劉俊得 劉博 鮑克杰 藺玉華

（1.天津鑫三角水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司 天津 寧河 301500）

（2. 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 宿遷農(nóng)科所 江蘇 宿遷 223800）

（3.江蘇省泗陽縣楊集魚種場(chǎng) 江蘇 泗陽縣 楊集村）

泥鰍人工催產(chǎn)、自然受精的繁殖方法

劉俊得1劉博2鮑克杰3藺玉華2

（1.天津鑫三角水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司 天津 寧河 301500）

（2. 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 宿遷農(nóng)科所 江蘇 宿遷 223800）

（3.江蘇省泗陽縣楊集魚種場(chǎng) 江蘇 泗陽縣 楊集村）

本文通過優(yōu)化泥鰍催產(chǎn)藥物配方、采用人工催產(chǎn)、自然受精、反沖式流水孵化方式，研究了本地泥鰍產(chǎn)卵和孵化技術(shù)。結(jié)果表明：催產(chǎn)藥物 （LRH-A2） 4μg/kg、（DOM）2.0mg/ kg和 （HCG）400 IU/kg，三者混合注射。將親魚放入產(chǎn)卵網(wǎng)箱，自然產(chǎn)卵。藥物效應(yīng)時(shí)間10-14h，催產(chǎn)后18h，將親魚移出，收集受精卵，采用反沖式微流水孵化桶孵化。孵化水溫24℃-26℃ ，魚胚胎發(fā)育30-35h出膜。采用本方法， 催產(chǎn)率為91.0%， 受精率為95.3%，孵化率為 89.9%；產(chǎn)后親魚存活率為90%, 同比人工受精存活率提高了50%。

泥鰍； 人工催產(chǎn)；自然受精；繁殖

泥鰍(Misgurnus anguillicaudatus)隸屬于鯉形目(Cypriniformes)、鰍科(Cobitidae)、花鰍亞科(Cobitinae)、泥鰍屬(Gobiobotia) ，在我國(guó)除西部高原外，自南至北均有分布 。近年來，國(guó)內(nèi)除了養(yǎng)殖本土泥鰍(local loach)和大鱗副泥鰍(Paramisgurnus dabryanus)外，部分地區(qū)引進(jìn)了臺(tái)灣泥鰍(Taiwan loach)養(yǎng)殖。泥鰍是高蛋白、低脂肪的高檔水產(chǎn)魚類，可食用部分占80%，蛋白質(zhì)含量為18.45%-20.7%， 脂肪含量為2.7%-2.8% ，因其肉質(zhì)細(xì)嫩， 味道鮮美， 營(yíng)養(yǎng)豐富，被譽(yù)為“水中人參”，目前在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)廣受歡迎。 泥鰍屬雜食性魚類，耐低氧，對(duì)水質(zhì)要求不高，易于各種規(guī)模的養(yǎng)殖。隨著泥鰍養(yǎng)殖的發(fā)展, 苗種需求量與日劇增, 特別是人工繁殖的優(yōu)質(zhì)苗種緊缺, 不能滿足市場(chǎng)需求, 為此一些學(xué)者進(jìn)行過一些研究 。以往泥鰍的繁殖技術(shù)大多報(bào)道為人工授精方法，然而，此方法使產(chǎn)后親魚皮膚受傷或藥物過量死亡率高達(dá)50%。鑒于泥鰍繁殖現(xiàn)有技術(shù)的不足，本文提供方法簡(jiǎn)單、易操作、可規(guī)?；a(chǎn)苗種的繁殖新方法,以期對(duì)今后泥鰍的苗種繁殖有所啟示。

1.試驗(yàn)材料

試驗(yàn)?zāi)圉q親魚來源天津?qū)幒哟蟊辨?zhèn)，天津鑫三角水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司的3齡本地泥鰍。

2.試驗(yàn)方法

2.1 親魚挑選

產(chǎn)孵前1個(gè)月，挑選3齡親魚，將親魚強(qiáng)化培育，飼料為天津天世農(nóng)牧科技有限公司生產(chǎn)泥鰍顆粒飼料，日投喂量為魚體重3-5%。選擇性成熟好、健康雌魚100尾，腹部飽滿、柔軟，生殖孔乳突出，全長(zhǎng)14.5—23.55cm,體質(zhì)重20.25—62.80g；選擇雄魚130尾，體色鮮艷，皮膚完整，全長(zhǎng)15.12-19.13 cm，體質(zhì)重17.42—33.47g。

