林吉霞，葉扶桑，羅 晶

(1.寧波市第六醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科，浙江 寧波 315040；2.寧波市臨床病理診斷中心 組織病理科，浙江 寧波 315021)

健康科學(xué)臨床研究

髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體1在痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者中的表達(dá)及意義

林吉霞1，葉扶桑1，羅 晶2

(1.寧波市第六醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科，浙江 寧波 315040；2.寧波市臨床病理診斷中心 組織病理科，浙江 寧波 315021)

目的 分析髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM-1)在痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)滑膜及外周血中的表達(dá)改變及意義。方法 分析痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者(觀察組)的臨床資料，采用免疫組化及酶聯(lián)免疫吸附法檢測滑膜及外周血中TREM-1的表達(dá)，并與健康體檢者(對照組)外周血相關(guān)指標(biāo)作對照。結(jié)果 觀察組外周血TREM-1、TNF-α、IL-6及血尿酸水平均顯著高于對照者(P<0.01)；觀察組患者病變關(guān)節(jié)滑膜中TREM-1表達(dá)顯著高于骨關(guān)節(jié)炎滑膜(t=69.570；P<0.01)，TREM-1水平與TNF-α(r=0.878)、IL-6(r=0.903)及血尿酸(r=0.894)水平均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)(P<0.01)。結(jié)論 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者病變滑膜及外周血TREM-1表達(dá)均升高，且與血尿酸及系統(tǒng)性炎癥水平正相關(guān)。

痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎；髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體1；血尿酸；炎癥

痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎(Gouty arthritis)是由尿酸鹽沉積在骨關(guān)節(jié)內(nèi)所引發(fā)的關(guān)節(jié)內(nèi)結(jié)構(gòu)破壞或急慢性炎癥等改變的一種疾病，發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，目前認(rèn)為與遺傳易感及不良飲食習(xí)慣密切相關(guān)[1]。尿酸鹽的沉積所繼發(fā)的炎癥改變是破壞骨關(guān)節(jié)的主要因素，貫穿疾病的整個病理生理過程并影響疾病的預(yù)后[2]。髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體1(Triggering receptor expressed on myeloid cells-1，TREM-1)是新近研究較多的炎癥激發(fā)受體，主要表達(dá)在單核巨噬細(xì)胞系及粒細(xì)胞系中，激活后可引發(fā)炎癥反應(yīng)[3-4]。本文嘗試分析痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織及關(guān)節(jié)液內(nèi)TREM-1水平的改變及其臨床意義，以指導(dǎo)臨床診療。

1 資料與方法

1.1 研究對象 回顧分析2014年1月—2016年1月在我院接受診療的痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者(觀察組)的臨床資料，患者均經(jīng)臨床及影像學(xué)檢查明確診斷為痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，并排除合并活動性感染、嚴(yán)重肝腎功能障礙、惡性腫瘤等終末期疾病及臨床資料缺失者。另納入同期健康體檢者作為對照組；本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)，患者知情同意。共納入觀察組39例，對照組42例；兩組患者性別、年齡、空腹血糖及吸煙史差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 檢測及標(biāo)準(zhǔn) 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考美國風(fēng)濕病學(xué)會所制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5-6]。分別于清晨空腹?fàn)顟B(tài)抽取兩組受試者外周血5mL行如下指標(biāo)的檢測，包括：白介素-6(Interleukin-6，IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、可溶性TREM-1及尿酸。IL-6、TNF-α及TREM-1的檢查采用酶聯(lián)免疫吸附法；尿酸的檢測采用全自動生化分析儀。此外，選取5例觀察組患者的滑膜組織活檢標(biāo)本采用免疫組化標(biāo)記TREM-1，并與接受滑膜組織活檢的骨關(guān)節(jié)炎患者標(biāo)本進(jìn)行比較。

1.3 觀察指標(biāo) 對比兩組受試者血液學(xué)指標(biāo)；分析觀察組患者病變關(guān)節(jié)滑膜中TREM-1的表達(dá)改變；分析觀察組患者外周血TREM-1水平與其它指標(biāo)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)

據(jù)。計量資料比較采用t檢驗；構(gòu)成比的比較使用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 血液學(xué)指標(biāo)比較 觀察組患者外周血TREM-1、TNF-α、IL-6及血尿酸水平均顯著高于對照組(P<0.01)，詳見表1。

