王海龍，陳立軍，劉名龍，胡香萍，梁 晶，于津生， 竇新立

（天津市濱海新區(qū)大港醫(yī)院腫瘤科，天津 300270）

洋蟲改善肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)炎性微環(huán)境的研究

王海龍，陳立軍，劉名龍，胡香萍，梁 晶，于津生， 竇新立

（天津市濱海新區(qū)大港醫(yī)院腫瘤科，天津 300270）

目的 探討洋蟲對肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)炎性微環(huán)境中IL-6、IL-8和TNF-α的調(diào)控情況。方法 選用LLC小黑鼠60只，隨機分成5組：正常組、腫瘤組、治療1組、治療2組、預防組，每組12只。正常組不做處理，正常喂養(yǎng)，共14 d；腫瘤組：單純接種Lewis肺癌，正常喂養(yǎng)，共14 d；治療1組：接種Lewis肺癌細胞后，待腫瘤大小長到0.5～1.0 cm后給予常規(guī)處理的洋蟲（45 mg/kg），共14 d；治療2組：接種Lewis肺癌細胞后，待腫瘤大小長到0.5～1.0 cm后給予真空冷凍干燥法處理的洋蟲（45 mg/kg），共14 d；預防組：接種Lewis肺癌細胞當天給予常規(guī)處理的洋蟲（45 mg/kg），接種腫瘤后繼續(xù)洋蟲喂養(yǎng)至處死，共14 d。接種腫瘤后第7、14天各組各處死6只C57小鼠，取其血清，ELISA法檢測IL-6、IL-8和TNF-α。結(jié)果 腫瘤組的腫瘤相關(guān)炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α明顯高于正常組，治療后的腫瘤相關(guān)炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α明顯低于治療前（P＜0.05），治療1組和治療2組的腫瘤相關(guān)炎性因子表達差異無統(tǒng)計學意義。結(jié)論 肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)促進腫瘤生長的炎性因子明顯升高，中藥洋蟲可以降低肺癌荷瘤小鼠體內(nèi)炎性因子的表達。

洋蟲；肺癌；微環(huán)境；炎性因子

洋蟲（martianus dermestoides chevrolat）為擬步蟲科昆蟲。近年的研究[1-2]發(fā)現(xiàn)洋蟲具有抗炎、提高機體免疫功能和抗癌的作用。肺癌是一種與炎癥密切相關(guān)的惡性腫瘤。炎癥與癌癥的關(guān)系已經(jīng)明確，且被稱為“癌癥的第七大特征”，炎癥微環(huán)境與腫瘤進展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本文通過動物模型來研究中藥洋蟲對肺癌荷瘤小鼠機體微環(huán)境中炎性因子的調(diào)節(jié)作用。報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 雄性C57小黑鼠60只，體質(zhì)量（16±2）g，4～6周齡，購自中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心，許可證號SCXK-（軍）2007-004。LLC小鼠肺癌細胞系（Lewis細胞系）購自中國科學院上海生命科學研究院細胞資源中心。

1.2 方法 將LLC小鼠肺癌細胞系接種于C57小鼠，建立皮下移植瘤模型。待腫瘤直徑達到0.5～1 cm后，隨機分成5組：正常組、腫瘤組、治療1組、治療2組、預防組，每組12只。正常組不做處理，正常喂養(yǎng)，共14 d；腫瘤組：單純接種Lewis肺癌，正常喂養(yǎng)，共14 d；治療1組：接種Lewis肺癌細胞后，待腫瘤大小長到0.5～1.0 cm后給予常規(guī)處理的洋蟲（45 mg/kg），共14 d；治療2組：接種Lewis肺癌細胞后，待腫瘤大小長到0.5～1.0 cm后給予真空冷凍干燥法處理的洋蟲（45 mg/kg），共14 d；預防組：接種Lewis肺癌細胞當天給予常規(guī)處理的洋蟲（45 mg/kg），接種后繼續(xù)洋蟲喂養(yǎng)至處死，共14 d。

1.3 評價指標 接種腫瘤后第7、14天各組各處死6只C57小鼠，取其血清，ELISA法檢測IL-6、IL-8 、TNF-a。

2 結(jié)果

治療前后各組炎性因子變化比較 ,見表1。

3 討論

洋蟲又名九龍蟲，辛、甘，溫，歸肺、胃、大腸經(jīng)，具有溫中理氣、活血止痛、祛風除濕等功效，有文獻將其歸類于活血祛瘀藥?！侗静菥V目拾遺》卷十蟲部記載洋蟲功效為：“行血分，暖胃脾，和五臟，健筋骨，去濕搜風，壯陽道，治怯弱。” 《藥性考》上記載洋蟲：“活吞數(shù)枚，止血，(治)勞怯” 。

