田 海，馮玉潔，張艷玲，王明月，李 瓊，羅金輝

（1.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院 分析測(cè)試中心/海南省熱帶果蔬產(chǎn)品質(zhì)量安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?571101；2.海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)研究所，?？?571101）

◆環(huán)境與殘留◆

超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定雞肉中噻節(jié)因殘留

田 海1，馮玉潔2，張艷玲1，王明月1，李 瓊1，羅金輝1

（1.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院 分析測(cè)試中心/海南省熱帶果蔬產(chǎn)品質(zhì)量安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?571101；2.海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)研究所，?？?571101）

建立雞肉中噻節(jié)因的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）殘留測(cè)定方法。雞肉樣品選用乙腈提取，采用UPLC-MS/MS多反應(yīng)模式（MRM）進(jìn)行分析測(cè)定。噻節(jié)因添加質(zhì)量在0.2～10 μg范圍內(nèi)，方法平均回收率為87.6%～101.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.44%～5.90%。方法的最小檢出量為0.005 mg/L，最低檢測(cè)濃度為0.01 mg/kg。該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確，重復(fù)性較好，適用于禽蛋中噻節(jié)因的殘留檢測(cè)。

噻節(jié)因；雞肉；超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜；殘留；檢測(cè)

噻節(jié)因（dimethipin），化學(xué)名稱2,3-二氫-5,6-二甲基-1,4-二噻因-1,1,4,4-四氧化物，分子式C6H10O4S2，相對(duì)分子質(zhì)量210.3，ADI值為0.02 mg/kg（JMPR，2014）。噻節(jié)因?qū)儆谥参锷L(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，可使玉米、苗木、橡膠樹和葡萄落葉，促進(jìn)植物成熟并能降低收獲后水稻和向日葵種子的含水量。施用后，其能夠抑制植物蛋白質(zhì)合成，對(duì)蛋白質(zhì)合成的抑制作用比放線菌酮的活性高10倍。噻節(jié)因加速植株自然衰老過程，而不是誘導(dǎo)衰老[1]。

噻節(jié)因具有中等毒性，長(zhǎng)期使用可能會(huì)對(duì)生態(tài)和食品安全產(chǎn)生較大風(fēng)險(xiǎn)[2]。美國(guó)環(huán)保署（EPA）將噻節(jié)因歸為可能的人類致癌物[3]；目前歐盟禁止噻節(jié)因在農(nóng)作物上使用。國(guó)際食品法典委員會(huì)（CAC）、美國(guó)、日本等國(guó)家或組織制定了食品中噻節(jié)因的最大殘留限量（MRLs）[4]。其中，CAC規(guī)定雞肉中噻節(jié)因的最大殘留限量為0.01 mg/kg。我國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB 2763—2014）也制定了噻節(jié)因在馬鈴薯、葵花籽、棉籽油等農(nóng)產(chǎn)品中的最大殘留限量，雞肉中噻節(jié)因最大殘留限量值正在制定中。

關(guān)于噻節(jié)因的檢測(cè)方法，目前主要有氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法、液質(zhì)聯(lián)用法等[2,5-9]。本研究采用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)雞肉中噻節(jié)因殘留，方法具有操作簡(jiǎn)便、快捷，靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度高的特點(diǎn)，可用于食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。本研究可為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)及評(píng)價(jià)提供支持。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

超高效液相色譜儀（Acquity H-CLASS），美國(guó)Waters公司；質(zhì)譜系統(tǒng)（API 4000），美國(guó)AB SCIEX公司；Acquity UPLC BEH C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm），美國(guó)Waters公司；高速離心機(jī)（Anke GL-10C），上海安亭科學(xué)儀器廠；XW-80旋渦混合器，美國(guó)Scientific Industries公司；Milli-Q超純水機(jī)，德國(guó)Millipore公司。

噻節(jié)因標(biāo)準(zhǔn)品（99.0%），德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司；甲醇、乙腈（色譜純），美國(guó)Fisher公司；水為超純水。

1.3 前處理方法

稱取雞肉樣品20 g于100 mL離心管中，加入乙腈40 mL，搖勻后振蕩提取30 min，5 000 r/min離心5 min，轉(zhuǎn)移上清液至裝有5 g氯化鈉的離心管中，劇烈振蕩2 min后靜置30 min，取有機(jī)相20 mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，用甲醇＋水（體積比3∶2）定容至2 mL，過0.22 μm濾膜，進(jìn)行UPLC-MS/MS分析。

