陳晨

哈爾濱珍寶制藥有限公司

注射用血塞通與濾芯相容性研究

陳晨

哈爾濱珍寶制藥有限公司

目的評(píng)估注射用血塞通與密理博公司的聚偏二氟乙烯濾芯相容性。方法測定在進(jìn)行除菌過濾前后濾芯的泡點(diǎn)差異、流速差異及聚集性差異，以此評(píng)察血塞通藥液與濾芯的相容性；對(duì)可獲得的提取物進(jìn)行紫外、紅外及生物分析，對(duì)可提取物進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)估；通過微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)，驗(yàn)證濾芯對(duì)細(xì)菌截留能力；對(duì)生產(chǎn)過程中溶液相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行測定，評(píng)價(jià)濾芯對(duì)藥液的影響。結(jié)果：泡點(diǎn)、流速及聚集性差異測定結(jié)果符合要求，毒理學(xué)評(píng)估結(jié)果符合要求，藥液與濾芯之間無相互作用。結(jié)論：血塞通溶液與濾芯相容性良好，聚偏二氟乙烯濾芯可用于注射用血塞通樣品生產(chǎn)時(shí)除菌過濾。

過濾系統(tǒng)；相容性；驗(yàn)證

藥品在生產(chǎn)過程中的除菌過濾是在不影響產(chǎn)品質(zhì)量的前提下，通過過濾系統(tǒng)(濾芯)去除藥液微生物及不溶性微粒的工藝過程，該過程是注射劑產(chǎn)品生產(chǎn)過程中主要生產(chǎn)工序。注射劑在除菌過濾時(shí)選擇合適的濾芯尤為關(guān)鍵，所用的濾芯與藥液不應(yīng)發(fā)生相互作用，即藥液與濾芯之間的相容性要符合要求，如相容性不好，患者用藥時(shí)會(huì)存在極大安全隱患，為保證患者用藥安全，我們對(duì)注射用血塞通與濾芯相容性進(jìn)行驗(yàn)證[1-3]，評(píng)價(jià)相容性是否符合要求。

1.實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備

密理博聚偏二氟乙烯（孔徑0.22微米，10英寸）；注射用水、純化水、藥液；挑戰(zhàn)微生物為B.diminuta美國標(biāo)準(zhǔn)菌庫19146；密理博Integritest 4完整性測試儀，蠕動(dòng)泵。

2.驗(yàn)證過程

2.1.泡點(diǎn)、流速及聚集性差異測定。

上述考察指標(biāo)是藥液與濾芯相容性是否符合指標(biāo)的關(guān)鍵考察項(xiàng)，試驗(yàn)藥液使用血塞通溶液作為浸泡液，注射用水作為后沖洗溶液，在22±4℃條件下用藥液將濾芯浸泡16小時(shí)，測定泡點(diǎn)差異、流速差異及聚集性差異（測定結(jié)果均應(yīng)小于5.0%），結(jié)果表明濾芯與藥液相容性良好，詳細(xì)測定結(jié)果見表1。

表1 差異測定

2.2 毒理學(xué)評(píng)估

實(shí)驗(yàn)開始前，將濾芯在121℃的條件下濕熱滅菌30min，重復(fù)滅菌五次。然后在35℃的條件下置于無水乙醇中浸泡24小時(shí)。經(jīng)離心后分析檢測，確定聚偏二氟乙烯濾芯的最大析出物量為56.8mg，因此，處理一批注射用血塞通后，過濾最大析出物量約為56.8mg。采用相同處理方法，對(duì)所得浸提液進(jìn)行紫外分析，在230nm至350nm進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果所有樣品的紫外吸收均小于0.002，可見溶出物量極小，并且在無紫外吸收。采用溴化鉀壓片法對(duì)所得物進(jìn)行紅外光譜測定分析，結(jié)果紅外吸收峰與聚乙二醇及聚乙烯比咯烷酮吸收峰一致，測定結(jié)果與濾芯成分相符。除進(jìn)行上述試驗(yàn)研究外，我們委托默克密理博生物中心對(duì)浸出物[4]進(jìn)行生物安全性試驗(yàn)，結(jié)果顯示聚偏二氟乙烯濾芯部件是沒有毒性的，不存在安全隱患。

2.3 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)

