外二科，內(nèi)蒙古包頭 014010；2.包頭醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室，內(nèi)蒙古包頭 014060

目的 探討磷酸化雷帕霉素靶蛋白 (p-mTOR)、p-4EBP1及p-S6K1蛋白的表達(dá)水平與胃癌常見臨床病理因素的關(guān)系。 方法 選擇2014年3月—2016年6月在包頭市腫瘤醫(yī)院行手術(shù)切除的60例胃癌患者為觀察組，對(duì)照組為癌旁組織(腫瘤邊緣5 cm處)胃組織40例。采用免疫組化的方法檢測(cè)60例胃癌組織及40例癌旁胃組織中p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1的表達(dá)情況。結(jié)果p-mTOR在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為36.7%和10.0%，p-4EBP1在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為80.0%和60.0%，p-S6K1在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為26.7%和10.0%。p-mTOR、p-4EBP1和p-S6K1在胃癌組織中的表達(dá)水平高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織中過度表達(dá)可能是胃癌發(fā)生的重要機(jī)制之一。

胃癌；磷酸化雷帕霉素靶蛋白；4E結(jié)合蛋白1；磷酸化核糖體S6蛋白激酶1；免疫組織化學(xué)法

胃癌是來源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，胃癌是全球發(fā)病率第5位的惡性腫瘤，致死率僅次于肺癌、肝癌居第3位。胃癌的治療措施包括手術(shù)、化療、放療、內(nèi)分泌治療及生物靶向治療等，其中手術(shù)結(jié)合化學(xué)藥物治療是胃癌治療的最佳方案。當(dāng)今醫(yī)療技術(shù)水平的不斷提升，胃癌發(fā)生及發(fā)展相應(yīng)分子生物學(xué)機(jī)制，日益成為臨床研究人員關(guān)注之重點(diǎn)，哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是近些年發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)翻譯、核糖體合成及細(xì)胞內(nèi)參當(dāng)中一種十分重要的生物學(xué)行為[1]。該次研究通過選取 2014年 3月—2016年6月在包頭市腫瘤醫(yī)院診治的60例胃癌患者，就mTOR信號(hào)通路與胃癌組織相關(guān)性予以分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

觀察組為2014年3月—2016年6月在包頭市腫瘤醫(yī)院行手術(shù)切除的60例胃癌患者，于手術(shù)前均未采用化療及放療經(jīng)歷，且均為首次手術(shù)，收集胃癌組織、癌旁組織(腫瘤邊緣4 cm處)；對(duì)照組為癌旁組織(腫瘤邊緣5 cm處)胃組織40例。取其組織，均防止于液氮罐內(nèi)，實(shí)施冷凍保存。所選取觀察組胃癌患者中，男性患者為37例，女為23例，年齡39～75歲，平均年齡為48.8歲，病程1～5年，患者均經(jīng)相關(guān)病理學(xué)診斷確診病癥類型。對(duì)照組患者男性患者為27例，女為13例，年齡42～71歲，平均年齡為45.6歲，病程1～5年。兩組患者性別、年齡、病程等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1蛋白的檢測(cè)方法采用免疫組化法：一抗p-mTOR(Bioworld Technology,BS4706)、P-S6K1(PR-1281P）、P-4EBP1(bs-3018R），一抗稀釋度分別為 1:100、1:100、1:50。二抗:HRP標(biāo)記抗兔二抗。pmTOR、p-4EBP1和p-S6K1均以胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，以0.01 mol/L PBS代替一抗作為陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理所得數(shù)據(jù)，彩用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示計(jì)量資料，t對(duì)其實(shí)施檢驗(yàn)，采用直線相關(guān)分析兩因素的相關(guān)性，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

p-mTOR在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為36.7%和10.0%，p-4EBP1在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為80.0%和60.0%，p-S6K1在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為26.7%和10.0%。p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織當(dāng)中相應(yīng)表達(dá)水平高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。在胃癌中，p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1的染色陽性部分主要集中于胃癌細(xì)胞的胞漿部分，成棕色、彌漫性的分布于細(xì)胞胞漿當(dāng)中，在對(duì)照組的胃癌旁組織中，染色的陽性部分主要集中于細(xì)胞胞漿，呈棕色如圖1、圖2、圖3）。

表1 p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1表達(dá)情況

圖1 p-mTOR在胃癌旁組織及胃癌組織中的表達(dá)

圖2 p-4EBP1在胃癌旁組織及胃癌組織中的表達(dá)

圖3 p-S6K1在胃癌旁組織及胃癌組織中的表達(dá)

3 討論

相關(guān)報(bào)道顯示[2-6]，mTOR信號(hào)通路與乳腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌等多種惡性腫瘤的的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。當(dāng)mTOR受到其通路方面的PTEN基因、上游生長因子受體等多因素的影響下，能夠?qū)?xì)胞凋亡產(chǎn)生抑制作用，對(duì)于腫瘤血管相應(yīng)形成具有促進(jìn)作用，并促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移。mTOR在肝癌、胰腺癌、胃癌等[7-9]消化系腫瘤中亦存在高表達(dá)和活化，已成為胃癌治療的新靶點(diǎn)。