2.2 人工催產(chǎn)

在水溫24℃-26℃時(shí) ，從暫養(yǎng)池中挑選親魚（雌雄比例為1：1.3）進(jìn)行催產(chǎn)。注射藥物及劑量：促黃體釋放激素類似物（LRH-A2）4μg/kg、馬來酸地歐酮（DOM）2mg/kg和絨毛膜促性腺激素（HCG）400IU/kg，三者混合注射。注射方法：采用一次性背部肌肉注射，雄魚劑量減半。

2.3 自然受精和孵化過程

將打針后的親魚放入產(chǎn)卵網(wǎng)箱，自然產(chǎn)卵。產(chǎn)卵箱使用100目篩絹布縫制而成，規(guī)格為長(zhǎng)2.5 mx寬1.0mx 高1.0m。產(chǎn)卵箱放在室內(nèi)水泥池中，水泥池水體為長(zhǎng)5mx 寬8mx深 1.3 m。每網(wǎng)箱投放100組魚，以水泵循環(huán)流水刺激親魚產(chǎn)卵和增氧。利用暖氣循環(huán)水調(diào)試水溫為24℃-26℃。藥物效應(yīng)時(shí)間為10-14h，催產(chǎn)后18h，將親魚移出，收集受精卵。

受精卵經(jīng)清水沖洗后，放入孵化桶。每桶放4.0萬-5.0萬卵。孵化桶直徑15cm，高40 cm，孵化桶置于裝滿清水的孵化槽中，孵化槽為長(zhǎng)方體狀，長(zhǎng)2.5m×寬0.45 m ×高0.3 m，使用孵化桶微流水孵化。孵化槽每天換水2-3次。預(yù)先備好一個(gè)平面槽，槽內(nèi)懸吊和平放60目網(wǎng)片。當(dāng)孵化桶10 % 魚胚出膜時(shí)，將魚胚倒在平面槽的網(wǎng)片上繼續(xù)孵化。

2.4 親魚性腺發(fā)育、懷卵量及生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定

泥鰍親魚取自24月齡5尾，測(cè)定全長(zhǎng)和體質(zhì)量。對(duì)測(cè)定魚體進(jìn)行解剖，稱量性腺質(zhì)重，取性腺中段1 g，放在培養(yǎng)皿內(nèi)計(jì)數(shù)，計(jì)算總懷卵量。

2.5 催產(chǎn)魚存活率、受精率、孵化率統(tǒng)計(jì)方法

催產(chǎn)24 h將親魚移出產(chǎn)卵箱后，檢查、記錄產(chǎn)卵雌魚尾數(shù)，計(jì)算催產(chǎn)率；在魚胚發(fā)育至原腸期之前，大約孵化時(shí)間8 h, 從孵化桶中選3個(gè)點(diǎn)抽樣300粒魚卵，檢查魚卵受精率；在魚胚發(fā)育 28h（出膜前2h）、30h (10% 魚胚出膜)、35h（ 50%魚胚出膜），抽樣檢查300粒魚胚，記錄死亡魚胚數(shù)；親魚產(chǎn)卵后移至?xí)吼B(yǎng)池，記錄7d內(nèi)存活數(shù)，統(tǒng)計(jì)催產(chǎn)親魚存活率。

催產(chǎn)率( %)=產(chǎn)卵魚數(shù)/催產(chǎn)魚數(shù)X100

受精率( %) =受精卵數(shù)/樣本卵數(shù)× 100

孵化率( %) =出苗數(shù)/樣本受精卵數(shù)× 100

3.結(jié)果

3.1 泥鰍生長(zhǎng)及性腺發(fā)育

見表1，6月齡泥鰍性腺已出現(xiàn)分化，雌鰍性腺重1g左右。11月齡雌鰍體質(zhì)重13.20±1.79 g, 性腺重1.13±0.78 g。 24月齡性成熟雌鰍，體質(zhì)重43.10±13.1 g, 性腺重6.06±3.45 g, 成熟系數(shù) 0.02 ，懷卵量大約2.0-3.0 萬粒；雄鰍體質(zhì)重26.90±5.10 g，性腺重0.08±0.03 g, 成熟系數(shù) 0.003。

