陳孝得
(青海省大通種牛場,青海大通 810102)
大通牦牛布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查報告
陳孝得
(青海省大通種牛場,青海大通 810102)
大通種牛場地處祁連山東端,北靠達(dá)坂山,東南與大通縣界接壤,西與海晏縣連接,北與祁連縣毗鄰。北緯37°11′~37°32′,東經(jīng)100°52′~101°54′之間。海拔2900~4800m,東西長約40km,南北寬約15km,土地總面積5.6萬hm2,可利用草場面積5.1萬 hm2,飼草料基地3800hm2,場部距西寧92km,場區(qū)內(nèi)山間谷地重疊氣候濕潤,雨量充足,年平均雨量為463.2~636.1mm,全年蒸發(fā)量1054.7~1422.3mm,境內(nèi)有大小河流30余條,水量充足。年均氣溫2.4℃,最高氣溫24℃,最低氣溫-31℃,全年無絕對無霜期、牧草生長期約120d左右。草地類型以高寒草甸和山地草甸為主,高寒草甸占46%,山地草甸占54%。為了解大通牦牛布魯氏菌病感染情況,特進行了本次血清學(xué)調(diào)查。采用布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗結(jié)合布魯氏菌病試管凝集試驗。
器材與試劑:虎平板凝集抗原、載玻片、移液器、移液槍頭、酒精燈、記號筆、計時器、試管架。
該實驗又稱為板式孟加拉紅平板凝集實驗,由于所用的抗原是酸性帶色的抗原,抗原與被檢的血清作用時,能抑制血清中的抗體的凝集活性,檢查出的抗體。因此提高了該向反應(yīng)的特異性。在平板玻片上加抗原30μl被檢血清30μl攪勻,酒精燈加熱至37℃靜止5min觀察載玻片。同時做陰、陽性血清做對照。
5min觀察載玻片,如果出現(xiàn)了凝聚顆粒呈菌叢狀,凝集間液體明顯清亮,即為陽性,反之為陰性。
器材與試劑:布魯氏菌病試管凝集抗原、對照陰陽性血清。試管架。試管、移液器、500ml燒杯、吸頭、記號筆、可調(diào)加液器、0.9%氯化鈉注射液、蒸餾水、恒溫培養(yǎng)箱。
準(zhǔn)備好試管,取九只試管放在試管架上,進行編號,一號試管為血清對照管,二到八號為試驗管,九號為抗原對照管。
將一號試管進行血清稀釋,加入2.4ml的生理鹽水,二號試管中不加入,三號到九號試管中各加入0.5ml的生理鹽水,一號試管加入0.1ml被檢測的血清。攪拌均勻后各吸入0.5ml,加入二號三號試管中,從三號試管開始做比對稀釋,從八號試管中吸出0.5ml倒掉。
十倍稀釋抗原,從二號試管開始,每支加入0.5ml稀釋后的抗原。凝集試管檢驗判斷透亮程度,取五只試管進行編號。取稀釋后的抗原再做第二次的稀釋實驗。
試管編號 抗原稀釋液 生理鹽水 透亮度 標(biāo)記1 0.00 1.00ml 100% +++++ 2 0.25 0.75ml 75% +++ 3 0.50 0.50ml 50% + 4 0.75 0.25ml 25% -5 1.00 0.00ml 0% --
根據(jù)上述的實驗結(jié)果,可以看出,一號試管清亮透明,九號試管,渾濁均勻。牦牛血清凝集的一號試管中檢測為陽性,九號試管中為陰性反應(yīng)。
2.3.1 對人類的影響
牦牛布病的感染是其繁衍疾病的主要原因之一,這樣就給牦牛的養(yǎng)殖戶造成了嚴(yán)重的損失,減少了養(yǎng)殖戶的收入。牦牛布病感染一直都為養(yǎng)殖戶關(guān)注,布病是人畜共患的傳染病,而且人可以經(jīng)過多種途徑感染上布病。人感染上布病,可以通過三種方式進行傳播。首先是通過皮膚黏膜,直接接觸感染源。比如工作在畜牧一線的人員,通過與病畜的直接接觸或者是病畜污染的水源,土壤等。使人通過皮膚黏膜直接接觸,感染了布病。再有就是通過消化道感染。這種方式就是生吃了病畜的肉,或者是未經(jīng)煮熟的肉,在接觸病畜后不洗手直接拿食物吃等現(xiàn)象,都會造成消化道感染,導(dǎo)致布病的發(fā)生。第三種情況,就是通過呼吸道感染。在畜牧場工作的人員,通過空氣中的飛沫和塵埃感染。受污染的飛沫和空氣含有病畜的感染源。因此,會導(dǎo)致呼吸道感染。從而使人感染上布病。
2.3.2 檢驗結(jié)果的探討
本次試驗的檢驗結(jié)果,大通牦牛感染率為0.11%,此次試驗采用了虎紅平板凝集試驗做初選,操作方便快捷,適用于大規(guī)模檢測的篩選樣本。但虎紅平板凝集試驗易于出現(xiàn)假性陽性的情況,這是由于虎紅抗原敏感性特高,再是血清樣本的純潔、污染程度,保存運輸及環(huán)境溫度等都會導(dǎo)致檢測結(jié)果的不真實性。試管凝集試驗較準(zhǔn)確的復(fù)合判定虎紅篩選的血清樣本,大大減少檢測人員的工作強度。
影響結(jié)果因素還有采樣血清樣本的數(shù)量較少或是集中在某個區(qū)域的牦牛感染布病的情況較少,這樣有關(guān)血清樣本就非常單一。由于時間的關(guān)系,沒有進行大范圍的牦牛血清采集。在今后的工作中要進一步擴大新的血清采集范圍,增加血清樣本,完善檢測目標(biāo),加強布病的預(yù)防工作。
2.3.3 防控治措施
首先,要制定嚴(yán)格的檢疫報告制度。發(fā)現(xiàn)布病疫情后要做到及時、如實的上報。根據(jù)上級的指示進行疫情的防治工作。有關(guān)部門要密切注意疫情的動態(tài),積極地開展調(diào)查,進行監(jiān)測。其次,要深入開展宣傳教育活動,通過實地宣傳、媒體、印發(fā)小冊子等多種形式進行布病防治的宣傳工作,增強群眾的自我保護意識,有效的控制牦牛布病的發(fā)生,從根源出切斷傳染源,這樣可以提高牦牛的繁衍。提高牦牛的繁殖率,增加職工的收入。
虎紅平板凝集試驗操作方便,而且還快捷,適用于大規(guī)模的篩選實驗,但易于出現(xiàn)假陽性的情況。采用試管凝集試驗,這種實驗的方法特異性高,檢測較準(zhǔn)確。但操作麻煩不適應(yīng)于大規(guī)模的檢測,虎紅檢出的血清樣本進行試管凝集試驗復(fù)合,減少工作強度,以做出較準(zhǔn)確的判定。
[1]張可榮,貢嘎,索朗斯珠,等.西藏部分地區(qū)牦牛布病血清學(xué)檢測初報[J].中國奶牛,2011,(24):48-49.
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