鄭世英　耿建芬　賈海慧

摘要 為生產(chǎn)出紫薯脫毒苗，進行了紫薯濟薯18號脫毒苗的芽誘導(dǎo)及快繁技術(shù)研究。結(jié)果表明，濟薯18號莖尖分生組織最佳芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.6 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培養(yǎng)基中，當(dāng)NAA濃度為1.0 mg/L時，莖的出芽和生根所需時間最短，培養(yǎng)28 d后葉片數(shù)和生根數(shù)也最多；但根長和株高在NAA濃度為0.1 mg/L時最高，說明NAA在較低濃度時促進根的生長。在6-BA濃度為0.1 mg/L時，株高最高，根最長；在6-BA濃度為1.0 mg/L時，脫毒苗的生根生芽時間最短，根數(shù)最多，葉片數(shù)也最多。

關(guān)鍵詞 紫薯；濟薯18號；脫毒苗；芽誘導(dǎo)；快繁技術(shù)

中圖分類號 S531 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）15-0024-01

紫薯[Ipomoea batatas（L.）Poir.]屬旋花科（Convolvulaceae）番薯屬，又叫黑薯，其薯肉呈紫色至深紫色[1]。紫薯除了含有普通紅薯的營養(yǎng)成分外，還富含硒元素和花青素等營養(yǎng)成分，及豐富的蛋白質(zhì)、磷、鐵及VC、VB、VA等[2]。實際生產(chǎn)中，紫薯病毒病是影響產(chǎn)量和品質(zhì)的主要因素之一[3]。通過組織培養(yǎng)繁育紫薯脫毒苗是目前防治紫薯病毒病的有效途徑之一[4]。本試驗通過不同培養(yǎng)基和植物生長調(diào)節(jié)劑對濟薯18號（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所繁育）脫毒試管苗組培快繁進行研究，以期為濟薯18號脫毒苗的快繁生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試紫薯品種為濟薯18號，置于（30±2）℃溫室中培養(yǎng)。

1.2 試驗方法

1.2.1 培養(yǎng)基設(shè)計。MS培養(yǎng)基，pH值5.8～6.0，蔗糖含量3.0%，瓊脂0.7%，誘導(dǎo)培養(yǎng)基中6-BA設(shè)3個濃度即0.4、0.6、0.8 mg/L、NAA設(shè)3個濃度即0.1、0.2、0.3 mg/L，共組合成9種培養(yǎng)基。

1.2.2 外植體接種。取濟薯18號植株，去掉大部分葉片、葉柄后，先用0.1%洗衣粉液洗滌，再用蒸餾水清洗干凈，置于超凈工作臺上進行滅菌處理（先在75%酒精中浸泡30 s，再用0.1% HgCl2溶液消毒15～20 min，再用無菌水清洗干凈）。在超凈工作臺上將濟薯18號脫毒苗修剪成段，截成1 cm左右并且?guī)?～2個腋芽的小段，在設(shè)計好的培養(yǎng)基上進行接種。每瓶接種5個外植體，觀察其生長狀況。

1.2.3 培養(yǎng)條件。每處理接種9瓶、每瓶接種2株。置于28～30 ℃條件下，日光燈照射培養(yǎng)，光照11 h/d條件下培養(yǎng)[5-6]。

1.2.4 病毒檢測。每試管紫薯苗取2片葉，采用斑點酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測試管苗是否攜帶病毒[7-9]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對脫毒苗的誘導(dǎo)

從表1可以看出，接種后的外植體經(jīng)過12～20 d誘導(dǎo)，9種培養(yǎng)基上均可生長為體積比較大、質(zhì)地致密的愈傷組織。所有培養(yǎng)基出愈率均為100%；除培養(yǎng)基M-6及M-9的出根率分別為25.0%和26.6%外，其余培養(yǎng)基的出根率均為100.0%。外植體在培養(yǎng)基M-1、M-2、M-4、M-5上可誘導(dǎo)出芽，其中培養(yǎng)基M-1、M-2出芽率均為100.0%，培養(yǎng)基M-4、M-5出芽率分別為33.3%和36.7%。外植體在培養(yǎng)基M-3、M-6、M-7、M-8、M-9上經(jīng)過培養(yǎng)只能誘導(dǎo)出愈傷組織，不能誘導(dǎo)出芽。培養(yǎng)基M-1、M-2、M-4、M-5上誘導(dǎo)的外植體出芽平均時間分別為34、30、42、46 d。

2.2 脫毒苗的病毒檢測

經(jīng)檢測，M-1、M-2、M-4、M-5培養(yǎng)基上誘導(dǎo)的紫薯苗脫毒率分別為100%、96%、95%和100%。

2.3 脫毒苗的快速繁殖

2.3.1 NAA對脫毒苗生長的影響。從表2可以看出，當(dāng)NAA濃度為1.0 mg/L時，濟薯18號脫毒幼苗5.8 d產(chǎn)生根原基，9.2 d開始出芽，28 d后根長4.5 cm、新生根數(shù)8.6條、葉片數(shù)4.6片、平均株高6.0 cm。當(dāng)NAA濃度為0.1 mg/L時，根和莖生長較快，出芽和生根時間相對比較長，說明較低濃度的NAA不利于生根和出芽。當(dāng)NAA濃度大于1.0 mg/L時，隨著NAA濃度的不斷提高，出芽及生根時間延長，根長、葉片數(shù)及株高不斷降低，說明較高濃度NAA處理濟薯18號對根、芽、葉片數(shù)、株高等的形成是不利的。由此可以說明，0.5～1.0 mg/L NAA能促進濟薯18號脫毒試管苗的生長發(fā)育。

2.3.2 6-BA對脫毒苗生長的影響。從表3可以看出，不同濃度的6-BA對MS培養(yǎng)基中濟薯18號脫毒苗的出芽時間、生根時間、生根數(shù)、根長、葉片數(shù)和株高均有一定影響。當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg/L時，脫毒苗出芽只需7.6 d，生根需要4.7 d，單株根數(shù)4.6條，單株葉片數(shù)4.5片。6-BA濃度為0.1 mg/L時，根最長，達(dá)5.5 cm，株高生長最快，達(dá)5.2 cm。當(dāng)6-BA濃度為2.5、3.0 mg/L時，抑制了根的形成，幼根數(shù)目為0，但對葉片影響較小。說明當(dāng)6-BA濃度為0.1～1.0 mg/L時，更有利于濟薯18號脫毒苗根和芽的生長。

3 結(jié)論與討論

本試驗結(jié)果表明，濟薯18號莖尖分生組織最佳芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.6 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培養(yǎng)基中，當(dāng)NAA濃度為1.0 mg/L時，莖的出芽和生根所需時間最短，培養(yǎng)28 d后葉片數(shù)和生根數(shù)也最多。但根長和株高在NAA濃度為0.1 mg/L時最高，說明NAA在較低濃度時促進根的生長。在6-BA濃度為0.1 mg/L時，株高最高，根最長；在6-BA濃度為1.0 mg/L時，脫毒苗的生根生芽時間最短，根數(shù)最多，葉片數(shù)也最多，說明較低濃度的6-BA有利于脫毒苗根和植株的生長。NAA和6-BA在根的數(shù)目和根的長度上NAA優(yōu)于6-BA，在出芽和生根時間上6-BA較NAA快。

4 參考文獻

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