3.2 人工催產(chǎn)、自然受精及魚苗孵化情況

表2顯示，在平均水溫 24-26 ℃ ，雌雄魚比例1：1.3，催產(chǎn)藥物效應(yīng)時(shí)間為10-14 h ，催產(chǎn)率、受精率、孵化率分別為91%、 95.3%、89.9%。

此外，受精24 h后，將產(chǎn)后親魚移入暫養(yǎng)池，每天兩次用高錳酸鉀1ppm濃度消毒30分鐘，連續(xù)消毒3d , 1周后檢查親魚存活率為 90 % ，而以往實(shí)驗(yàn)證明，人工授精親魚存活率不到50 %。由此可見，采用自然受精的方法， 大大降低了產(chǎn)后親魚的死亡率。

表1. 泥鰍生長(zhǎng)及性腺發(fā)育狀況

表2. 不同藥物組合對(duì)親魚催產(chǎn)效果

表3. 泥鰍的人工繁殖情況

4.小結(jié)與討論

4.1 藥物配方與同類研究技術(shù)比較

以往泥鰍催產(chǎn)藥物的文獻(xiàn)，很少采用三種藥物同時(shí)使用，劑量與本方法也不同。多數(shù)僅用HCG和DOM，而且HCG的藥量是本方法的幾倍以上。例如路志鳴， 李孝珠催產(chǎn)藥物的最佳配比組：使用2.5ugLRH-A2/尾 和0.5mgDOM/尾 ，5IUHCG 和0.5mgDOM/尾；田功太等采用 1μgLRH-LA2/尾+400 IU HCG/尾。上述方法催產(chǎn)，親魚產(chǎn)卵后死亡率很高，其原因可能是藥物過高，對(duì)親魚的性腺?gòu)?qiáng)烈刺激，使魚體受到嚴(yán)重?fù)p傷。此外，泥鰍體表無鱗，人工受精時(shí)，體表受傷，產(chǎn)后皮膚感染致死。反之，本試驗(yàn)劑量為4μgLRH-LA2/Kg+400 IU HCG/ Kg+2.5mgDOM/Kg，催產(chǎn)率為91%以上，產(chǎn)后親魚成活率90%。研究表明，泥鰍的人工繁殖中，采用3種催產(chǎn)藥物，低劑量注射，是保護(hù)親魚和獲得高催產(chǎn)率的較好方法。

4.2 采用反沖式流水孵化方式，提高魚苗孵化率的生產(chǎn)意義

本試驗(yàn)利用反沖式孵化桶孵化泥鰍，可人為控制水流速，操作方便；在孵化過程中，根據(jù)魚胚（比重大）和雜物碎片、卵皮（比重輕）比重不同，死卵等異物及時(shí)流出孵化桶，保持桶內(nèi)的活卵不被水霉菌等感染，從而大大提高了魚卵的孵化率。此種孵化方式在生產(chǎn)中應(yīng)用，完善了人工繁殖技術(shù) ，必將促進(jìn)泥鰍苗種的規(guī)模化擴(kuò)繁。

4.3 雌雄魚數(shù)量的性比適宜，對(duì)自然產(chǎn)卵、受精率的影響

小型魚類不易進(jìn)行人工授精，尤其是泥鰍，體表無鱗，人工授精后，產(chǎn)后親魚大部分死亡。有關(guān)泥鰍人工授精的親魚死亡率情況未見報(bào)道。作者以往人工授精試驗(yàn)表明，親魚存活率不到50%，與本文泥鰍自然授精親魚存活率達(dá)91%相比，說明泥鰍自然產(chǎn)卵受精好于人工授精。此外，泥鰍雄性個(gè)體小，雌雄配組比例按1:1 會(huì)降低受精率，根據(jù)3年試驗(yàn)結(jié)果，本文提出了♀：♂比例為1.1.3最佳配比， 從而保證了小型魚類產(chǎn)卵、受精率。

（略）

江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項(xiàng)目： （CX（15）1014）；江蘇省水產(chǎn)三新工程項(xiàng)目（Y2013-36）

劉俊得（1965-），男，天津?qū)幒涌h人，助理工程師，主要從事水產(chǎn)養(yǎng)殖研究，E-mail：shuichanke@163.com

★通訊作者：藺玉華（1950-），女，山東濰坊人，研究員，主要從事魚類生理和毒理研究。E-mail:linyuhua50@sohu.com