洪俊

【中圖分類號】R155.3 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2095-6851（2017）09--01

自身免疫性溶血性貧血是由自身抗體引起的一類常見病征，多見于血液病、風(fēng)濕免疫病等病種。病人紅細(xì)胞由于被自身抗體致敏造成長期貧血，為了改善臨床癥狀，該類患者長期依賴輸血，但自身抗體會造成實(shí)驗(yàn)室交叉配血困難。近期我們實(shí)驗(yàn)室收到一例疑難配血標(biāo)本，送檢臨床醫(yī)院最初鑒定為A型，經(jīng)我們實(shí)驗(yàn)室檢查診斷為自身免疫性溶血性貧血，但我們在檢測過程中發(fā)現(xiàn)患者ABO正反定型不一致，現(xiàn)報道如下。

一、材料與方法。

血型分型試劑單克隆抗-A、抗-B（批號：20151123）、抗-D（批號：20151815）、反定型細(xì)胞（批號：20175318）、抗體篩選細(xì)胞（批號：20177020）、抗體鑒定譜細(xì)胞（批號：20170503）均購自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。AB型血漿由本實(shí)驗(yàn)室提供，酸放散試劑盒由上海血液中心血型參比室提供。血型定型、抗體篩選、抗體鑒定、放散試驗(yàn)均按文獻(xiàn)[1]提供方法操作。

二、血型血清學(xué)檢查。

1.血型鑒定：

患者ABO血型鑒定結(jié)果見表1?；颊逺hD血型為RhD陽性。

2.直接抗人球蛋白試驗(yàn)

患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果見表2.

3.抗體篩選試驗(yàn)。

患者血清用抗體篩選試劑盒鑒定，結(jié)果見表3.

4.抗體鑒定。

用酸放散試劑盒制備患者紅細(xì)胞放散液?；颊哐?、酸放散液用商品譜細(xì)胞鑒定抗體特異性，反應(yīng)結(jié)果見表4。由表4可知該患者血清中有不規(guī)則抗體，但抗體特異性不明確，結(jié)合紅細(xì)胞放散液的特異性可知患者紅細(xì)胞被自身抗體所致敏。

1+w 2+ /

5. 經(jīng)熱放散處理的患者紅細(xì)胞正定型

患者紅細(xì)胞經(jīng)56℃5分鐘熱放散處理后再次鑒定ABO正定型，結(jié)果見表5.

三、討論

自身免疫性溶血性貧血（AIHA）可分為四種主要類型：溫自身免疫性溶血性貧血（WAIHA）、冷凝集素綜合征（CAS）、混合型自身免疫性溶血性貧血（mixed-typed AIHA）和陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿（PCH）。某些患者溶血性貧血的臨床證據(jù)是存在的，但是DAT為陰性，通常在血清和放散液中不能測得自身抗體，可能有幾種原因?qū)е翫AT是陰性。1.）當(dāng)進(jìn)行DAT試驗(yàn)用鹽水洗滌細(xì)胞時，低結(jié)合親和力的抗體可能從紅細(xì)胞上分離下來；用低離子強(qiáng)度鹽水或生理鹽水37℃或4℃洗滌可幫助抗體維持在細(xì)胞上。2.）用常規(guī)方法測定，可能太少抗體分子結(jié)合在紅細(xì)胞上；但可用如下方法證實(shí)，如紅細(xì)胞流式儀、酶連抗球蛋白試驗(yàn)、固相法或直接polybrene法。

紅細(xì)胞膜表面由于唾液酸的存在而使紅細(xì)胞帶負(fù)電荷，紅細(xì)胞帶有負(fù)電荷可避免其發(fā)生自發(fā)聚集，使紅細(xì)胞保持最大的表面積，增加氧的轉(zhuǎn)移能力和氣體擴(kuò)散。紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)溶液內(nèi)，陽離子被紅細(xì)胞的負(fù)電荷所吸引，紅細(xì)胞被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞。離子云如同紅細(xì)胞的一部分隨著紅細(xì)胞移動，離子云的外沿稱為修剪表面或滑面。紅細(xì)胞的有效電荷稱為Zeta電位，是由這個面決定的，它使紅細(xì)胞之間保持靜電排斥。由于靜電使紅細(xì)胞間保持一定距離，IgG分子的跨距太短，不能給兩個細(xì)胞搭起橋來。膠體介質(zhì)能提高介電常數(shù)，從而降低Zeta電位，使已致敏的紅細(xì)胞靠攏而現(xiàn)凝集。

該患者直抗陽性，顯示患者紅細(xì)胞被IgG類抗體、C3d補(bǔ)體成分致敏。患者血清中抗體特異性不明確，可能是自身抗體或、和同種抗體 ?；颊呒t細(xì)胞酸放散液無特異性，顯示患者紅細(xì)胞被IgG類自身抗體致敏。正是由于該IgG類自身抗體的致敏，使患者紅細(xì)胞與抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清發(fā)生了正常不應(yīng)有的弱凝集；而患者紅細(xì)胞的鹽水對照不凝集，與無抗體特異性的AB型血漿發(fā)生凝集，進(jìn)一步驗(yàn)證了Zeta電位理論，即抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清作為一種蛋白介質(zhì)提高了介質(zhì)的介電常數(shù)，從而降低了Zeta電位，導(dǎo)致了IgG類自身抗體致敏的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。患者紅細(xì)胞經(jīng)56℃5分鐘熱放散后，與抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清不再發(fā)生凝集。

參考文獻(xiàn)

丁蘇鄂.常用血清學(xué)檢查技術(shù)[M]//劉達(dá)莊.免疫血液學(xué).上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002，194-234.endprint