文/丁勇 孫陽(yáng) 劉彤 陳文博 宋曉陽(yáng) 周竹君 李艷秋

不同藥物對(duì)海灣扇貝受精卵孵化的影響

文/丁勇 孫陽(yáng) 劉彤 陳文博 宋曉陽(yáng) 周竹君 李艷秋

為提高海灣扇貝受精卵孵化率保證成活率，解決實(shí)際生產(chǎn)中由于海灣扇貝產(chǎn)卵孵化率低的實(shí)際生產(chǎn)問(wèn)題問(wèn)題，進(jìn)行了海灣扇貝受精卵孵化階段不同藥物處理試驗(yàn)。對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果：1ppm EDTA和2ppm土霉素同時(shí)處理組海灣扇貝受精卵孵化率高達(dá)82%，畸形率最低8.5%，實(shí)際生產(chǎn)中采用兩種藥物的混合處理技術(shù)，很好地解決了海灣扇貝受精卵孵化率低畸形率高的的問(wèn)題，避免了種貝的大量浪費(fèi)，提高了產(chǎn)量。

海灣扇貝（Argopecten irradians Lamarck）隸屬軟體動(dòng)物門(mén)、珍珠貝目、扇貝科、海灣扇貝屬，海灣扇貝養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展平穩(wěn)，是遼寧地區(qū)最主要的水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)種類(lèi)。耐溫范圍為-1℃～31℃,5℃以下停止生長(zhǎng)，10℃以下生長(zhǎng)緩慢，18℃～28℃生長(zhǎng)較快。對(duì)鹽度適應(yīng)范圍廣，鹽度在16～43之間都能生存，最適生長(zhǎng)鹽度為21～35生活于透明度大、不受污染、溶氧較高的海區(qū)、濾食海水的微生物、單細(xì)胞藻類(lèi)、有機(jī)碎屑、海洋微小生物。幼蟲(chóng)期營(yíng)浮游生活，稚貝期營(yíng)固著生活，成體無(wú)足絲，平躺于海底。

目前，海灣扇貝實(shí)際生產(chǎn)育苗過(guò)程中種貝為雌雄同體。因此在種貝產(chǎn)卵孵化階段會(huì)產(chǎn)生大量精液，從而嚴(yán)重影響受精卵的孵化率，同時(shí)由于精液量過(guò)大增大了受精卵畸形率。本研究采用EDTA和幾類(lèi)抑菌類(lèi)藥物的使用，有效控制了受精卵的畸形率，提高了受精卵孵化率，改良原有的生產(chǎn)技術(shù)，節(jié)約種貝使用量提高生產(chǎn)效率。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)材料

親貝于2017年2月從山東購(gòu)進(jìn)，在遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院育種中心培育車(chē)間暫養(yǎng)1個(gè)月。性腺肥滿(mǎn)度達(dá)25%以上時(shí)即可進(jìn)行產(chǎn)卵。在親貝暫養(yǎng)池選取海灣扇貝殼高12cm以上，性腺飽滿(mǎn)度好，外型規(guī)則，活力好，進(jìn)行產(chǎn)卵孵化。

藥物：乙二胺四乙酸（EDTA）、土霉素、氨芐西林鈉、氟苯尼考

2.試驗(yàn)器材

26m3育苗池若干，增氧設(shè)備，種貝贊養(yǎng)框，水舀，水桶等，按照常規(guī)育苗技術(shù)進(jìn)行產(chǎn)卵孵化。

3.試驗(yàn)方法

試驗(yàn)設(shè)混合藥物處理A.B.C、單一藥物處理組D.E.F.G和無(wú)藥物處理H（對(duì)照）8組，每組各設(shè)3個(gè)重復(fù)。選取暫養(yǎng)一個(gè)月的種貝自然產(chǎn)卵，產(chǎn)卵后直接按照不同處理組投放藥物，每個(gè)孵化池密度控制在50個(gè)/mL，24h后孵化出擔(dān)輪幼蟲(chóng)，計(jì)算成活個(gè)體數(shù)，取樣觀察發(fā)育畸形個(gè)體所占比例，計(jì)算受精卵孵化率和幼體畸形率。A:EDTA和土霉素；B:EDTA和氨芐西林鈉；C:EDTA和氟苯尼考；D:EDTA；E:土霉素；F:氨芐西林鈉；G:氟苯尼考。藥物處理濃度均為2ppm。

