秦召敏,沈欽海,孔瑞雪

(山東醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)系,濟(jì)南 250002)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb與冠心病冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病變嚴(yán)重程度的關(guān)系

秦召敏,沈欽海,孔瑞雪

(山東醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)系,濟(jì)南 250002)

目的 探討血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)、趨化因子巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α(MIP-1α)、血小板膜Ⅰb(GPⅠb)與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病變嚴(yán)重程度的關(guān)系。方法 2015年6月至2016年6月選取行冠狀動(dòng)脈造影患者260例，根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果分為正常組(n=60)、單支病變組(n=75)、雙支病變組(n=65)、三支病變組(n=60)，應(yīng)用Gensini積分法評(píng)價(jià)冠心病冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病變嚴(yán)重程度，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定各組血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb水平。采用Pearson相關(guān)性分析Gensini積分與冠心病血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb水平的相關(guān)性，多因素Logistic分析影響冠心病冠狀動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)因素。結(jié)果 與正常組相比，單支病變組、雙支病變組、三支病變組總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb水平顯著升高(P<0.05)；而高密度脂蛋白(HDL-C)、左心射血分?jǐn)?shù)(LVEF)水平下降(P<0.05)；且隨著冠狀病變支數(shù)增多，TC、TG、LDL-C、CRP、血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb水平顯著升高(P<0.05)，而HDL-C、LVEF水平顯著下降(P<0.05)。經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，Gensini積分與LDL-C、CRP、Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb呈正相關(guān)(P<0.05)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。經(jīng)多因素Logistic分析， LDL-C、Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb是冠心病冠狀動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)因素，而HDL-C是冠心病動(dòng)脈粥樣硬化的保護(hù)因素。結(jié)論 血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb與冠心病冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病發(fā)生有密切的關(guān)系，可為臨床無(wú)創(chuàng)評(píng)價(jià)冠心病動(dòng)脈病變提供新的指導(dǎo)方法。

冠心??；脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2；趨化因子巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α；血小板膜GPⅠb；冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病變

血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平升高與心血管疾病事件發(fā)生有密切的關(guān)系[1-3]。趨化因子巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α(MIP-1α)屬于CC類(lèi)趨化細(xì)胞因子，具有介導(dǎo)炎癥因子生成，促進(jìn)斑塊形成的作用[4]。在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病過(guò)程中除了炎癥介導(dǎo)的損傷起重要作用外，活化血小板在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中也起到重要的作用[5]。血小板膜Ⅰb(GPⅠb)是血小板膜表達(dá)主要蛋白之一，可活化血小板，促進(jìn)血小板聚集并形成斑塊[6]。本研究將探討血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb與冠心病冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病發(fā)生有密切的關(guān)系，旨在為臨床無(wú)創(chuàng)評(píng)價(jià)冠心病動(dòng)脈病變提供指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年6月至2016年6月選取行冠狀動(dòng)脈造影患者260例，排除先天性心臟病、瓣膜性心臟病、嚴(yán)重肝腎功能不全、急慢性感染性疾病、心肌病、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)異常、全身免疫系統(tǒng)異常、內(nèi)分泌異常及應(yīng)用過(guò)免疫抑制劑等患者，對(duì)于合并高血壓、糖尿病、高血脂患者需用藥控制在正常水平。根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果分為正常組(n=60)、單支病變組(n=75)、雙支病變組(n=65)、三支病變組(n=60)?；颊呔炇鹬橥鈺?shū)，并通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)的審核。

1.2 方法

1.2.1 收集臨床資料 記錄各組患者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、吸煙、家族史、合并癥情況。

1.2.2 超聲心功能測(cè)定 兩組受試者于入院當(dāng)天應(yīng)用飛利浦IE33彩色多普勒超聲心動(dòng)圖測(cè)定左心射血分?jǐn)?shù)(LVEF)水平。

