張朝，劉妍如，史鑫波，白宏博，宋忠興，孫曉春，唐志書

(陜西中醫(yī)藥大學(xué) 陜西省中藥資源產(chǎn)業(yè)化協(xié)同創(chuàng)新中心，陜西省中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西 咸陽(yáng) 712083)

·中藥工業(yè)·

GC分析不同干燥方法對(duì)麝香中麝香酮含量的影響△

張朝，劉妍如*，史鑫波，白宏博，宋忠興，孫曉春，唐志書*

(陜西中醫(yī)藥大學(xué) 陜西省中藥資源產(chǎn)業(yè)化協(xié)同創(chuàng)新中心，陜西省中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西 咸陽(yáng) 712083)

目的：研究不同干燥方法對(duì)麝香中麝香酮含量的影響，為確定麝香較優(yōu)的干燥方法，提高麝香品質(zhì)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：采用干燥器干燥、減壓干燥、40 ℃烘箱干燥對(duì)麝香樣品進(jìn)行處理；采用氣相色譜法測(cè)定麝香酮含量。結(jié)果：不同干燥方法處理麝香藥材均能達(dá)到2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》對(duì)麝香酮含量的要求，采用干燥器干燥麝香酮含量最高；減壓干燥與烘箱烘干麝香酮含量差別不大，隨著時(shí)間的增加，麝香酮含量有所降低。結(jié)論：不同干燥方法對(duì)麝香中麝香酮含量有影響，干燥器干燥為最佳干燥方法。

氣相色譜法；干燥方法；麝香；麝香酮

麝香為鹿科動(dòng)物林麝MoschusberezovskiiFlerov、馬麝MoschussifanicusPrzewalski或原麝Moschusmos-chiferusLinnaeus成熟雄體香囊中的干燥分泌物[1]，具有開竅醒神、活血通經(jīng)、消腫止痛等功效。麝香酮含量是評(píng)價(jià)麝香質(zhì)量?jī)?yōu)劣的指標(biāo)，也為其主要有效成分，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)麝香酮有抗癡呆、抗腦缺血、抗炎、抗心肌缺血[2-5]等活性。

中藥材種類繁多，性質(zhì)差異大，含水量、溫度等外界因素容易導(dǎo)致藥材發(fā)生霉變[6]，影響中藥材的質(zhì)量。不同的干燥方式對(duì)不同藥材的影響各不相同，采用不同干燥方式對(duì)中藥材干燥藥材的性狀、含量和臨床效果也都產(chǎn)生不同的影響[7-8]，通過比較不同的干燥方式可能找到新的干燥方法，加快干燥速率，節(jié)省成本[9]，有效利用和保護(hù)中藥材資源，充分發(fā)揮其療效，保證臨床用藥的安全性與有效性。麝香為一種珍貴的藥材，其性質(zhì)特殊，自身有效成分易揮發(fā)，新鮮麝香含水量均大于50%[10]，其干燥、儲(chǔ)存都存在一定的困難，選擇合適的干燥方法，對(duì)保護(hù)中藥材資源有指導(dǎo)意義。目前關(guān)于不同干燥方式對(duì)麝香中麝香酮含量的影響研究較少，熊衛(wèi)軍等[11]采用不同的方式對(duì)麝香進(jìn)行干燥，僅從干燥后麝香性狀和質(zhì)量變化進(jìn)行分析，沒有對(duì)干燥前后麝香酮的含量確切說明；次仁旺姆[12]僅比較干燥失重和未干燥的麝香樣品麝香酮含量的變化，方法較為單一，使得結(jié)果分析不充分。本實(shí)驗(yàn)以3種不同的干燥方法對(duì)麝香進(jìn)行干燥，并采用氣相色譜法測(cè)定各個(gè)干燥時(shí)間段的麝香酮的含量，從而考察不同干燥方法對(duì)麝香中麝香酮含量的影響，為麝香干燥方式的選擇提供一定的借鑒，并對(duì)測(cè)定麝香酮的不同色譜柱和不同色譜條件進(jìn)行比較，為麝香酮測(cè)定方法的選擇提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 儀器與試劑