隨著基礎(chǔ)研究的深入，洋蟲的藥用價值主要有：1）增強機體免疫功能和抗炎作用。洋蟲醚提取物可以顯著恢復環(huán)磷酰胺對小鼠血清溶血素生成的抑制作用；洋蟲醚提取物可提高正常小鼠的遲發(fā)性超敏反應；洋蟲的醚提液腹腔注射能明顯抑制巴豆油引起的小白鼠耳廓炎癥（P＜0.01），而且劑量越高效果越好[3-5]。2）抗癌作用。洋蟲可拮抗環(huán)磷酰胺對小鼠造血器官和免疫器官的損傷作用，并對環(huán)磷酰胺的治療效果有一定的減毒增效作用[6]；洋蟲提取液能清除致癌物質(zhì)亞硝酸鈉、阻斷體外二甲基亞硝胺合成和明顯降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量[7]。3）抗衰老作用。洋蟲能明顯防止肝細胞中丙二醛含量的升高和超氧化物歧化酶活性的降低[8]。同時也有動物實驗研究[9]表明洋蟲可以延緩雌性大鼠生殖系統(tǒng)等衰老，提高卵巢指數(shù)和子宮指數(shù)，增加卵巢中初級卵泡、次級卵泡、成熟卵泡數(shù)量。4）改善血液循環(huán)，洋蟲水提液能顯著降低大鼠全血粘度，揭示了洋蟲自身活血化瘀的作用機理[10]。

表1 5組治療前后炎性因子變化比較(x±s，n = 12) %

炎癥與肺癌的發(fā)生、發(fā)展及預后密切相關(guān)[11-13]。腫瘤微環(huán)境是腫瘤賴以發(fā)生發(fā)展的土壤和基礎(chǔ)，腫瘤微環(huán)境中有對腫瘤具有促進作用的炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α。中藥具有扶正祛邪，通過多種作用機制抑制肺癌細胞生長的作用[14-16]。已有研究[17-18]發(fā)現(xiàn)洋蟲可以降低炎性因子IL-6和TNF-α，與筆者研究結(jié)果相符。本研究發(fā)現(xiàn)肺癌組的小鼠體內(nèi)炎性因子IL-6、IL-8和TNF-α的表達要明顯高于正常小鼠組；洋蟲治療組的炎性因子表達水平明顯低于腫瘤組，說明洋蟲可以降低腫瘤微環(huán)境中炎性因子的表達，其具體機制有待于大樣本的深入研究。

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Study on Martianus dermestoides Chevrolat improving the infammatory microenvironment of mice bearing lung cancer

WANG Hailong, CHEN Lijun, LIU Minglong, HU Xiangping, LIANG Jing, YU Jinsheng, DOU Xinli
( Department of Oncology, Dagang Hospital of Binhai New Area, Tianjin 300270, China)

Objective To investigate the changes of inflammatory microenvironment in which IL-6, IL-8 and TNF-α for mice fed with Martianus dermestoides Chevrolat. Methods 60 male LLC mice were randomly divided into fve groups: normal group, tumor group, treatment 1 group, treatment 2 group and prevention group. Each group were 12 rats. The mice was treated with Lewis lung cancer except normal group being not treated. When tumor diameter reach 0.5-1.0cm, treatment 1 group and treatment 2 group were fed with Martianus dermestoides Chevrolat. The pretreatment group was fed with Martianus dermestoides Chevrolat when treated with Lewis lung cancer. we detected the serum IL-6, IL-8 and TNF-α using ELISA method. Results Tumor associated infammatory factors IL-6, IL-8, and TNF-α in the tumor group was signifcantly higher than the normal group, and signifcantly lower after treatment, the difference was statistically significant (P＜0.05). Conclusion Inflammatory factors promote lung cancer growth signifcantly. Martianus dermestoides Chevrolat can regulate infammatory microenvironment.

Martianus dermestoides Chevrolat; lung cancer; microenvironment; infammatory factor

R282.74

A

2095-6258(2017)04-0533-03

2019-11-04）

10.13463/j.cnki.cczyy.2017.04.006

天津市衛(wèi)生計生委中醫(yī)中西醫(yī)結(jié)合課題“中藥洋蟲調(diào)控肺癌小鼠腫瘤微環(huán)境的研究”（13176）。

王海龍（1976-），男，博士，副主任醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合腫瘤綜合治療研究。