□ 付麗莎 胡 俠 大連市食品檢驗(yàn)所

糕點(diǎn)中納他霉素和脫氫乙酸實(shí)驗(yàn)方法的改進(jìn)

□ 付麗莎 胡 俠 大連市食品檢驗(yàn)所

優(yōu)化高效液相色譜法對納他霉素、脫氫乙酸的前處理方法。從而提高檢測工作效率、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)，方法重現(xiàn)性、穩(wěn)定性好回收率高，與標(biāo)準(zhǔn)方法相比，測定結(jié)果無明顯差異，適合檢測糕點(diǎn)中的納他霉素、脫氫乙酸含量

納他霉素；脫氫乙酸；糕點(diǎn)

納他霉素[1-2]。廣泛用于乳酪、肉制品、糕點(diǎn)、果汁、果醬、果凍和腌泡制品等。被批準(zhǔn)用于干酪、肉制品、糕點(diǎn)表面、果蔬汁、蛋黃醬、沙拉醬和發(fā)酵酒等領(lǐng)域。將100～500 mg/kg納他霉素溶液噴在烘焙食品如蛋糕、白面包、酥餅的表面，或?qū)⒓{他霉素噴灑在未烘烤的生面團(tuán)的表面，防霉保鮮效果非常理想，對產(chǎn)品口感不產(chǎn)生任何影響。

脫氫乙酸[3-6]。用于抑菌力極強(qiáng)的食品防霉防腐劑，對霉菌、酵母菌和細(xì)菌的抑制能力極強(qiáng)，是繼苯甲酸鈉、尼泊金和山梨酸鉀后的新一代食品防霉防腐劑。脫氫乙酸鈉屬于廣譜類防腐劑，廣泛用于奶油、湯料（調(diào)味料、速食湯料）、糕點(diǎn)（包括蛋糕、月餅、餡料等）、面包、醬油、醬菜、果汁、腐乳、米面制品、魚肉制品、糧食、藥品、化妝品、煙草、飼料、紙張和農(nóng)藥等產(chǎn)品的防霉防腐。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器與試劑

納他霉素（Pimaricin，89.9%）購自Dr.E；脫氫乙酸（Dehydroacetic acid，99.5%，購自CHEM SERVICE）。

高速冷凍離心機(jī)（HITACHI）；超聲清洗機(jī)（大連雙泰科技有限公司）；高效液相色譜儀（1200，美國Agilent公司）。

1.2 儀器分析

色譜柱（Agilent ZORBAX SB-C18，4.6mm×150 mm 5μm）；流動相：A相為甲醇-（0.1%甲酸）：B相為水-（0.1%甲酸）=52∶48；流速：1.0 mL/min；檢測器：DAD；檢測波長：302 nm。

2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟

2.1 標(biāo)準(zhǔn)方法

納他霉素，稱取5 g樣品，置于離心管中加入30 mL甲醇超聲提取30 min，加水10 mL搖勻后置于離心機(jī)中以2 500 r/min離心5 min，上清液過膜。

脫氫乙酸，稱取5 g樣品，置于25 mL容量瓶中，加入約10 mL水、5 mL硫酸鋅溶液，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH為7～8，加水定容到刻度線，超聲提取10 min，轉(zhuǎn)移到分液漏斗加入10 mL正己烷連續(xù)萃取兩次，靜置棄去正己烷層，取下層水相與離心管中離心，過膜。

2.2 改進(jìn)方法

稱取2.5 g樣品于離心管中加入10 mL甲醇，超聲提取20 min，取出加入10 mL水混勻后超聲20 min，取出后離心過0.22 μm膜。

3 方法優(yōu)化前后比較

3.1 提高工作效率

改進(jìn)方法同時(shí)檢測糕點(diǎn)中的納他霉素和脫氫乙酸的含量，標(biāo)準(zhǔn)方法耗時(shí)2.5 h，改進(jìn)后耗時(shí)50 min，總節(jié)約100 min。

3.2 節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)

改進(jìn)方法同時(shí)檢測糕點(diǎn)中納他霉素和脫氫乙酸在實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)等方面有所改進(jìn)。優(yōu)化方法降低實(shí)驗(yàn)成本，節(jié)約實(shí)驗(yàn)資源。

3.3 加標(biāo)樣品的比對實(shí)驗(yàn)結(jié)果

分別采用標(biāo)準(zhǔn)方法和改進(jìn)后方法，對樣品前處理，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示

3 結(jié)論

本方法同時(shí)測定糕點(diǎn)中納他霉素、脫氫乙酸的含量，降低檢測成本，節(jié)約資源，提高工作效率。方法重現(xiàn)性、穩(wěn)定性好、回收率高，與標(biāo)準(zhǔn)方法相比，測定結(jié)果無明顯差異，適合糕點(diǎn)中的納他霉素、脫氫乙酸含量的檢測，具有一定的應(yīng)用和推廣價(jià)值。利用改進(jìn)后的方法對樣品進(jìn)行快速前處理，降低檢測成本，節(jié)約檢測經(jīng)費(fèi)，提高樣品檢測速度，提高檢測工作效率。

表1 納他霉素和脫氫乙酸的加標(biāo)回收率表

[1]陳永艷,李彩瑞,楊秀敏,等.高效液相色譜法測定果醬中的納他霉素[J].中國食品學(xué)報(bào),2008,8(1):115-118.

[2]黃孟基,郭新東,王永華,等.高效液相色譜法測定月餅中納他霉素殘留[J].肉品衛(wèi)生,2004,(6):12-13.

[3]劉謙,白文靜,白帆,等.高效液相色譜法測定醬菜中的脫氫乙酸[J].中國食品添加劑,2014,5(14):199-201.

[4]王峰.超高相液相色譜法測定食品中的脫氫乙酸[J].食品研究與開發(fā),2013,4(16):88-90.

[5]Strohl W R. Biotechnology of antibiotics[M]. Marcel Dekker,1997.

[6]明立艷,張忠義.高效液相色譜法測定食品中的脫氫乙酸含量[J].食品研究與開發(fā),2009,30(3):106-108.