王宇萌，朱琳，聞曉鑫，竇德強(qiáng)

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 大連 116600)

·基礎(chǔ)研究·

獾子油豬油蛇油脂肪酸成分的分析比較

王宇萌，朱琳，聞曉鑫，竇德強(qiáng)

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 大連 116600)

目的：分析比較獾子油、豬油及蛇油中脂肪酸成分。方法：以氫氧化鉀/甲醇?jí)A催化法對(duì)樣品進(jìn)行甲酯化衍生化預(yù)處理，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)，對(duì)獾子油、豬油及蛇油中的脂肪酸組成進(jìn)行測(cè)定，用離子流色譜峰面積歸一化法計(jì)算各脂肪酸成分的相對(duì)含量并進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果：獾子油、豬油和蛇油中游離脂肪酸成分及含量均存在差別，獾子油中共檢測(cè)出11種脂肪酸，高于豬油9種和蛇油10種，且獾子油中不飽和脂肪酸含量(66.946%)也高于豬油(57.012%)和蛇油(61.142%)。結(jié)論：獾子油、豬油和蛇油脂肪酸成分存在顯著差別，研究為獾子油的開發(fā)和應(yīng)用提供參考。

獾子油；豬油；蛇油；甲脂化；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

狗獾為獸綱目鼬科狗獾屬半冬眠動(dòng)物[1-2]，狗獾油又名獾子油，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)主要用于治療燙傷，具有清熱解毒、消腫止痛、補(bǔ)中益氣、潤膚生肌之功效[3]。主治中氣不足、胃潰瘍、痔瘡、燒燙傷、凍傷、皮膚皸裂、肢體酸痛及無名腫痛等癥[4]?！侗静菥V目》中記載其還能治療子宮脫垂、咳血、疥癬、白禿和小兒疳瘡等癥，且效果良好。目前國內(nèi)外對(duì)獾子油化學(xué)成分研究較少，朱琳等[5]采用HPLC-ELSD法測(cè)定獾子油化學(xué)成分，分離得到三油酸甘油酯和1-亞油酸-2，3-二油酸甘油酯；施銀等[6]對(duì)狗獾油中脂肪酸組成進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)狗獾油脂肪酸主要為不飽和脂肪酸。然而目前對(duì)獾子油與其他動(dòng)物油成分差異研究未見相關(guān)報(bào)道。本研究選取豬油以及具有較好營養(yǎng)價(jià)值的蛇油、獾子油為對(duì)象，參照文獻(xiàn)[7-11]，利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對(duì)3種動(dòng)物油中脂肪酸成分進(jìn)行分析，對(duì)比3種動(dòng)物油脂脂肪酸成分的差別，以期為獾子油的開發(fā)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 5975/7890氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)；HH-S型恒溫水浴鍋(鞏義市予華儀器有限公司)。

1.2 試藥

豬油(批號(hào)：20130310)為市售豬肥肉加熱熬煉，過濾去渣而得；蛇油(批號(hào)：20120410)為蛇脂肪加熱熬煉，過濾去渣而得。

甲醇(色譜純，天津市大茂化學(xué)試劑有限公司)；正己烷(分析純，天津市大茂化學(xué)試劑有限公司)；三氟化硼-乙醚(化學(xué)純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20121207)；氯化鈉(分析純，天津市津北精細(xì)化工有限公司)；氫氧化鉀(分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑廠)；無水硫酸鈉(分析純，天津市津北精細(xì)化工有限公司)；水(高純水，本實(shí)驗(yàn)室自制)，甲酸(分析純，天津市大茂化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20120704)；乙醚(分析純，天津市大茂化學(xué)試劑有限公司)；鹽酸(分析純，天津市大茂化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20121004)；油酸、棕櫚油酸對(duì)照品(本實(shí)驗(yàn)室分離得到，純度大于99%)。

2 方法

2.1 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用條件

2.1.1 GC條件 色譜柱：DB-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；程序升溫：初溫50 ℃，保持2 min，以10 ℃·min-1上升至300 ℃保持30 min；進(jìn)樣口溫度320 ℃；進(jìn)樣量：1 μL；不分流；流速：1.0 mL·min-1；載氣：高純氦氣。

