李慧

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

高效液相色譜法測(cè)定羅紅霉素顆粒含量

李慧

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

目的：探討使用高效液相色譜法來(lái)測(cè)定羅紅霉素顆粒含量的可行性與可靠性，為羅紅霉素顆粒含量測(cè)定找尋最佳的測(cè)定方法。方法：通過(guò)高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定，多次測(cè)定確定其穩(wěn)定性和回收率。結(jié)果：通過(guò)測(cè)定試驗(yàn)可以得知，當(dāng)羅紅霉素顆粒濃度位于0.5-0.7mg·ml-1范圍時(shí)，其樣品會(huì)呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系，回收率很高。結(jié)論：從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，在對(duì)羅紅霉素顆粒的含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)采用高效液相色譜法是十分可行的，并且測(cè)定方法簡(jiǎn)單可靠，可以作為標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法大力推廣。

高效液相色譜法；羅紅霉素顆粒；含量；測(cè)定

作為一種常見的西藥抗菌藥物，羅紅霉素的群眾基礎(chǔ)較大，市場(chǎng)需求自然也很大。而為了方便兒童服用，羅紅霉素除了片劑和膠囊劑以外，也開始生產(chǎn)顆粒制劑。與片劑和膠囊制劑相比，顆粒劑更容易被人體吸收，效果更佳。為了能夠進(jìn)一步優(yōu)化羅紅霉素顆粒的生產(chǎn)工藝，需要在生產(chǎn)中對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定，以確定生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性是否符合要求。而高效液相色譜法作為一種較為成熟的測(cè)定方法，在羅紅霉素顆粒的含量測(cè)定中也發(fā)揮了非常積極的作用。在此本文就將高效液相色譜法測(cè)定羅紅霉素顆粒含量的試驗(yàn)過(guò)程和結(jié)果報(bào)道如下：

1、儀器與試藥

1.1 儀器

JASCO高效液相色譜儀，JASCO-875-UV檢測(cè)器，JASCO807IT積分儀，JASCOAS-950自動(dòng)進(jìn)樣器。

1.2 試藥

乙腈、甲醇為色譜純，醋酸銨為分析純；羅紅霉素對(duì)照品（96%，天津藥品檢定所），羅紅霉素顆粒劑（規(guī)格每袋為50mg，天津市兒童醫(yī)院批號(hào)970601，970602，970603）。

2、方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱LichrosorbRPC187μm（244mm×4.0mm），流動(dòng)相為乙腈-0.083mol·L-1醋酸銨水溶液-甲醇（55∶23∶28）用醋酸調(diào)節(jié)pH值為6.8，流速1.0ml·min-1，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)215nm。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

精密稱取羅紅霉素對(duì)照品約260mg，置25ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度；分別精密吸取上述溶液0.5，1，2，3，4，5，6，7ml置于10ml量瓶中，用流動(dòng)相定容，使?jié)舛确謩e為0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0mg·ml-1，分別吸取20μl進(jìn)樣測(cè)定峰面積，每種濃度重復(fù)進(jìn)樣 3次，以峰面積 Y對(duì)濃度 X回歸，得線性方程Y=444083X-7714.6，r=0.9995，說(shuō)明在0.5～7mg·ml-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

每隔1h測(cè)同一濃度對(duì)照品溶液1次，連續(xù)6h，結(jié)果峰面積基本不變，平均RSD為0.42%。

2.4 回收率試驗(yàn)

精密稱取羅紅霉素對(duì)照品適量，按處方配制羅紅霉素顆粒劑，以下按“樣品測(cè)定”項(xiàng)下操作，精取溶液20μl進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，按外標(biāo)峰面積法計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

2.5 樣品測(cè)定

取羅紅霉素顆粒劑混勻、研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于羅紅霉素100mg）置25ml量瓶中，加入流動(dòng)相適量，經(jīng)超聲波處理10min，使羅紅霉素溶解，加流動(dòng)相稀釋至刻度，過(guò)濾，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱取羅紅霉素對(duì)照品50mg，加流動(dòng)相溶解并定容，制成每ml中含2mg的溶液作為對(duì)照品溶液。分別精密量取對(duì)照品溶液和樣品溶液各20μl注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算。結(jié)果見表2，色譜圖1。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果