表1 兩組血液學(xué)指標(biāo)比較

2.2 患者病變關(guān)節(jié)滑膜中TREM-1的表達(dá)及與其它指標(biāo)的相關(guān)性改變 如圖1，免疫組化標(biāo)記滑膜中TREM-1表達(dá)：觀察組患者關(guān)節(jié)滑膜中TREM-1表達(dá)顯著高于骨關(guān)節(jié)炎滑膜(t=69.570；P<0.01)；Pearson相關(guān)性分析顯示，觀察組患者TREM-1水平與TNF-α(r=0.878)、IL-6(r=0.903)及血尿酸(r=0.894)水平均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系(均P<0.01，圖2)。

圖1 免疫組化標(biāo)記滑膜中TREM-1表達(dá)；▼P<0.01。

圖2 觀察組患者外周血TREM-1水平與其它指標(biāo)的相關(guān)性

3 討 論

痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的主要臨床表現(xiàn)為關(guān)節(jié)劇烈疼痛，其病程特點表現(xiàn)為復(fù)發(fā)與緩解相交替，具有一定自限性。我國痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢，該病所致的反復(fù)疼痛及關(guān)節(jié)畸形嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。雖然痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的具體發(fā)病機(jī)制并不清楚，但其基本病理改變?yōu)橐环N關(guān)節(jié)內(nèi)無菌性炎癥[7]?；颊哧P(guān)節(jié)內(nèi)尿酸濃積并析出結(jié)晶，尿酸結(jié)晶作為一種異物而引發(fā)急慢性炎癥。TREM-1是新近研究較多的一種免疫球蛋白超家族的跨膜蛋白受體，主要表達(dá)在單核巨噬細(xì)胞系及中性粒細(xì)胞的表面[8]。該受體激活后可誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞釋放大量炎癥介質(zhì)，在急性炎癥的誘發(fā)及慢性炎癥的維持中發(fā)揮關(guān)鍵作用。在既往的研究中顯示，TREM-1在膿毒癥及腹腔感染等系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)中處于高表達(dá)狀態(tài)，可能參與了炎癥的級聯(lián)放大[9-10]。在當(dāng)前痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的炎癥啟動機(jī)子不明的情況下，我們嘗試分析TREM-1在痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者病變滑膜組織及外周血中的表達(dá)改變，以期為深入該病的認(rèn)識提供參考。

本研究顯示，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者病變滑膜組織中高表達(dá)TREM-1，顯著高于非病變關(guān)節(jié)滑膜。這提示TREM-1可能參與痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的病理損傷過程我們分析對比了痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者與對照組外周血指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)觀察組患者外周血可溶性TREM-1水平顯著高于對照組，這一結(jié)果與免疫組化標(biāo)記滑膜組織TREM-1所觀察到的結(jié)果相印證。此外，我們還發(fā)現(xiàn)觀察組外周血IL-6、TNF-α及尿酸水平均顯著高于對照組。血尿酸水平升高是痛風(fēng)的基本疾病表現(xiàn)。IL-6及TNF-α均為非特異性促炎介質(zhì)，既往研究顯示這些炎癥介質(zhì)參與痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的骨質(zhì)破壞并與疾病活動密切相關(guān)。有動物實驗發(fā)現(xiàn)，TREM-1抗體可以促進(jìn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠體內(nèi)大量分泌TNF-α，當(dāng)用TREM-1拮抗多肽或外結(jié)構(gòu)域，可導(dǎo)致小鼠體內(nèi)TNF-α與部分白細(xì)胞介素水平下降，小鼠關(guān)節(jié)炎癥狀有所好轉(zhuǎn)[11]。提示TREM-1在關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用。同時，我們采用相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者外周血可溶性TREM-1水平與血尿酸、IL-6及TNF-α均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系。這提示TREM-1可能與患者的尿酸代謝、系統(tǒng)性炎癥均有內(nèi)在聯(lián)系，但其具體機(jī)制尚需進(jìn)一步研究以明確。雖然本研究取得一些發(fā)現(xiàn)，但由于樣本量有限，且未對TREM-1如何激發(fā)滑膜炎癥的具體機(jī)制做深入研究，相關(guān)問題尚需進(jìn)一步細(xì)化探索。

綜上，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者病變滑膜及外周血TREM-1均呈現(xiàn)表達(dá)升高的狀態(tài)，且與血尿酸及系統(tǒng)性炎癥水平呈現(xiàn)正相關(guān)，其可能參與關(guān)節(jié)炎癥的發(fā)生與發(fā)展。這為深入理解痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的病理生理過程及發(fā)病機(jī)制提供了新的視角，同時為該病的治療提供了新的方向，下調(diào)TREM-1表達(dá)有望達(dá)到緩解炎癥的目的，但需進(jìn)一步探索。

[1]Wilson L, Saseen JJ. Gouty Arthritis: A Review of Acute Management and Prevention[J]. Pharmacotherapy,2016,36(8):906-922.