2.1.2 MS條件 電離方式EI；電子能量70 eV；傳輸線溫度：260 ℃；離子源溫度230 ℃；EMV：1400 V。

2.2 樣品溶液制備

稱取獾子油0.096 4 g、豬油0.117 4 g、蛇油0.090 4 g，分別置于50 mL圓底燒瓶中，分別加入2 mL 0.5 mol·L-1的氫氧化鉀-甲醇溶液，置75 ℃水浴中加熱回流30 min，至小油滴完全消失，分別加3 mL 15%的三氟化硼乙醚-甲醇(3 mL三氟化硼乙醚與17 mL甲醇混合均勻配制而成)溶液，混勻，置75 ℃水浴中加熱回流30 min，分別從冷凝器頂部加入3 mL正己烷繼續(xù)加熱回流3 min，取出放冷，分別加入飽和NaCl溶液，振搖分層，取上清液，無水硫酸鈉干燥，取上清液備用(甲酯化的獾子油、豬油、蛇油)。

3 結(jié)果

對(duì)甲酯化的獾子油、豬油和蛇油分別進(jìn)行GC-MS分析，由于甲酯化的獾子油和豬油GC-MS總離子流圖中含量小的化合物色譜峰不明顯，故對(duì)甲酯化的獾子油和豬油的GC-MS圖譜放大觀察，如圖1、2所示，以便觀察含量小的化合物的色譜峰。甲酯化的蛇油GC-MS總離子流圖(見圖3)，含量小的化合物色譜峰較清晰可見，故沒有對(duì)甲酯化的蛇油GC-MS總離子流圖做放大處理。圖中各色譜峰的定性工作由計(jì)算機(jī)檢索完成，檢索的匹配度很高，在900以上。采用NIST 05標(biāo)準(zhǔn)譜庫進(jìn)行檢索，同時(shí)通過面積歸一法從總離子流圖中計(jì)算各成分的相對(duì)百分含量，結(jié)果見表1。

圖1 獾子油脂肪酸成分GC-MS總離子流圖放大圖

圖2 豬油脂肪酸成分GC-MS總離子流圖放大圖

圖3 蛇油脂肪酸成分GC-MS總離子流圖

名稱分子式tR/min質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)獾子油豬油蛇油月桂酸lauricacidC12H24O212750457—1091肉豆蔻酸MyristicacidC14H28O21504337514392698棕櫚油酸PalmitoleicacidC16H30O2169364652091492811?十六碳烯酸11?HexadecenoicacidC16H30O217030542—0128棕櫚酸PalmiticacidC16H32O21713197332791725858亞油酸LinoleicacidC18H32O21877116891113113446十七烷酸HeptadecanoicacidC17H34O2181104440236—油酸OleicacidC18H34O21882477734290241736硬脂酸stearicacidC18H36O219036934131177386花生二烯酸8，11?EicosadienoicacidC20H36O22056019603020307花生一烯酸8?EicosenoicacidC20H38O22059028105860597

由表1可知，獾子油、豬油和蛇油中游離脂肪酸成分及含量均存在明顯的差異，其中獾子油中含有的飽和脂肪酸成分有月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、十七烷酸和硬脂酸；不飽和脂肪酸成分有棕櫚油酸、11-十六碳稀酸、亞油酸、油酸、花生二烯酸和花生一烯酸。獾子油中的不飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，為66.946%。豬油中不飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為57.012%，蛇油中不飽和脂肪酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為61.142%。且獾子油中含有奇數(shù)碳脂肪酸十七烷酸，其含量為0.444%。其中獾子油比豬油多出月桂酸、11-十六碳烯酸兩種成分，比蛇油多出一種十七烷酸成分；并且肉豆蔻酸、棕櫚油酸、11-十六碳烯酸、十七烷酸、油酸含量均高于蛇油和豬油。

