何 平 徐 闖

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江大慶 163319）

黑龍江地區(qū)某牧場奶牛大腸桿菌病的病例報(bào)告

何 平 徐 闖*

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江大慶 163319）

0 引言

大腸桿菌病是由大腸埃希菌引起的細(xì)菌性人畜共患病。大腸埃希菌，俗稱大腸桿菌，大多數(shù)為人和溫血?jiǎng)游锬c道內(nèi)的正常菌群，1885年，Escherion首次發(fā)現(xiàn)此菌，在很長的一段時(shí)間內(nèi)一直作為正常腸道菌群的組成部分，認(rèn)為是非致病菌。直到20世紀(jì)中葉，人們才認(rèn)識(shí)到一些特殊血清型的大腸埃希菌對(duì)人和動(dòng)物有病原性，尤其是對(duì)幼畜常引起嚴(yán)重的腹瀉和敗血癥[1]。奶牛大腸桿菌病是一種常見的，造成奶牛業(yè)經(jīng)濟(jì)損失較為嚴(yán)重的奶牛疾病。

1 病例介紹

2016年4～5月，黑龍江地區(qū)某牧場部分泌乳期奶牛突然先后發(fā)病，體溫?zé)o明顯變化，多數(shù)在38.2℃～39.3℃之間，排醬油色稀水樣或血樣糞便，臨床上配以大量的抗生素和葡萄糖生理鹽水進(jìn)行治療，均未收到明顯的治療效果，截至5月10日已陸續(xù)死亡6頭。

2 臨床癥狀

突然發(fā)病，精神不振，臨床檢查發(fā)現(xiàn)，消化道系統(tǒng)：間有腹瀉，排醬油色稀水樣糞便，其中有大量氣泡且惡臭；呼吸系統(tǒng)：呼吸急促，呼吸頻率明顯增加；其他系統(tǒng)未見異常。食欲及泌乳情況基本正常，部分奶牛出現(xiàn)癥狀后1日內(nèi)急性死亡。

3 剖檢變化

根據(jù)解剖采樣的基本原則，急性死亡的動(dòng)物，先進(jìn)行血液抹片鏡檢，確定不是炭疽，解剖采樣。剖檢可見，病死牛腸道后段大量出血，腸壁變薄且透明，心臟的心房及心室內(nèi)壁滲血，肺充血，肺臟間質(zhì)增寬，瘤胃、瓣胃壁充血，肝臟有少量點(diǎn)狀壞死灶。

4 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

4.1 細(xì)菌學(xué)檢查

在其死亡后2h以內(nèi)，采集其病料。按照無菌操作的原則，用具事先消毒，一套器械與容器只采一種病料，取病死牛的肝臟、肺臟、腸道等處病料，嚴(yán)格遵守生物安全操作的相關(guān)規(guī)定，避免對(duì)樣品、環(huán)境的污染和對(duì)采樣人員的傷害。組織樣品暫時(shí)冷藏處理，然后在保溫箱內(nèi)加冰袋冷藏運(yùn)輸。樣品包裝好后以最快最直接的途徑帶回實(shí)驗(yàn)室，樣品到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，立即處理[2]。

取心血、腸壁、肝臟、肺臟等病料，直接涂片革蘭氏染色鏡檢，均見革蘭氏陰性小桿菌。

供試品（樣品）各取10g，分別加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為1：10的供試液。

稱取伊紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMB）37.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，充分溶解，121℃高壓滅菌15min。待培養(yǎng)基冷至50℃左右，無菌操作，傾注滅菌平皿，待凝固后，備用。將供試液劃線接種于平板上。將平板翻轉(zhuǎn)，放入恒溫培養(yǎng)箱中，36±1℃培養(yǎng)18～24h。

表1 觀察結(jié)果

4.2 組織學(xué)檢查

取病死牛肺、肝、腎、脾、空腸、回腸和結(jié)腸，用中性福爾馬林固定，石蠟包埋切片H.E染色，顯微鏡觀察[3]。肺臟：肺泡間隙增寬，有腸桿菌聚積成團(tuán)，毛細(xì)血管充血。肝臟：血管內(nèi)可見細(xì)菌團(tuán)塊。腎臟：腎小管上皮細(xì)胞腫脹變性。空腸：黏膜下層見大量淋巴細(xì)胞浸潤，黏膜層充血、出血，上皮細(xì)胞壞死脫落?；啬c：黏膜層可見淋巴細(xì)胞浸潤，黏膜下層可見細(xì)菌團(tuán)塊。

5 診斷

經(jīng)細(xì)菌學(xué)檢查，可清晰地看到革蘭氏陰性小桿菌，伊紅亞甲藍(lán)培養(yǎng)基上的菌落呈黑色中心，有綠色金屬光澤，再結(jié)合臨床癥狀、剖檢變化及組織學(xué)檢查，診斷為牛大腸桿菌病。

6 防治要點(diǎn)