張剛等[10]采用免疫組織化學(xué)法及Westernblot方法檢測(cè)P-AKT及P-mTOR在胃癌(100例)、癌旁(80例)及胃組織正常黏膜(100例)中的表達(dá)水平，并分析其與常見病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系，探討兩者之間的相關(guān)性。結(jié)果pmT0R在胃癌、癌旁及胃組織正常黏膜中的陽性表達(dá)均呈降低趨勢(shì)，與Westernblot結(jié)果一致。p-AKT在胃癌中的表達(dá)與腫瘤分化程度有關(guān)，p-mTOR在胃癌中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。p-AKT及p-mTOR在同一例胃癌患者中表達(dá)呈顯著正相關(guān)。該次研究結(jié)果顯示p-mTOR在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為36.7%和10.0%，p-4EBP1在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為80.0%和60.0%，p-S6K1在觀察組和對(duì)照組的陽性率分別為26.7%和10.0%。pmTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織當(dāng)中相應(yīng)表達(dá)水平高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與該次的結(jié)果相似。伴隨mTOR信號(hào)通路在整個(gè)抗癌研究的廣泛應(yīng)用，其通過抑制靶向，或?qū)⒋诵盘?hào)相應(yīng)傳導(dǎo)通路當(dāng)中的某位點(diǎn)給予下調(diào)，則會(huì)對(duì)腫瘤發(fā)生及發(fā)展作用造成影響。

綜上所述，針對(duì)胃癌患者，mTOR信號(hào)通路在其組織當(dāng)中特異性激活，而mTOR信號(hào)通路可能作用于胃癌的發(fā)生及發(fā)展。

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[1]張丹丹，李慶林．PI3K／Akt／mT0R信號(hào)通路與腫瘤[J]．安徽醫(yī)藥，2012，16(3)：281-283．

[2]Li M,Sun H,Song L,et al.Immunohistochemical expression of mTOR negatively correlates with PTEN expression in gastric carcinoma[J].Oncol Lett,2012,4(6):1213-1218.

[3]Pande S，Brown G，Padmanabhan S，et a1．Oneogenic cooperation between PI3K／Akt signaling and transcription factor Runx2 promotes the invasive properties of metastatic breast cancer cells[J]．J Cell Physiol，2013，228(8)：1784-1792．

[4]Nemunaitis J,Hochster HS,Lustgarten S,et al.A phase I trial of oral ridaforolimus (AP23573;MK-8669)in combination with bevacizumab for patients with advanced cancers[J].Clin Oncol(R Coll Radiol),2013,25(6):336-342.

[5]Monsalves E，Jurasczhka K，Tateno T，et a1．The PI3K／AKT／mTOR pathway in the pathophysiology and treatment of pituitary adcnomas[J]．Endocr Relat Cancer，2014，21(4)：331-344．

[6]袁莉，賈莉．PI3K／AKT／PTEN通路與肺癌的關(guān)系[J]．齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，34(18)：2657-2659．

[7]潘理會(huì)，張平，李春輝.PI3K/AKT/mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路在胃癌中的研究進(jìn)展[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016,33（4）：324-327.

[8]季冬梅,李進(jìn).靶向PI3K/Akt/mTOR通路在胃癌中的研究進(jìn)展[J].腫瘤,2014(2):191-196.

[9]孫丹鳳,張燕捷,田筱青,等.哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路及其下游蛋白在胃癌組織中的活化及臨床意義[J].中華消化雜志,2013,33(3):166-170.

[10]張剛，郭劍，李杰,等.P13K／AKT／mTOR信號(hào)通路在胃癌組織中的表達(dá)及意義[J].廣東醫(yī)學(xué),2016,37(9):1330-1332.

Expression and Significance of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the Gastric Cancer Tissue

YAN Bin1,YU Yue-li1,HAN Li-hong2
1.Second Department of General Surgery,First Affiliated Hospital of Baotou Medical College,Baotou,Inner Mongolia, 014010 China；2.Biological and Chemistry Teaching and Research Room,Baotou，Inner Mongdia 014060 China

Objective To discuss the correlation between the expression level of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 and common clinical pathological factors of gastric cancer.Methods 60 cases of patients with gastric cancer with operative incision in our hospital from March 2014 to June 2016 were selected as the observation group,and 40 cases of patients with paracancerous tissue gastric tissue(tumor marginal 5cm)were selected as the control group,and the expression of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 was tested by the immunohistochemical method.Results The positive rate of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the observation group and the control group was respectively 36.7%and 10.0%,80.0%and 60.0%and 26.7%and 10.0%,and the expression level of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the gastric tissue was higher than that in the paracancerous tissue,andthe differences had statistical significance（P＜0.05）.Conclusion The overexpression of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the gastric tissue may be one of the important mechanism of occurrence of gastric cancer.

Gastric cancer;p-mTOR;p-4EBP1;p-S6K1;Immunohistochemical method

R735

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2017.03.01.01

2016-12-20；

2017-01-05

包頭市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2015S2004-5-6)；內(nèi)蒙古自治區(qū)高等學(xué)?？茖W(xué)研究項(xiàng)目（NJZY16204)；包頭醫(yī)學(xué)院博士啟動(dòng)基金項(xiàng)目（BSJJ201605)。

閆斌（1978.11-），男，內(nèi)蒙古包頭人，本科，副主任醫(yī)師，主要從事普外科疾病的診斷與治療工作。

韓麗紅（1979.9-），女，內(nèi)蒙古赤峰人，博士，教授，主要從事腫瘤基因診斷研究工作，E-mail:ybacm@163.com。