圖1 色譜圖

3、討論

從專業(yè)角度上講，高效液相色譜法也被稱之為高分離度液相色譜法。該方法是色譜法中一種，也是應(yīng)用最為廣泛的一種?；瘜W(xué)、醫(yī)學(xué)、工學(xué)領(lǐng)域都有涉及。高效液相色譜法與其他色譜法相比，擁有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)：

第一，高壓。高效液相色譜法中的流動(dòng)相是液體，該液體在經(jīng)過(guò)色譜柱時(shí)，需要抵擋非常大的阻力，為此載液務(wù)必要加高壓；第二，高速。高效液相色譜法能夠進(jìn)行快速分析，液體流速也非?？欤话闱闆r下，樣品在15min左右就能夠分析出來(lái)，最長(zhǎng)時(shí)間不會(huì)超過(guò)半個(gè)小時(shí)，還有些樣品在5min之內(nèi)就可以完成分析；第三，高效。高效液相色譜法分離效能非常高，應(yīng)用固定相與流動(dòng)相，樣品的分離效果非常好；第四，高靈敏度，高效液相色譜法中的紫外檢測(cè)器能夠達(dá)到0.01ng；第五，使用范圍非常廣，據(jù)統(tǒng)計(jì)現(xiàn)實(shí)生活中有接近70%的有機(jī)化合物可以利用此種方法，尤其是高沸點(diǎn)、強(qiáng)極性的樣品分析效果最佳。另外，高效液相色譜法還具有容易回收、樣品不容易損壞的特點(diǎn)。但是此種方法也存在著一定的劣勢(shì)，突出的就是“柱外效應(yīng)”。如果在分離的過(guò)程中，流動(dòng)相流行出現(xiàn)了變化，色譜峰會(huì)非常容易出現(xiàn)加寬情況，柱效率會(huì)因此大大降低。

而羅紅霉素顆粒屬于抗生素，主要用來(lái)治療敏感菌株引發(fā)的各類感染，比如皮膚軟組織感染、上下呼吸道感染等。顆粒顏色為白色或者與白色十分相近的顏色，擁有芳香，味道甜中帶苦。羅紅霉素顆粒服用會(huì)出現(xiàn)不良反應(yīng)，比較常見的有惡心、腹痛等，如果患者對(duì)羅紅霉素過(guò)敏，或者存在著肝、腎不全，就要禁止復(fù)用。羅紅霉素顆?？诜?，患者都會(huì)比較快的吸收，而且具有非常高的峰濃度，大量的實(shí)驗(yàn)研究證明，患者如果空腹復(fù)用該藥品，會(huì)有良好的吸收效果。但是需要注意控制服用量。這也是為什么要在生產(chǎn)中控制羅紅霉素顆粒的含量并對(duì)其進(jìn)行精密測(cè)定的原因。

通過(guò)本次試驗(yàn)可以看出，運(yùn)用高效液相色譜法，將羅紅霉素濃度控制在一定范圍內(nèi)，就會(huì)擁有良好的線性關(guān)系，而且羅紅霉素的回收率非常高，沒(méi)有任何的輔助材料的干擾。因此高效液相色譜法可以用來(lái)進(jìn)行測(cè)定羅紅霉素顆粒含量。高效液相色譜法與其他測(cè)定方法相比，簡(jiǎn)單、快速、容易控制，將其用來(lái)進(jìn)行羅紅霉素顆粒生產(chǎn)控制，可以確保產(chǎn)品質(zhì)量。因此可以積極將高效液相色譜法推廣到羅紅霉素顆粒的含量測(cè)定中去。

[1] 李如標(biāo)，王梅娟，孫增先，王奎興.高效液相色譜法測(cè)定羅紅霉素膠囊含量[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究.2005（01）

[2] 王春霞，李忠，王東華.反相高效液相色譜法測(cè)定羅紅霉素的含量[J].化學(xué)分析計(jì)量.2004（04）

[3] 戴紅，胡昌勤.HPLC法分析羅紅霉素及其片劑含量和相關(guān)物質(zhì)[J].藥物分析雜志.2002（03）

[4] 陳亮，何鳳慈.HPLC法測(cè)定羅紅霉素膠囊的含量[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào).2002（01）

[5] 王芳，賴日禹.高效液相色譜法測(cè)定羅紅霉素顆粒含量[J].藥物分析雜志.2001（06）

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1672-5018（2017）02-281-1