[2]Elsaman AM, Muhammad EM, Pessler F. Sonographic Findings in Gouty Arthritis: Diagnostic Value and? Association with Disease Duration[J]. Ultrasound Med Biol,2016,42(6):1330-1336.

[3]Brynjolfsson SF, Magnusson MK, Kong PL,etal. An Antibody Against Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells 1 (TREM-1) Dampens Proinflammatory Cytokine Secretion by Lamina Propria Cells from Patients with IBD[J]. Inflamm Bowel Dis,2016,22(8):1803-1811.

[4]Zhu J, Duan G, Wang H,etal. TREM-1 activation modulates dsRNA induced antiviral immunity with specific enhancement of MAPK signaling and the RLRs and TLRs on macrophages[J]. Exp Cell Res,2016,345(1):70-81.

[5]Rodriguez I. Singular expression of olfactory receptor genes[J]. Cell,2013,155(2):274-277.

[6]Ferreira GE, Robinson CC, Wiebusch M,etal. The effect of exercise therapy on knee adduction moment in individuals with knee osteoarthritis: A systematic review[J]. Clin Biomech (Bristol, Avon),2015,30(6):521-527.

[7]Son CN, Kim TE, Park K,etal. Simplified Radiographic Damage Index for Affected Joints in Chronic Gouty Arthritis[J]. J Korean Med Sci,2016,31(3):435-442.

[8]Dou ZF, Guo YR, Liu JC,etal. Ameliorative effects of glycine in an experimental nonalcoholic steatohepatitis and its correlation between TREM-1 and TREM-2[J]. Am J Transl Res,2016,8(2):284-297.

[9]Du Y, Wu T, Zhou XJ,etal. Blockade of CD354 (TREM-1) Ameliorates Anti-GBM-Induced Nephritis[J]. Inflammation,2016,39(3):1169-1176.

[10]Bucova M, Suchankova M, Tibenska E,etal. Diagnostic value of TREM-1 and TREM-2 expression in bronchoalveolar lavage fluid in sarcoidosis and other lung diseases[J]. Bratisl Lek Listy,2015,116(12):707-713.

[11]盧欣沂,彭桉平,陳曲波.TREM-1在自身免疫性疾病中的研究進(jìn)展[J].中國免疫學(xué)雜志,2015,31(10):1434-1437.

The expression of TREM-1 in patients with gouty arthritis and its clinical implication

LIN Ji-xia1， YE Fu-sang1， LUO Jing2

(1.DepartmentofRheumatismandImmunology，TheSixthHospitalofNingbo，Ningbo315040;2.DepartmentofHistologyandPathology，NingboClinicalandPathologicalDiagnosisCenter，Ningbo315021，China)

Objective To identify the patterns of expression of TREM-1 in patients with gouty arthritis. Method The clinical data of the patients with gouty arthritis (the experimental group) were firstly reviewed and then the expression of TREM-1 in the synovial tissues and peripheral blood of the patients were tested and compared with the haematological indexes of the control group. Findings The levels of TREM-1， TNF-α， IL-6 and blood uric acid of the experimental group were considerably higher than those of the control group. The difference was statistically significant (P<0.01). The level of TREM-1 expression in the synovial tissues of the experimental group was higher than that of the osteoarthritis patients (t=69.570；P<0.01). The levels of TREM-1 had significant positive correlation with TNF-α (r=0.878，P<0.01)， IL-6 (r=0.903，P<0.01) and blood uric acid (r=0.894，P<0.01). Conclusion The expression of TREM-1 was higher in patients with gouty arthritis and associated with infla mmatory reaction and blood uric acid. It is an indicator of the occurrence and development of the disease．

gouty arthritis； TREM-1； blood uric acid； infla mmation

2016-10-19

林吉霞(1982-)，女，浙江寧波人，本科，主治醫(yī)師。

羅 晶(1966-)，女，浙江寧波人，本科，主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1674-6449.2017.03.013

R684.3

A

1674-6449(2017)03-0280-03