馬利峰，胡春榮，李鳳君

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

ERK磷酸化在預測結直腸癌患者預后的價值①

馬利峰，胡春榮，李鳳君

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：通過探索研究ERK磷酸化在預測結直腸癌患者預后的分子標志物中的臨床價值。方法：選擇佳木斯大學附屬第一醫(yī)院2015-09～2017-01我院普外科收治的臨床診斷為結直腸癌的患者。分別采用免疫組化積分法判定癌組織和癌旁正常黏膜組織ERK蛋白磷酸化情況，術后間斷隨訪出院患者的生存質量狀態(tài)。以術后3個月、6個月、12個月為隨訪分界點。結果：①正常結直腸粘膜組織幾乎無ERK磷酸化；②高ERK磷酸化狀態(tài)的結直腸患者生存時間短于低ERK 磷酸化患者。 結論：P-ERK1/2在結直腸癌組織中表達明顯高于癌旁組，表明P-ERK1/2可能與結直腸癌發(fā)生、發(fā)展有一定相關性。

結直腸癌；ERK磷酸化；免疫組化積分法

結直腸癌是最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一。2005年，全國統(tǒng)計新發(fā)結直腸癌病例10萬余例，死亡的結直腸癌患者約有5萬余例。隨著廣大醫(yī)務工作者對結直腸癌不斷深入研究，發(fā)現(xiàn)：結直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程與一些控制細胞增值分化的信號傳導途徑的異常有較高的相關性。通過研究發(fā)現(xiàn)：絲裂原活化蛋白激酶( MAPKs)介導的的信號傳導通路在結直腸癌的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的角色，而細胞外信號調節(jié)激酶( ERK)是 MAPKs傳導通路的重要節(jié)點，結直腸癌患者中?？砂l(fā)現(xiàn) ERK表達額異常增高。本研究亦在通過對比患者自身的腫瘤組織與正常組織中 ERK磷酸化狀態(tài)，判斷正常的組織與腫瘤組織 ERK磷酸化水平，以及通過免疫組化積分法對患者進行不同積分分組并以3、6、9個月生存期為隨訪時間節(jié)點行間斷隨訪，比較不同積分分組患者的生存時間生存比例。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015-03～2017-01我院普外科收治的臨床診斷為結直腸癌的患者，臨床診斷為結直腸癌并符合進行手術治療的38例患者，由具有豐富經(jīng)驗的病理科醫(yī)師采用背靠背的方式方法，采用免疫組化積分法分別測定癌組織及癌旁正常黏膜組織 ERK蛋白磷酸化狀態(tài)，同時給出病理診斷并進行評分，根據(jù)評分結果將患者分成不同的組別，術后間斷以3個月、6個月、9個月為隨訪時間節(jié)點，隨訪患者的生存狀態(tài)。

1.2 入選標準

全部患者均簽定了自愿知情同意告知書；全部患者均符合中華人民共和國關于結直腸癌的診斷標準并有臨床手術指征；排除有重大精神疾患或不適宜手術治療的患者。

1.3 免疫組化積分法

判斷依據(jù)：細胞漿和/或細胞核中發(fā)現(xiàn)棕黃色染色顆粒物質。最終積分：由染色細胞的百分率分值和染色的深淺程度分值共同決定，其分值分別為0～4分。

染色細胞的百分率分值：≤10%為0分、11%～25%為1分、26%～50%為2分、51%～75%為3分、76%～100%為4分。細胞染色的深淺程度分值：無色為0分、淺黃色為1分、黃色為2分、棕色3分為、深棕色為4分。

1.4 實驗結果判定

積分7分及以上為ERK蛋白高磷酸化，1-6分為ERK蛋白低磷酸化，0分為ERK蛋白無磷酸化。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用 SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學數(shù)據(jù)處理，分析數(shù)據(jù)與患者臨床病理之間的相關性，結果采用χ2檢驗表示，以P<0.05差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 正常組織未發(fā)現(xiàn)有ERK蛋白磷酸化狀態(tài)