1.1 主要儀器

Agilent Technologies 7890B GC System氣相色譜儀(美國(guó)Agilent 公司)，Chemstation工作站(美國(guó)Agilent 公司)，色譜柱：Agilent DB-17(30 m×0.32 mm，0.25 μm，50%苯基-甲基聚硅氧烷，美國(guó)Agilent 公司)、Agilent HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm，5%-苯基-甲基聚硅氧烷，美國(guó)Agilent 公司)，Sartorius CPA225D十萬(wàn)分之一電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司]，101型電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京科偉永興儀器有限公司)，VaCo冷凍減壓干燥器[嘉盛(香港)科技有限公司]，玻璃干燥器(內(nèi)徑×外徑×內(nèi)高×外高,300 mm×365 mm×235 mm×365 mm)，干燥劑為硅膠。

1.2 藥物與試劑

麝香來源于陜西省動(dòng)物保護(hù)協(xié)會(huì)(批號(hào)：20160301、20160302、20160303)，麝香酮對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110719-201215)，無水乙醇為色譜級(jí)，脫水硅膠。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品處理

取麝香樣品，過1號(hào)篩，每個(gè)樣平均分成3份，分別采用烘箱、真空低溫減壓和干燥器(脫水硅膠)3種方法干燥，每6 h取樣，發(fā)現(xiàn)6 h干燥器水分變化差異很小，通過實(shí)驗(yàn)，每隔5 d從干燥器取樣比較合理，各條件的干燥物理參數(shù)見表1。

表1 麝香不同干燥條件參數(shù)

2.2 溶液的制備

2.2.1對(duì)照品溶液的制備 精密吸取麝香酮對(duì)照品制成質(zhì)量濃度為15.300 mg·mL-1的麝香酮儲(chǔ)備液，精密稱取麝香酮儲(chǔ)備液1 mL加無水乙醇定容于10 mL容量瓶中，制成質(zhì)量濃度為1.530 mg·mL-1的對(duì)照品溶液，備用。

2.2.2供試品溶液的制備 參照《中華人民共和國(guó)藥典》(2015版)麝香中麝香酮的含量測(cè)定的制樣方法，精密稱取不同干燥方法下所得的麝香樣品粉末約0.2 g，精密加無水乙醇2.0 mL，密塞，振搖，放置1 h，0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 氣相色譜條件

Agilent Technologies 7890B GC System氣相色譜儀，色譜柱為Agilent DB-17(30 m×0.32 mm，0.25 μm)，進(jìn)樣口溫度：250 ℃，程序升溫：初始溫度160 ℃，保持2 min，以5 ℃·min-1升至300 ℃，維持10 min；載氣：氮?dú)?純度≥99.999%)，流速：1.0 mL·min-1，進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣(分流比50∶1)，進(jìn)樣量：1.0 μL，檢測(cè)器：FID檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度：250 ℃。

2.4 線性關(guān)系考察

精密吸取2.2.1項(xiàng)下麝香酮儲(chǔ)備液0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50 mL，于5 mL容量瓶中，加無水乙醇定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度范圍為0.765～7.650 mg·mL-1的系列麝香酮對(duì)照品溶液，待用。在上述優(yōu)化的色譜條件下進(jìn)行分析，以麝香酮質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程Y=518.13X-6.472 2；r=0.999 7，表明麝香酮在0.765～7.650 mg·mL-1呈良好的線性關(guān)系。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同批供試品溶液，按2.3項(xiàng)色譜條件分別在0、2、4、8、12、24、48 h內(nèi)測(cè)定，麝香酮含量在24 h內(nèi)的RSD=0.62%，48 h內(nèi)的RSD=0.61%，表明供試品在24、48 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，按2.3項(xiàng)色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，RSD=1.24%，表明試驗(yàn)重復(fù)性良好。

2.7 精密度試驗(yàn)

取同一對(duì)照品溶液，按2.3項(xiàng)色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，RSD=0.82%，表明儀器的精密度良好。