6.1 預(yù)防措施

把病牛隔離開，及時(shí)清掃圈舍，嚴(yán)格消毒管理，確保舍內(nèi)清潔衛(wèi)生。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，不要突然更改飼喂模式，減少各種對(duì)腸胃的不良應(yīng)激。可于母牛生產(chǎn)前及時(shí)接種多價(jià)血清大腸桿菌苗，確保母牛高抗體水平。如此，犢牛通過及時(shí)哺乳，獲得高水平的母源抗體，提升抗疾病能力[4]。

6.2 治療措施

奶牛急性經(jīng)過的大腸桿菌病，診治較為困難，康復(fù)難度較大。常規(guī)治療措施，及時(shí)分離患牛大腸桿菌血清型，根據(jù)血清型做藥敏試驗(yàn)，選擇有較強(qiáng)抑制作用的抗生素，可起延緩治療的效果。選擇治療藥物的同時(shí)，適當(dāng)選擇敏感藥物，避免耐藥性的產(chǎn)生。

治療的主要目的應(yīng)為：

（1）控制細(xì)菌感染。

（2）恢復(fù)血容量/補(bǔ)液。

（3）糾正電解質(zhì)不平衡[5]。

常見有療效的藥物有慶大霉素、磺胺甲基嘧啶、鏈霉素、諾氟沙星等。具體用量，可借鑒如下：慶大霉素臨床治療用量為1～1.5mg/kg，肌肉注射2次/日；磺胺甲基嘧啶臨床治療用量為0.08～0.2g/kg，口服治療2次/日；鏈霉素治療用量10mg/kg，肌肉注射2次/日；諾氟沙星臨床治療用量為10mg/kg，肌肉注射2次/日。

在上述藥物治療的同時(shí)，可配合調(diào)整腸胃機(jī)能、恢復(fù)血容量，加快疾病康復(fù)?？捎脤⑵咸烟牵ê?7.53%）、氯化鈉（含量4.34%）、甘氨酸（含量10.3%）、枸櫞酸（含量0.81%）、枸櫞酸鉀（含量0.21%）、磷酸二氫鉀（含量6.8%）混合調(diào)配，取混合藥物64g，加入2000ml的水，待停乳2d，可口服治療，每天2次，每次1000ml[4]。

糾正脫水，對(duì)水和電解質(zhì)的累積丟失應(yīng)在2～3 h，最長6 h內(nèi)補(bǔ)足。依據(jù)脫水的不同程度內(nèi)服口服補(bǔ)液鹽，輕度脫水15～30 ml/ kg，中度脫水30～50 ml/kg，重度脫水50～80 ml/kg，分3～4次服完[6]。

7 討論

本次疫病的暴發(fā)，可能是因?yàn)楫?dāng)時(shí)牛場剛調(diào)完群，加上環(huán)境氣候突變，導(dǎo)致牛群應(yīng)激因素增加、抵抗力降低所致。疫病暴發(fā)后，要注意隔離病牛，重視場地和用具的消毒，并及時(shí)做實(shí)驗(yàn)室診斷，做到及時(shí)有效的治療。臨床診治，注意與牛沙門氏菌病、牛梭菌性腸炎的區(qū)別診斷[7]。比較而言，牛沙門氏菌各日齡階段均有易感性，以發(fā)熱、下痢為主要特征，糞便帶血，惡臭；胃腸黏膜和漿膜上有出血斑；剖檢病變主要集中肝臟、腎臟、脾臟等實(shí)質(zhì)性器官；病原體為沙門氏菌[8]。而大腸桿菌病剖檢病變主要集中腸胃處。牛梭菌性腸炎由魏氏梭菌引起，典型癥狀為急性出血性腸炎，剖檢集中腸、腎臟處。與大腸桿菌鑒別，魏氏梭菌菌體表現(xiàn)為兩端為鈍圓，有莢膜[9]，染色鏡檢，鑒別比較容易。

[1]Kaikainen V，Ikaheimo R，Katila M L，et al.P-fimbriation of Escherichia coil strains from patients with urosepsis demon-strated by a commericial agglutination test[J].Clin Microbiol，1991，（29）：221.

[2]岳孝瑞.動(dòng)物疫病監(jiān)測樣品采集運(yùn)送保存應(yīng)注意的問題[J].當(dāng)代畜牧，2012，（5）：32-33.

[3]蘇衛(wèi)，覃金勝.奶牛大腸桿菌病的診斷[J].云南畜牧獸醫(yī)，1990，（2）：35-36.

[4]杜玉品.奶牛大腸桿菌的疫病防控[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2015（4）：127-127.

[5]Bywater R J. Pathogenesis and treatment of Escherichia coli infections in calves[J].Journal of the South African Veterinary Association，1976，47（3）：193.

[6]陳偉，余紅燕.犢牛大腸桿菌病的診治[J].中國牛業(yè)科學(xué)，2016，42（6）：157.

[7]王立軍，苑小明，常玉君.犢牛大腸桿菌病的診療方法[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2009，（2）：106.

∶何平（1992-），男，碩士研究生，動(dòng)物營養(yǎng)代謝病。

∶徐闖（1979-），男，教授，博士，動(dòng)物營養(yǎng)代謝病。