腫瘤組織存在ERK蛋白磷酸化狀態(tài)，不同的患者，其積分也不同。

2.2 不同積分組的平均生存時間比較

見表1。

表1 不同組病例數(shù)及平均生存時間

分別比較不同分組之間的平均生存時間，采用單因素分析，t檢驗，P<0.05，說明不同組別之間，其平均生存時間存在著顯著的差異。同時，由于分值越高意味著p-ERK水平越高，說明隨著p-ERK水平的增高，患者生存時間越短。 在結合不同的分組之間，患者平均生存時間的差別，說明p-ERK水平的增高，代表患者的預后越差。

2.3 不同時間節(jié)點時，不同積分組患者生存例數(shù)

見表2。

表2 不同時間節(jié)點，不同級別患者活例數(shù)(%)

采用χ2檢驗，結果顯示總體χ2值為9.754，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，說明不同分組患者的生存率有明顯的不同。即：低分組患者的生存率明顯優(yōu)于高分組患者。

3 討論

通過對腫瘤組織與正常組織進行染色比較，追蹤ERK磷酸化情況發(fā)現(xiàn)：本課題中所參與的患者標本，所有正常組織不存在ERK的磷酸化狀態(tài)；而所有腫瘤組織都會發(fā)生ERK的磷酸化，但是，不同患者，其腫瘤組織免疫組化積分法不同?？紤]之所以存在不同患者，其ERK磷酸化水平不同，是因為不同患者所處的疾病分期不同，再者，患者之間存在比較明顯的個體差異。 比較不同 ERK磷酸化積分的患者的生存時間，發(fā)現(xiàn)低 ERK磷酸化積分患者(2～6分)，其平均生存時間未表現(xiàn)出具有統(tǒng)計學意義的明顯差異；高ERK磷酸化積分患者(7～8分)，其平均生存時間也未表現(xiàn)出有統(tǒng)計學意義的明顯差異；低積分組(2～6分)與高積分組(7～8分)患者的平均生存時間之間存在明顯的具有統(tǒng)計學意義的差異。 比較不同積分患者的時間節(jié)點的存活率，結果發(fā)現(xiàn)低積分組患者明顯優(yōu)于高級分組患者，但是，部分低分組(2分組)其三個時間節(jié)點的死亡率未發(fā)現(xiàn)有具有統(tǒng)計學意義的差異，考慮可能與患者的例數(shù)偏少有關；3分組與4分組、5分組與6分組相比較，未表現(xiàn)出統(tǒng)計學差異，考慮當積分接近時，患者生存質量狀況受到多各方面綜合因素的影響，因此，未能表現(xiàn)出明顯的差異；3分組分別與5分組、6分組比較，4分組分別于5分組、6分組比較，發(fā)現(xiàn)其3個月死亡率無明顯差異，但是，低積分組的6個月、9個月的生存率會明顯優(yōu)于高積分組；7分組與8分組比較，未顯示出具有統(tǒng)計學意義的差異。分別讓3分組、4分組、5分組、6分組與7分組、8分組進行比較，發(fā)現(xiàn)3、4、5、6分組的患者的3個月、6個月、9個月時間節(jié)點的生存率要明顯優(yōu)于7分組與8分組，說明低分組患者的生存率優(yōu)于高級分組。 本研究通過采取對結直腸癌手術患者采用免疫組化積分法分別測定癌組織及癌旁正常粘膜組織 ERK蛋白磷酸化分布狀態(tài)及表達情況進行評分，術后間斷隨訪患者的生存狀態(tài)，顯示出 p- ERK在結直腸癌預后判斷方面獨特的優(yōu)勢。但是，由于選取的樣本量比較小，p-ERK在預測結直腸癌患者預后的價值還有待于進行進一步的臨床檢驗驗證。

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馬利峰(1976～) 男，黑龍江佳木斯人，本科，主管技師。

胡春榮( 1978 ～ ) 女，黑龍江佳木斯人，碩士，副主任醫(yī)師。E - mail: lfj1992@126.com。

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1008-0104(2017)04-0150-02

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