1.2.3 血液標(biāo)本制備 冠心病患者于入院次日清晨空腹抽取靜脈血5 mL，經(jīng)離心處理后留取上清液2 mL用于測(cè)定血脂及C反應(yīng)蛋白(CRP)，留取血漿3 mL用于測(cè)定Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb，并置于-20 ℃中儲(chǔ)備待測(cè)。

1.2.4 血脂及CRP水平 應(yīng)用貝克曼庫(kù)爾特UniCel DxI800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定各組血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)。CRP應(yīng)用免疫散射比濁法測(cè)定，試劑盒購(gòu)于上海博研生物科技有限公司，操作過(guò)程嚴(yán)格按時(shí)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.5 血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb水平測(cè)定 應(yīng)用ELISA法測(cè)定兩組血清Lp-PLA2、MIP-1α水平，Lp-PLA2試劑盒購(gòu)于上海川翔生物科技有限公司；MIP-1α試劑盒購(gòu)于上海富眾生物科技發(fā)展有限公司；GPⅠb應(yīng)用流式細(xì)胞儀測(cè)定：取血漿2 mL，應(yīng)用密度梯度離心法將單核細(xì)胞分離，加入RPMI 1640將細(xì)胞調(diào)整為2×106/mL，分別加入鼠抗人單抗，于4 ℃下避光反應(yīng)20 min，離心留取沉淀物，PBS洗滌后行胞漿染色，應(yīng)用美國(guó)貝克曼公司提供的Beckman Epics流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.2.6 冠狀動(dòng)脈病變積分評(píng)價(jià) 以Gensini評(píng)分表示，每處病變積分狹窄程度×病變部位則為Gensini積分總和，見(jiàn)表1。

表1 冠狀動(dòng)脈Gensini評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

表2 正常組與冠心病組相關(guān)資料比較

續(xù)表2 正常組與冠心病組相關(guān)資料比較

a：P<0.05，與正常組相比；b：P<0.05，與單支病變組相比；c：P<0.05，與雙支病變組相比；-表示無(wú)數(shù)據(jù)

表3 Gensini評(píng)分與冠心病動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系

2 結(jié) 果

2.1 正常組與冠心病組相關(guān)資料比較 與正常組比較，單支病變組、雙支病變組、三支病變組TC、TG、LDL-C、CRP、血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb水平顯著升高(P<0.05)，而HDL-C、LVEF水平下降(P<0.05)，隨著冠狀病變支數(shù)增多，TC、TG、LDL-C、CRP、血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb水平顯著升高(P<0.05)，而HDL-C、LVEF水平顯著下降(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表4 影響冠心病多因素Logistic回歸分析

2.2 Gensini評(píng)分與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系 經(jīng)Pearson單因素分析，Gensini積分與LDL-C、CRP、Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb呈正相關(guān)(P<0.05)，而與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，見(jiàn)表3。

2.3 影響冠心病的多因素Logistic回歸分析 經(jīng)多因素Logistic分析，LDL-C、Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb是冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素，而HDL-C是冠心病動(dòng)脈粥樣硬化的保護(hù)因素，見(jiàn)表4。

3 討 論

動(dòng)脈粥樣硬化是冠心病患者病理基礎(chǔ)，其發(fā)生機(jī)制與脂質(zhì)沉積及炎性反應(yīng)相互作用有關(guān)。被氧化是引起動(dòng)脈粥樣硬化的重要因素，LDL-C被氧化后會(huì)損傷血管內(nèi)皮，破壞血管屏障功能，使得單核細(xì)胞機(jī)脂質(zhì)沉積在皮下間隙，進(jìn)而誘導(dǎo)血管收縮功能，導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷，并引起動(dòng)脈粥樣硬化[7]。本研究中冠心病組患者TC、TG、LDL-C水平高于正常組，而HDL-C水平顯著低于正常組，且隨著冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)增加，患者TC、TG、LDL-C水平顯著升高，而HDL-C水平顯著下降，表明血脂水平紊亂與冠心病發(fā)生及病情進(jìn)行有密切的關(guān)系。經(jīng)多因素Logistic分析顯示，LDL-C是冠狀動(dòng)脈病變發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，而HDL-C是冠狀動(dòng)脈病變發(fā)生的保護(hù)因素，通過(guò)調(diào)整血脂水平將有助于減輕或預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化病變。