注射用血塞通為非終端滅菌制劑，按照無菌操作法相關(guān)要求及本品劑型特點(diǎn)，無菌過濾驗(yàn)證為關(guān)鍵步驟。驗(yàn)證濾芯對(duì)藥液中浸入B.diminuta菌的截留能力。試驗(yàn)溶液中每cm2含細(xì)胞（B. diminuta）數(shù)量應(yīng)大于等于107個(gè)。實(shí)驗(yàn)用濾芯預(yù)先經(jīng)過泡點(diǎn)試驗(yàn)，預(yù)先滅菌，完整性符合要求。先將試驗(yàn)用挑戰(zhàn)物加入血塞通溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)果表明藥液對(duì)挑戰(zhàn)菌無影響，因此，不需要替代方法進(jìn)行試驗(yàn)，可將挑戰(zhàn)菌加入藥液中進(jìn)行測試。在實(shí)驗(yàn)過程中采用藥液在最差條件（產(chǎn)品工藝規(guī)程中規(guī)定的上限或者下線條件組合）下進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)。挑戰(zhàn)時(shí)溫度在22±4℃的溫度條件下，壓力大于等于58psi，需要總時(shí)間為12小時(shí)。取末端溶液進(jìn)行培養(yǎng)，挑戰(zhàn)物質(zhì)B.diminuta在SLB培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，通過TSA涂布技術(shù)測定，在實(shí)驗(yàn)前后需要將涂布板在30±2℃條件下培養(yǎng)48到72小時(shí)，接種后，檢驗(yàn)每塊板并記錄菌落數(shù)，實(shí)驗(yàn)過程中同時(shí)進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，結(jié)果表明濾芯可對(duì)驗(yàn)證菌進(jìn)行有效截留。

2.4 生產(chǎn)過程中驗(yàn)證

對(duì)三批大生產(chǎn)樣品進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)合產(chǎn)品特點(diǎn)，進(jìn)行相應(yīng)工藝驗(yàn)證，濾芯過濾時(shí)的取樣點(diǎn)為精濾前藥液及終端過濾后藥液，對(duì)各取樣點(diǎn)的性狀、pH值、可見異物、溶液澄清度與顏色、不溶性微粒、有關(guān)物質(zhì)及含量進(jìn)行測定，結(jié)果三批樣品在各個(gè)取樣點(diǎn)的各項(xiàng)考察指標(biāo)無明顯差異，表明濾芯對(duì)藥液的各項(xiàng)指標(biāo)無影響。對(duì)生產(chǎn)過程中過濾前后濾芯的泡點(diǎn)進(jìn)行測試，結(jié)果均符合規(guī)定，過濾前后藥液的測定結(jié)果見表2。

表2 理化測定結(jié)果

3.討論

無菌檢查符合要求是注射劑產(chǎn)品的關(guān)鍵指標(biāo)之一，在使用濾芯對(duì)藥液進(jìn)行除菌過濾時(shí)，除關(guān)注藥液的無菌指標(biāo)外，越來越關(guān)注藥液與濾芯的相互影響，在使用濾芯進(jìn)行除菌過濾時(shí)，藥液及濾芯之間應(yīng)無相互影響。為提高產(chǎn)品質(zhì)量，保證患者用藥安全，我們對(duì)血塞通藥液與密理博10inch聚偏二氟乙烯濾芯的相容性進(jìn)行研究，泡點(diǎn)、流速及聚集性差異的測定結(jié)果表明藥液對(duì)濾芯無影響，細(xì)菌截留試驗(yàn)表明該濾芯可保證生產(chǎn)過程中有效除菌，生產(chǎn)過程中藥液各項(xiàng)指標(biāo)考察結(jié)果表明濾芯對(duì)藥液無影響，上述研究結(jié)果表明血塞通與密理博的聚偏二氟乙烯相容性良好。

[1]黃曉龍，董巍，唐燕.除菌過濾器驗(yàn)證（一）：法規(guī)要求概述.中國新藥雜志，2011,20（10）：861-865.

[2]李芳，范運(yùn)，張俊偉.注射液生產(chǎn)過程中過濾系統(tǒng)的驗(yàn)證.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2012,43（7）：628-631.

[3]葉璇，羅嬌，胡明.液體除菌過濾器和除菌過濾工藝的驗(yàn)證.醫(yī)藥工程設(shè)計(jì)，2012,33（4）:19-22.

[4]洪海燕，唐燕，董巍，謝婷.除菌過濾器驗(yàn)證（三）：溶出物/析出物驗(yàn)證.中國新藥雜志，2011,20（14）：1266-1269.