2.8 定量下限與檢出下限

取對(duì)照品溶液，稀釋成系列濃度，按2.3項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，測(cè)得定量下限為30.6 μg·mL-1，檢出下限為22.8 μg·mL-1。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的麝香按2.2.2項(xiàng)制備樣品，取2.2.1項(xiàng)下制備的已知量的對(duì)照品溶液，樣品與對(duì)照品總含量的比為0.8∶1、1∶1，1.2∶1，制樣，按2.3項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定其加樣回收率，結(jié)果見表2。

表2 麝香中麝香酮加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

2.10 測(cè)定結(jié)果與結(jié)論

通過3種干燥方法對(duì)20160301、20160302、20160303 3批麝香樣品進(jìn)行測(cè)定，得到各個(gè)干燥時(shí)段麝香樣品中麝香酮含量，見表3。

20160301、20160302、20160303批未干燥前麝香酮含量分別為19.13、21.90、17.69 mg·g-1，含水量分別約為65.3%、62.7%、68.5%，以《中華人民共和國(guó)藥典》中對(duì)麝香含水量小于35%為標(biāo)準(zhǔn)，比較3種干燥方法。40 ℃干燥12 h，平均含水量為13.5%；低溫減壓干燥6 h，平均含水量為9.3%；干燥器干燥10 d，平均含水量為15.8%，均能達(dá)到《中華人民共和國(guó)藥典》對(duì)麝香酮含量和含水量的要求。麝香酮含量的變化趨勢(shì)都是先增長(zhǎng)、后減少，但40 ℃干燥與減壓干燥干燥速度快，麝香酮含量變化快、損失較多；干燥器干燥條件溫和，能長(zhǎng)時(shí)間保持穩(wěn)定，干燥20 d麝香酮含量一直增長(zhǎng)，變化趨勢(shì)越來越小。鑒于麝香為一種貴重動(dòng)物類藥材，相對(duì)于其他兩種干燥方式，干燥器干燥對(duì)其指標(biāo)性成分的含量影響較小。

表3 不同干燥方法的麝香中麝香酮含量變化

3 討論

3.1 不同氣相條件及不同色譜柱的考察

用GC對(duì)吳芬宏[13]測(cè)定麝香中麝香酮含量的方法進(jìn)行優(yōu)化，分別對(duì)檢測(cè)器、分流比、載氣流量等幾個(gè)因素進(jìn)行考察，發(fā)現(xiàn)麝香酮在檢測(cè)器250 ℃、分流比50∶1、載氣流量為1.0 mL·min-1時(shí)有更好的峰形。

對(duì)于同一組樣品，采用不同的色譜柱和不同的條件進(jìn)樣，得到的峰形如圖1所示，得到的色譜峰的各項(xiàng)參數(shù)見表4。

注：1.梯度升溫DB-17 色譜柱；2.梯度升溫HP-5色譜柱； 3.200 ℃恒溫DB-17色譜柱；4.200 ℃恒溫HP-5色譜柱。圖1 麝香酮不同進(jìn)樣條件及色譜柱之間的比較

色譜柱tR對(duì)稱因子峰高峰面積峰寬塔板數(shù)DB?17114509331820863000058218321HP?5108115427891936490052234887DB?175850261834426161201676841HP?552815035653238374010314608

由表4可以看出，相同色譜柱在不同的進(jìn)樣條件下保留時(shí)間、峰面積、峰寬和塔板數(shù)差異都比較大；DB-17色譜柱進(jìn)樣條件不同對(duì)對(duì)稱因子和峰高影響也大；不同的色譜柱對(duì)稱因子差異較大，200 ℃恒溫進(jìn)樣對(duì)峰高和理論塔板數(shù)影響也較大。由此可見，相對(duì)DB-17和HP-5色譜柱，氣相條件的改變對(duì)麝香酮峰形各參數(shù)的影響更大。