持續(xù)慢性炎癥浸潤(rùn)在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、進(jìn)展及心血管疾病事件過(guò)程中起到重要的作用[8]。研究指出，冠心病發(fā)病機(jī)制主要與冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞炎性反應(yīng)有密切的關(guān)系[9]。Lp-PLA2作為炎癥細(xì)胞因子可介導(dǎo)機(jī)體炎性反應(yīng)，對(duì)促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊形成及擴(kuò)大具有明顯的作用[10]。本研究結(jié)果顯示冠心病患者血漿Lp-PLA2水平顯著高于對(duì)照，且隨著冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)增加而顯著升高，提示血漿Lp-PLA2水平升高可促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生及進(jìn)展，通過(guò)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)Lp-PLA2水平能有效監(jiān)測(cè)冠狀動(dòng)脈病變。經(jīng)多因素Logisitc回歸校正傳統(tǒng)危險(xiǎn)如年齡、性別、吸煙、血脂后，血漿Lp-PLA2仍是冠狀動(dòng)脈病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，考慮可能機(jī)制為L(zhǎng)p-PLA2能激活脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)并介導(dǎo)炎癥因子生成，兩者可加重血管內(nèi)皮細(xì)胞功能及結(jié)構(gòu)紊亂，從而促進(jìn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，導(dǎo)致動(dòng)脈斑塊形成[11]。

近年研究指出，趨化因子在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中起到重要的作用，在動(dòng)脈粥樣硬化階段，炎癥細(xì)胞因子可通過(guò)受損的血管內(nèi)皮不斷進(jìn)入血管皮下，在這過(guò)程中需要黏附因子參與[12]。MIP-1屬于趨化因子家族中一員，其可激活相關(guān)炎癥細(xì)胞，并加強(qiáng)局部炎性反應(yīng)[13]。Guo等[14]研究指出，MIP-1與受體結(jié)合后可激活淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞，從而介導(dǎo)慢性炎癥，破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞，介導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化。本研究中冠心病患者血漿MIP-1水平顯著高于正常組，且隨著冠心病冠狀動(dòng)脈病變分支增加，血漿MIP-1水平顯著升高，提示血漿MIP-1水平升高在冠心病動(dòng)脈粥樣硬化病變中起到重要的作用。經(jīng)Logisitc多因素分析可知，血漿MIP-1是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，考慮可能機(jī)制為MIP-1可通過(guò)誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞活化參與血管內(nèi)皮損傷，從而參與冠心病動(dòng)脈硬化病理過(guò)程。

血小板聚集在冠心病動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中起到重要的作用。近年研究證實(shí)，GPⅠb活化是血小板聚集的中心環(huán)節(jié)。GPⅠb可與纖維蛋白原、血友病因子結(jié)合，從而形成黏附聚集過(guò)程[15]。本研究中冠心病患者GPⅠb水平顯著高于正常組，且隨著冠狀動(dòng)脈病變分支增加，患者血漿GPⅠb水平顯著升高，且是冠心病冠狀動(dòng)脈病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素?？紤]可能原因?yàn)镚PⅠb可活化白細(xì)胞并介導(dǎo)白細(xì)胞聚集、黏附，并促進(jìn)相關(guān)炎癥因子釋放，并介導(dǎo)炎性反應(yīng)，引起血管內(nèi)皮損傷。

綜上所述，血漿Lp-PLA2、MIP-1α、GPⅠb與冠心病冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病發(fā)生有密切的關(guān)系，可作為臨床無(wú)創(chuàng)評(píng)價(jià)冠心病動(dòng)脈病變提供指導(dǎo)。

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秦召敏(1969-)，副主任醫(yī)師，本科，主要從事急危重癥及心血管疾病研究。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.24.031

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1671-8348(2017)24-3411-03

2017-02-13

2017-04-04)