陳能橋趙福葳*毛以智高 洪王良龍

（1.貴州省遵義市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州遵義 563000；2.遵義市桐梓縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遵義桐梓 563200）

山羊口蹄疫免疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律研究

陳能橋1趙福葳1*毛以智1高 洪2王良龍2

（1.貴州省遵義市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州遵義 563000；2.遵義市桐梓縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遵義桐梓 563200）

本試驗(yàn)篩選65頭口蹄疫抗體為陰性的山羊，隨機(jī)分成兩組，分別注射口蹄疫O型-亞洲I型二價(jià)滅活疫苗1ml和2ml，免疫后不同時(shí)段進(jìn)行免疫抗體監(jiān)測(cè)，掌握遵義市山羊口蹄疫O型-亞洲I型二價(jià)滅活疫苗不同免疫劑量免疫后免疫抗體的消長(zhǎng)規(guī)律。結(jié)果表明，免疫后7d產(chǎn)生抗體，O型陽(yáng)性率即群體保護(hù)率分別為67.72%和82.35%；亞洲I型陽(yáng)性率即群體保護(hù)率分別為90.32%和88.24%；達(dá)到峰值的時(shí)間分別為45d和30d。使用口蹄疫O型-亞洲I型二價(jià)滅活疫苗1ml免疫1次，即可確保高效價(jià)抗體維持至150d。

口蹄疫 羊 免疫抗體 消長(zhǎng)規(guī)律 研究

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄獸的急性、熱性、高度接觸性傳染病，該病傳播迅速，發(fā)病率高，是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）規(guī)定必須報(bào)告的傳染病之一，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病，預(yù)防本病的重要措施是使用疫苗進(jìn)行預(yù)防接種。為掌握遵義市山羊口蹄疫疫苗免疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律，科學(xué)使用口蹄疫O型-亞洲I型二價(jià)滅活疫苗防治山羊口蹄疫，我們于2016年在遵義市桐梓縣某山羊養(yǎng)殖場(chǎng)篩選65頭口蹄疫抗體為陰性的山羊，開(kāi)展了口蹄疫O型-亞洲I型二價(jià)滅活疫苗免疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律研究工作。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

隨機(jī)選擇山羊若干頭，無(wú)菌頸靜脈采血分離血清，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)口蹄疫O型和亞洲I型抗體，篩選出抗體陰性山羊65頭為試驗(yàn)動(dòng)物，隨機(jī)分成A、B兩組A組31頭，B組34頭，對(duì)每頭山羊進(jìn)行唯一編號(hào)。

1.2 試驗(yàn)疫苗

口蹄疫O型-亞洲I型二價(jià)滅活疫苗，中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：B160101J，有效期：20160115。

1.3 檢測(cè)試劑

羊口蹄疫病毒亞洲I型抗體檢測(cè)試劑盒，鄭州中道生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：151012，有效期：160812；牛/羊O型口蹄疫病毒ELISA檢測(cè)試劑盒，武漢科前生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號(hào)：150908，有效期：160720。

2 試驗(yàn)方法

2.1 免疫劑量

A組每頭山羊肌肉注射1ml；B組每頭山羊肌肉注射2ml。

2.2 采血時(shí)間

分別于免疫后第7d、15d、30d、45d、60d、90d、120d、150d和180d無(wú)菌頸靜脈采血分離血清，4℃保存，次日檢測(cè)。

2.3 抗體檢測(cè)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。按口蹄疫病毒抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書操作、判定。

3 結(jié)果

3.1 免疫后不同時(shí)間抗體的檢測(cè)結(jié)果

將免疫后不同時(shí)間血清抗體檢查結(jié)果做了統(tǒng)計(jì)，結(jié)果詳見(jiàn)表1、表2。

表1 免疫羊群O型口蹄疫抗體動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果OD值（A組∶1mL/只、B組2mL/只） 單位∶d、只、%

3.2 免疫羊群口蹄疫不同時(shí)間群體保護(hù)率（見(jiàn)圖1和圖2）

4 討論

（1）本次實(shí)驗(yàn)，無(wú)論是O型還是亞1型口蹄疫苗，在廠家推薦免疫劑量和推薦劑量加倍量免疫注射羊，免疫第7d，除O型口蹄疫廠家推薦量差3個(gè)百分點(diǎn)外，其余均達(dá)到國(guó)家要求的70%以上的免疫保護(hù)率。免疫15d后，均達(dá)到90%以上的免疫保護(hù)。因此在生產(chǎn)實(shí)踐中沒(méi)有必要進(jìn)行加大劑量進(jìn)行免疫注射。

（2）從表中可以看出，O型-亞1型雙價(jià)苗在加倍量注射時(shí)，在7d時(shí)產(chǎn)生的免疫保護(hù)水平，明顯高于常規(guī)劑量，特別是O型口蹄疫，相差14.61個(gè)百分點(diǎn)，因此在進(jìn)行緊急免疫時(shí)，為在最短時(shí)間使羊群產(chǎn)生免疫保護(hù)，建議加倍量進(jìn)行免疫。

表2 免疫羊群亞-1型口蹄疫抗體動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果OD值（A組∶1mL/只、B組2mL/只） 單位∶d、只、%

（3）本次試驗(yàn)表明，羊O型-亞1型雙價(jià)苗在常規(guī)劑量進(jìn)行免疫時(shí)，在120d免疫抗體保護(hù)率開(kāi)始下降，但在150d仍然有較好的免疫保護(hù)。但加倍劑量免疫時(shí)，免疫抗體保護(hù)率從90d開(kāi)始下降，以后下降速度加快，到150d時(shí)，O型口蹄疫免疫抗體保護(hù)率只有64.71%。因此在進(jìn)行加倍劑量免疫后，應(yīng)在120d后進(jìn)行加強(qiáng)免疫。

（4）本次試驗(yàn)表明，在羊O型-亞1型雙價(jià)苗中，對(duì)亞1型口蹄疫的保護(hù)明顯優(yōu)于對(duì)O型口蹄疫的保護(hù)。

∶省市科技合作專項(xiàng)資金項(xiàng)目，合同號(hào)：[省市科合（2013）35號(hào)]

∶陳能橋（1963-），男，貴州遵義人，大學(xué)學(xué)歷，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病防控及畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣工作。

∶趙福葳（1963-），女，貴州遵義人，大學(xué)學(xué)歷，農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣研究員，主要從事動(dòng)物疫病防控及畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣工作。