3.2 不同干燥方式麝香的性狀差異

麝香干燥時(shí)，干燥樣品的性狀也有所差異，各干燥樣品外觀見圖2。40 ℃烘箱中干燥(A)與干燥器中干燥(B)得到的麝香樣品均為黑褐色小塊狀(1～5 mm)，低溫減壓干燥(C)得到的干燥物呈灰黃色顆粒狀(0.5～2 mm)；將3種不同方法干燥的同批樣品麝香按2.2.2項(xiàng)方法制備樣品，發(fā)現(xiàn)低溫減壓干燥的樣品溶液顏色深于其他兩種干燥方法，但麝香酮的含量低于其他兩種方法，從以上兩種現(xiàn)象推測(cè)，麝香酮為易揮發(fā)性成分，負(fù)壓條件下麝香酮損失快，低溫減壓條件下麝香酮的含量相對(duì)較低；在無水乙醇中，低溫減壓干燥的麝香顆粒相對(duì)比表面積比其他干燥方式的大，所制備的進(jìn)樣液顏色較其他兩種方法深。

注：A.40 ℃烘干干燥；B.干燥器干燥；C.低溫減壓干燥。圖2 麝香不同干燥樣品

3.3 幾種麝香干燥方法對(duì)藥材保存的借鑒

溫度、比表面積和壓力等因素對(duì)麝香干燥都會(huì)產(chǎn)生影響，干燥后麝香酮的含量會(huì)逐漸降低[11]，所以將麝香保存到低溫、密封的環(huán)境中更有利于藥材的長(zhǎng)久保存。3種麝香干燥方法中，烘干與低溫減壓干燥速度快，能很快達(dá)到《中華人民共和國(guó)藥典》中對(duì)含水量的要求，干燥條件較為苛刻，麝香酮含量和水分變化快，對(duì)于含水量不同的麝香樣品，干燥時(shí)間難以控制；干燥器干燥時(shí)間長(zhǎng)，麝香酮和含水量的變化都比較小，是一種相對(duì)較優(yōu)的干燥方式。

對(duì)不同的藥材，應(yīng)選擇合適的干燥方式。合理的干燥方式應(yīng)首先從藥物的性質(zhì)方面考慮，有效成分容易損失的藥材要考慮干燥方式對(duì)藥材質(zhì)量和藥效的影響，避免藥材的臨床應(yīng)用效果受到影響。

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GCAnalysisofMusconeinMuskbyDifferentDryingMethods

ZHANGZhao，LIUYanru*，SHIXinbo，BAIHongbo，SONGZhongxing，SUNXiaochun，TANGZhishu*

(ShanxiCollaborativeInnovationCenterofChineseMedicinalResourcesIndustrialization，ShanxiprovincekeylaboratoryofnewdrugsandChinesemedicinefoundationresearch，ShaanxiUniversityofChineseMedicine，Xianyang712083，China)

Objective：To study the effect of various drying methods on the content of muscone in Musk and provide the solution to achieve the best condition of drying and enhance the Musk quality.Methods：dryer、freeze vacuum dryingand oven-drying were used to prepare the Musk.The contents of muscone were determined by gas chromatography(GC).Results：The content of muscone could meet the requirement according to Pharmacopoeia of the People′s Republic of China(2015)by above dried methods.Among them the content of muscone in Musk dried by dryer is higher than others.There was slightly difference between freeze vacuum dryingand oven-drying,moreover，the content of musconedecreased with the time prolonged.Conclusion：The impact of various dry methods on the content of muscone is marked and the dryer is the best.

Gas chromatography；drying method；Musk；muscone

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81501229)；陜西省協(xié)同創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(2015XT-35)；陜西省教育廳專項(xiàng)科研計(jì)劃項(xiàng)目(320104-203010012)；陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃項(xiàng)目(2011KTCL03-05)

] 唐志書，教授，研究方向：中藥制劑制備技術(shù)，Tel：(029)38180560，E-mail：tzs6565@163.com；劉妍如，講師，博士，研究方向：藥物分析，Tel：(029)38182207，E-mail：yanzi_2203@aliyun.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.6.022

2016-08-22)

*[