4 討論

狗獾脂肪組織主要用來制備狗獾油，已有研究表明其具有與人類脂肪組織相似的脂肪酸組成。前期對(duì)獾子油化學(xué)成分雖有一定研究，同時(shí)研究表明獾子油可能替代豬油成為新的食用動(dòng)物油[5-6]，本文選取豬油和營養(yǎng)價(jià)值較高的蛇油作為對(duì)象，與獾子油對(duì)比分析結(jié)果表明獾子油中含有較多的不飽和脂肪酸，其含量為66.946%，其中單不飽和脂肪酸油酸的含量最高，相對(duì)含量為47.773%，均高于豬油和蛇油。且可以看出脂肪酸組成中，以油酸的含量最高，研究表明，油酸可引起胃壁黏液及游離黏液分泌量的明顯增加，從而具有保護(hù)胃黏膜損傷的作用[12]。目前，高純油酸倍受青睞，可以用作藥物吸收促進(jìn)劑，對(duì)難吸收的抗菌物質(zhì)、抗癌劑等藥品有顯著的促進(jìn)吸收效果，可以用作穩(wěn)定性和安全性高的醫(yī)藥基劑或輔助劑[13]。

獾子油中除含有多不飽和脂肪酸外，還含有一定量的單不飽和脂肪酸，以人體不可缺少的必需脂肪酸亞油酸為主。它可以降低血中膽固醇和甘油三酯，調(diào)節(jié)心臟功能，降低血液黏稠度，改善血液微循環(huán)，提高腦細(xì)胞的活性，增強(qiáng)記憶力和思維能力，增強(qiáng)人體防御系統(tǒng)的功能等[14]。因其廣泛的醫(yī)用藥用價(jià)值，目前受到高度重視。此外，獾子油中還含有一定量飽和脂肪酸，研究表明，飽和脂肪酸是心臟優(yōu)先使用的脂肪酸[15]，與心臟搏動(dòng)有著密切關(guān)系，還可以從調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、減少氧化應(yīng)激、減少炎癥及纖維化等多方面對(duì)酒精性肝病(9KE)進(jìn)行防治[16]。獾子油中還含奇數(shù)碳脂肪酸十七烷酸0.444%，該成分在蛇油中未發(fā)現(xiàn)，目前天然油脂中奇數(shù)碳脂肪酸極少[10]，其應(yīng)用多來自于一些臨床的抗癌實(shí)驗(yàn)報(bào)道[11]，因此還需要進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

獾子油除了具有藥用價(jià)值外，還有較高的營養(yǎng)價(jià)值，可為食用及食療開發(fā)新的途徑。本研究首次對(duì)獾子油、豬油和蛇油脂肪酸組成進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)三者脂肪酸成分種類及含量存在一定的差異，為獾子油的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供了參考。

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ComparisonofFattyAcidinBadgeroil，LardoilandSnakeoil

WANGYumeng，ZHULin，WENXiaoxin，DOUDeqiang*

(CollegeofPharmacy，LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Dalian116600，China)

Objective：To compare the fatty acids in badger oil，lard oil and snake oil.Methods：The sample pretreatment was achieved through methyl esterification in the presence of KOH/MeOH.The fatty acid composition of badger oil，lard oil and snake oil was analyzed by GC-MS.The peak area normalization method was used to determine and compare the percent content of each component.Results：The result showed that there existed obvious difference in free fatty acids among badger oil，lard and snake oil.11 fatty acids were detected in badger oil，more than lard oil (9 fatty acids) and snake oil (10 fatty acids).The unsaturated fatty acid of badger oil was 66.946%，higher than that of lard oil (57.012%) and snake oil (61.142%).Conclusion：There is difference in fatty acids between the badger oil and lard oil，Snake oil，the study lays the foundation for exploitation and application of badger oil.

Badger oil，lard oil，snake oil，methyl esterification GC-MS

] 竇德強(qiáng)，教授，研究方向：中藥化學(xué)；Tel：(0411)87586014，E-mail：deqiangdou@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.6.007

2016-10-13)

*[