1.4 色譜條件

色譜柱：Acquity UPLC BEH C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；柱溫：35℃；流動(dòng)相：乙腈＋5 mmol乙酸銨水溶液，梯度洗脫（見表1）；流速：0.15 mL/min；進(jìn)樣量：10.0 μL。

表1 梯度洗脫表

1.2 基質(zhì)標(biāo)樣溶液的配制

稱取適量噻節(jié)因標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇溶解配制成母液，移取適量母液至容量瓶，氮?dú)獯蹈?，用空白樣品提取液定容成質(zhì)量濃度分別為0.005,0.01,0.05, 0.1,0.5 mg/L系列標(biāo)樣溶液，混勻后放入4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源ESI；掃描方式：負(fù)離子源；檢測(cè)方式：多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；碰撞氣：0.04 MPa；氣簾氣：0.137 MPa；霧化器Gas 1：0.345 MPa；霧化器Gas 2：0.345 MPa；離子噴霧電壓：-4 500 V；離子源溫度：600℃。噻節(jié)因母離子（m/z）209、子離子（m/z）91（定量離子）、子離子（m/z）161（定性離子），碰撞能量分別為14.34 V、28.91 V、22.83 V，錐孔電壓為66.80V。噻節(jié)因保留時(shí)間為1.74min，色譜圖見圖1。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品、CK樣品、樣品添加色譜圖

2 結(jié)果與分析

2.1 噻節(jié)因標(biāo)準(zhǔn)曲線

在質(zhì)量濃度為0.005～0.5 mg/L范圍內(nèi)，采用上述色譜操作條件，對(duì)1.2中配制的系列標(biāo)樣溶液進(jìn)行測(cè)定，并以噻節(jié)因標(biāo)樣溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。噻節(jié)因線性方程為y=4.77×105x-2.66×103，相關(guān)系數(shù)（R2）為0.999 9。

2.2 回收率、精密度與檢出限

在空白樣品中分別加入0.2 μg、1.0 μg、10.0 μg噻節(jié)因標(biāo)準(zhǔn)品，每個(gè)添加濃度重復(fù)測(cè)定5次取平均值，得到噻節(jié)因的添加回收率、最小檢出量（LOD）、最低檢測(cè)濃度（LOQ）、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值，見表2。

表2 噻節(jié)因在雞肉中的添加回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

3 結(jié)論

本文研究建立了雞肉中噻節(jié)因殘留的UPLCMS/MS方法。噻節(jié)因在雞肉中的平均回收率為87.6%～101.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.44%～5.90%，LOD值為0.005 mg/L，LOQ值為0.01 mg/kg。研究結(jié)果表明，方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均能滿足農(nóng)藥殘留分析要求，該方法雜質(zhì)干擾小，有良好的線性，可廣泛用于禽蛋中噻節(jié)因的殘留檢測(cè)。

[1]馬國(guó)瑞,侯勇.常用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑安全施用指南 [M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2008:45-73.

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（責(zé)任編輯：顧林玲）

Determination of Dimethipin Residues in Chicken by Ultra-High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

TIAN Hai1,FENG Yu-jie2,ZHANG Yan-ling1,WANG Ming-yue1,LI Qiong1,LUO Jin-hui1
(1.Analysis and Test Center,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Hainan Provincial Key Laboratory of Quality and Safety for Tropical Fruits and Vegetables,Haikou 571101,China;2.Institute of Plant Protection,Hainan Academy of Agricultural Science,Haikou 571101,China）

A method for determination of dimethipin residues in chicken by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS)was established.The chicken samples were extracted by acetonitrile,then analyzed by UPLC-MS/MS under the multiple reaction monitoring(MRM)mode.The average recoveries ranged from 87.6%to 101.6%with the relative standard deviations(RSD)of 2.44%-5.90%when the fortified concentrations were 0.2-10 μg.The limit of detection was 0.005 mg/L,and the limit of quantification was 0.01 mg/kg.This method was simple,accurate,and was suitable for determination of dimethipin residues in chicken samples．

dimethipin;chicken;UPLC-MS/MS;residue;determination

TQ 450.2＋63

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.04.012

2017-04-18

田海（1986—），男，助理研究員。研究方向：農(nóng)藥殘留與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。E-mail：tianhai666@163.com