4.計(jì)算方法

試驗(yàn)過(guò)程中的受精卵孵化率和幼體畸形率分別用以下公式計(jì)算：

孵化率=孵化出擔(dān)輪幼蟲(chóng)密度/布池受精卵密度100%

畸形率=發(fā)育畸形幼體數(shù)/孵化出擔(dān)輪幼蟲(chóng)×100%

5.數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用Excel2003處理，采用單因素方差分析各水平間差異的顯著性。對(duì)檢驗(yàn)達(dá)顯著的平均值用Duncan’s多重比較檢驗(yàn)水平間的差異。方差分析和多重比較均用SPSS17.0進(jìn)行。

二、結(jié)果

1.藥物處理對(duì)海灣扇貝受精卵孵化率影響試驗(yàn)

由表1可知，藥物處理對(duì)海灣扇貝受精卵孵化有明顯的影響。對(duì)照組H和單一EDTA處理組D孵化率最低4.44%，抗生素藥物和EDTA混合處理組的孵化率顯著高于單一藥物處理組，其中土霉素和EDTA混合使用實(shí)驗(yàn)組A孵化率最高達(dá)到11.11%。

表1.藥物處理對(duì)海灣扇貝受精卵孵化率影響

2.藥物處理對(duì)海灣扇貝孵化幼體畸形率影響試驗(yàn)

由表2可知，藥物處理對(duì)海灣扇貝孵化幼體畸形率有明顯的影響。EDTA藥物處理實(shí)驗(yàn)組的畸形率均顯著低于未經(jīng)EDTA處理的實(shí)驗(yàn)組，畸形率最低是土霉素和EDTA混合處理組A僅為12%。

表2.藥物處理對(duì)海灣扇貝孵化幼體畸形率影響

三、討論

由于海灣扇貝雌雄同體自體受精，在產(chǎn)卵過(guò)程中精液的量無(wú)法有效控制，精液量過(guò)大是導(dǎo)致整體受精卵孵化率較低和幼體畸形率較高的主要原因。在此基礎(chǔ)上，選用不同藥物處理，以求在此基礎(chǔ)上提高受精卵孵化率降低幼體畸形率。

EDTA是主要的重金屬絡(luò)合劑，養(yǎng)殖水體中重金屬離子含量過(guò)高會(huì)造成幼體畸形同時(shí)也會(huì)降低受精卵孵化率，這一點(diǎn)已經(jīng)被國(guó)內(nèi)外諸多學(xué)者證實(shí)。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，加入EDTA的實(shí)驗(yàn)處理組，孵化出幼體畸形率較其他實(shí)驗(yàn)組低，差異顯著。正好證明了EDTA對(duì)重金屬絡(luò)合有一定作用，進(jìn)而降低幼體畸形率。

抗生素類(lèi)藥物對(duì)抑制有害細(xì)菌的生長(zhǎng)和爆發(fā)有重要作用，從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，由于孵化期間不換水，大量精液卵膜等有害物質(zhì)存在水體中，水溫較高，未投放抗生素藥物的實(shí)驗(yàn)組受精卵孵化率普遍較低，生產(chǎn)實(shí)際過(guò)程中還伴有孵出幼體沉底現(xiàn)象。加入抗生素藥物的處理組受精卵孵化率得以保證，結(jié)合生產(chǎn)成本及食品質(zhì)量安全等問(wèn)題，選擇土霉素作為海灣扇貝受精卵孵化期間的抗菌藥物最為合適。

作者單位：遼寧省大連市水產(chǎn)技術(shù)推廣總站